基因表达载体的构建是基因工程的核心。图中甲为限制酶EcoRⅠ的识别序列，图乙表示目的基因及...

基因表达载体的构建是基因工程的核心。图中甲为限制酶EcoRⅠ的识别序列，图乙表示目的基因及限制酶切点，图丙表示目的基因上的DNA片段，图丁表示质粒。请回答下列问题：

（1）从供体真核生物的某组织中获取mRNA，并以此为模板反转录产生多种片段，与载体连接后储存在一个受体菌群中，该受体菌群体叫____文库，从该文库中获得的目的基因_________（填“含”或“不含”）启动子、终止子、内含子。

（2）若用图甲所示的限制酶EcoRⅠ切割外源DNA，就其专一性而言，切开的是G和A所在的两个_________之间的_________键，即图丙的②处。

（3）为了使目的基因和质粒定向连接，并且有利于受体细胞的筛选，提高重组效率，应该选择的限制酶是PstⅠ和___________，如果大肠杆菌是受体细胞，则其体内应不含________基因，以利于筛选出含质粒的受体菌。

（4）PCR技术扩增图乙中的目的基因时，需要提供模板、Taq酶、_______（原料）、引物C和引物_________等条件。

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基因表达载体的构建是基因工程的核心。图1为限制酶EcoRⅠ的识别序列，图2表示目的基因及限制酶切点，图3表示目的基因上的DNA片段，图4表示质粒。回答下列问题：

（1）若用图1所示的限制酶EcoRⅠ切割外源DNA，就其特异性而言，切开的是__________之间相连的键。

（2）图3为目的基因中的某一片段，下列有关叙述正确的是__________。

A.若图中的ACT能决定一个氨基酸，则ACT可称为一个密码子

B.DNA聚合酶和DNA连接酶都可作用于②处，解旋酶作用于①处

C.若只用这个片段中的3个碱基对，排列出的DNA片段有64种

D.就游离的磷酸基而言，该片段与重组质粒相比多了2个游离的磷酸基

（3）若利用PCR技术增加目的基因的数量，由图2可知，A、B、C、D四种单链DNA片段中应选取__________作为引物（DNA复制子链的延伸方向5’→3’）。该DNA分子在PCR仪中经过4次循环后会产生等长的目的基因片段__________个。

（4）为了使目的基因和质粒定向连接并且有利于受体细胞的筛选，提高重组效率，应该选择的限制酶是__________。如果用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ同时对质粒进行切割，假设同时只有任意两个位点被切断且每次机会相等，则形成含有完整抗四环素基因的DNA片段有__________种。

（5）如果大肠杆菌是受体细胞，则其体内应不含__________基因，以利于筛选出含重组质粒的受体菌。目的基因能在大肠杆菌细胞内表达出相同的蛋白质，其遗传学基础是____________________。

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基因表达载体的构建是基因工程的核心。图1为限制酶EcoRⅠ的识别序列，图2表示目的基因及限制酶切点，图3表示目的基因上的DNA片段，图4表示质粒。回答下列问题：

（1）若用图1所示的限制酶EcoRⅠ切割外源DNA，就其特异性而言，切开的是__________之间相连的键。

（2）图3为目的基因中的某一片段，下列有关叙述正确的是__________。

A.若图中的ACT能决定一个氨基酸，则ACT可称为一个密码子

B.DNA聚合酶和DNA连接酶都可作用于②处，解旋酶作用于①处

C.若只用这个片段中的3个碱基对，排列出的DNA片段有64种

D.就游离的磷酸基而言，该片段与重组质粒相比多了2个游离的磷酸基

（3）若利用PCR技术增加目的基因的数量，由图2可知，A、B、C、D四种单链DNA片段中应选取__________作为引物（DNA复制子链的延伸方向5’→3’）。该DNA分子在PCR仪中经过4次循环后会产生等长的目的基因片段__________个。

（4）为了使目的基因和质粒定向连接并且有利于受体细胞的筛选，提高重组效率，应该选择的限制酶是__________。如果用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ同时对质粒进行切割，假设同时只有任意两个位点被切断且每次机会相等，则形成含有完整抗四环素基因的DNA片段有__________种。

