呼吸缺陷型酵母菌是野生型酵母菌的突变菌株，其线粒体功能丧失，只能进行无氧呼吸。科研人员为获...

呼吸缺陷型酵母菌是野生型酵母菌的突变菌株，其线粒体功能丧失，只能进行无氧呼吸。科研人员为获得高产酒精的呼吸突变型酵母菌进行了相关研究。

（1）酵母菌发酵产生酒精首先要通入无菌空气，目的是______________________。一段时间后密封发酵要注意控制发酵罐中的______________________条件（至少答出2个）。

（2）为优化筛选呼吸缺陷型酵母菌的条件，研究人员设计了紫外线诱变实验，记录结果如下表。表中A、B、C分别是__________。据表中数据分析，最佳诱变处理的条件为_______________________________。

（3）TTC是无色物质，可以进入细胞内与足量的还原剂[H]反应生成红色物质。为筛选呼吸缺陷突变菌株可以在基本培养基中添加____________，该培养基属于___________培养基。如果出现___________的菌落则为呼吸缺陷型酵母菌，原因是____________________________。

（4）科研人员为检测该呼吸突变型酵母菌是否具备高产酒精的特性，做了相关实验，结果如图所示。由图中数据推测该呼吸缺陷型酵母菌__________（填“适宜”或“不适宜”）作为酒精发酵菌种，依据是______________________。

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呼吸缺陷型酵母菌是野生型酵母菌的突变菌株，其线粒体功能丧失，只能进行无氧呼吸。科研人员为获得高产酒精的呼吸突变型酵母菌进行了相关研究。

（1）酵母菌发酵产生酒精首先要通入无菌空气，目的是______________________。一段时间后密封发酵要注意控制发酵罐中的______________________条件（至少答出2个）。

（2）为优化筛选呼吸缺陷型酵母菌的条件，研究人员设计了紫外线诱变实验，记录结果如下表。表中A、B、C分别是__________。据表中数据分析，最佳诱变处理的条件为_______________________________。

（3）TTC是无色物质，可以进入细胞内与足量的还原剂[H]反应生成红色物质。为筛选呼吸缺陷突变菌株可以在基本培养基中添加____________，该培养基属于___________培养基。如果出现___________的菌落则为呼吸缺陷型酵母菌，原因是____________________________。

（4）科研人员为检测该呼吸突变型酵母菌是否具备高产酒精的特性，做了相关实验，结果如图所示。由图中数据推测该呼吸缺陷型酵母菌__________（填“适宜”或“不适宜”）作为酒精发酵菌种，依据是______________________。

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研究人员用X射线照射野生型脉孢菌孢子，经选择培养，获得了三种营养缺陷型突变菌株（如图）．如果培养C突变型脉胞菌，需要在基本培养基中加入

（注：×表示不能产生相应的酶，而精氨酸是脉胞菌正常生活所必需的营养物质）

A. 前体物质　　 B. 鸟氨酸　　 C. 瓜氨酸　　 D. 精氨酸

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科研人员在某野生的果蝇种群中偶然发现了一只突变型的雌性个体，为确定该突变是显性突变还是隐性突变，突变基因是位于常染色体上还是位于性染色体上。科研人员将该果蝇与纯合野生型雄蝇进行杂交，F1只有一种表现型，F2雄蝇全为野生型，雌蝇有野生型和突变型。研究人员做了如下两种假设：

假设一：相对性状由常染色体上的一对等位基因控制，突变型雄性纯合致死；

假设二：相对性状由XY同源区段一对等位基因控制，雌雄均无致死情况。

(1)若假设一成立，则________为隐性性状，F2雌蝇中野生型与突变型果蝇数量之比为__________________；若F2雌雄果蝇相互交配，则后代中的雌性与雄性果蝇的比例为________________________________。

(2)现已确定假设二成立，请用上述实验中出现的果蝇为实验材料，通过一次杂交实验加以验证。

实验设计方案：___________________________

预期结果： _________________________________________。

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（9分）回答下列关于微生物的问题。

营养缺陷型是指野生型菌株由于基因突变，致使细胞合成途径出现某些缺陷，丧失合成某些物质的能力，如氨基酸、维生素、碱基等的合成能力出现缺陷，必须在基本培养基（野生型菌株最低营养要求）中添加缺陷的营养物质（补充培养基）才能正常生长的一类突变株。基本培养基中加入一些营养物质，可以满足该微生物的各种营养缺陷型