（5）如果大肠杆菌是受体细胞，则其体内应不含__________基因，以利于筛选出含重组质粒的受体菌。目的基因能在大肠杆菌细胞内表达出相同的蛋白质，其遗传学基础是____________________。

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基因表达载体的构建是基因工程的核心。图1为限制酶EcoRⅠ的识别序列，图2表示目的基因及限制酶切点，图3表示目的基因上的DNA片段，图4表示质粒。请回答下列问题

（1）若用图1所示的限制酶EcoRⅠ切割外源DNA，就其特异性而言，切开的是__________之间相连的化学键。

（2）图3为目的基因中的某一片段，下列有关叙述正确的是__。

A．若图中右侧碱基序列为ACT能决定一个氨基酸，则ACT可称为一个密码子

B．DNA聚合酶和DNA连接酶都可作用于①②处

C．若只用这个片段中的3个碱基对，排列出的DNA片段有64种

D．就游离的磷酸基而言，该片段与重组质粒相比多了2个游离的磷酸基

（3）若利用PCR技术增加目的基因的数量，由图2可知，A、B、C、D四种单链DNA片段中应选取_____作为引物（DNA复制子链的延伸方向5′→3′）。该DNA分子在PCR仪中经过第_______次循环会产生等长的目的基因，该次循环能产生__个这样的片段。

（4）为了使目的基因和质粒定向连接并且有利于受体细胞的筛选，提高重组效率，应该选择的限制酶是__。如果用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ同时对质粒进行切割，假设同时只有任意两个位点被切断且每次机会相等，则形成含有完整抗四环素基因的DNA片段有__种。

（5）如果大肠杆菌是受体细胞，则其体内应不含____________基因，以利于筛选出含重组质粒的受体菌。目的基因能在大肠杆菌细胞内表达出相同的蛋白质，其遗传学基础是____________________。

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基因表达载体的构建是基因工程的核心。图1为限制酶EcoRⅠ的识别序列，图2表示目的基因及限制酶切点，图3表示目的基因上的DNA片段，图4表示质粒。请回答下列问题

（1）若用图1所示的限制酶EcoRⅠ切割外源DNA，就其特异性而言，切开的是__________之间相连的化学键。

（2）图3为目的基因中的某一片段，下列有关叙述正确的是__。

A．若图中右侧碱基序列为ACT能决定一个氨基酸，则ACT可称为一个密码子

B．DNA聚合酶和DNA连接酶都可作用于①②处

C．若只用这个片段中的3个碱基对，排列出的DNA片段有64种

D．就游离的磷酸基而言，该片段与重组质粒相比多了2个游离的磷酸基

（3）若利用PCR技术增加目的基因的数量，由图2可知，A、B、C、D四种单链DNA片段中应选取_____作为引物（DNA复制子链的延伸方向5′→3′）。该DNA分子在PCR仪中经过第_______次循环会产生等长的目的基因，该次循环能产生__个这样的片段。

（4）为了使目的基因和质粒定向连接并且有利于受体细胞的筛选，提高重组效率，应该选择的限制酶是__。如果用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ同时对质粒进行切割，假设同时只有任意两个位点被切断且每次机会相等，则形成含有完整抗四环素基因的DNA片段有__种。

（5）如果大肠杆菌是受体细胞，则其体内应不含____________基因，以利于筛选出含重组质粒的受体菌。目的基因能在大肠杆菌细胞内表达出相同的蛋白质，其遗传学基础是____________________。

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基因表达载体的构建是基因工程的核心。图1为限制酶EcoRⅠ的识别序列，图2表示目的基因及限制酶切点，图3表示目的基因上的DNA片段，图4表示质粒．请回答下列问题：

（1）若用图1所示的限制酶EcoRⅠ切割外源DNA，就其特异性而言，切开的是____________之间相连的化学键．

（2）图3为目的基因中的某一片段，下列有关叙述正确的是_________。

A．若图中的ACT能决定一个氨基酸，则ACT可称为一个密码子

B．DNA聚合酶和DNA连接酶都可作用于②处，解旋酶作用于①处

C．若只用这个片段中的3个碱基对，排列出的DNA片段有64种

D．就游离的磷酸基而言，该片段与重组质粒相比多了2个游离的磷酸基

（3）若利用PCR技术增加目的基因的数量，由图2可知，A、B、C、D四种单链DNA片段中应选取_________作为引物（DNA复制子链的延伸方向5′→3′）．该DNA分子在PCR仪中经过4次循环后会产生等长的目的基因片段_________个。

（4）为了使目的基因和质粒定向连接并且有利于受体细胞的筛选，提高重组效率，应该选择的限制酶是________。如果用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ同时对质粒进行切割，假设同时只有任意两个位点被切断且每次机会相等，则形成含有完整抗四环素基因的DNA片段有________种。

（5）如果大肠杆菌是受体细胞，则其体内应不含_______　 基因，以利于筛选出含重组质粒的受体菌．目的基因能在大肠杆菌细胞内表达出相同的蛋白质，其遗传学基础是_____________________________。

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基因表达载体的构建是基因工程的核心。图1为限制酶EcoRⅠ的识别序列，图2表示目的基因及限制酶切点，图3表示目的基因上的DNA片段，图4表示质粒。

请回答下列问题：

（1）请在方框内写出由图1所示的限制酶EcoRⅠ切割外源DNA所形成的粘性末端。

____

（2）图3为目的基因中的某一片段，连接②处化学键的酶有_____________。

（3）若利用PCR技术増加目的基因的数量，由图2可知，A、B、C、D四种单链DMA片段中除了B作为引物外，_________(填写A或C或D）亦可作为引物。

（4）为了使目的基因和质粒定向连接并且有利于受体细胞的筛选，提高重组效率，应该选择的限制酶是__________。

（5）如果大肠杆菌是受体细胞，则其体内应不含__________基因，以利于筛选出含重组质粒的受体菌。

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基因表达载体的构建是基因工程的核心。图1为限制酶EcoRⅠ的识别序列，图2表示目的基因及限制酶切点，图3表示目的基因上的DNA片段，图4表示质粒。

请回答下列问题：

（1）请在方框内写出由图1所示的限制酶EcoRⅠ切割外源DNA所形成的粘性末端。

____

（2）图3为目的基因中的某一片段，连接②处化学键的酶有_____________。

（3）若利用PCR技术増加目的基因的数量，由图2可知，A、B、C、D四种单链DMA片段中除了B作为引物外，_________(填写A或C或D）亦可作为引物。

（4）为了使目的基因和质粒定向连接并且有利于受体细胞的筛选，提高重组效率，应该选择的限制酶是__________。

（5）如果大肠杆菌是受体细胞，则其体内应不含__________基因，以利于筛选出含重组质粒的受体菌。

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基因工程重要环节是构建基因表达载体。图1为限制酶EcoRⅠ的识别序列和切割位点，图2表示DNA片段，图3表示目的基因及限制酶切点，图4表示质粒。请回答下列问题：

（1）若图2就是图1中的最左边显示的三个碱基对，则④⑤⑥⑦⑧⑨对应的碱基依次是_________。限制酶EcoRⅠ切割外源DNA，切开的位置是图2中编号为______位置的________键。

（2）图3中的A、B、C、D为与目的基因两端配对的四种单链DNA片段，在不同情况下可以作为引物，在PCR技术中，扩增此目的基因，应该选用________两个作为引物。该DNA分子在PCR仪中经过4次循环后会产生目的基因片段__________个。

（3）图4中，如果用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ对此质粒进行三种方法切割。第一种方法用其中一种酶、第二种方法用其中两种酶、第三种方法用其中三种酶分别切割，依次产生_______、_______、_____三种片段，三种方法总共可以形成________种不同的片段，其中含有完整抗四环素基因的DNA片段有______种。

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下列关于限制性核酸内切酶的相关叙述正确的是（　　 ）

A．限制酶的切点不一定在识别序列内部

B．获取目的基因不一定用到限制酶

C．构建表达载体时可能用两种不同的限制酶

D．不同的限制酶识别序列和产生的黏性末端可能相同

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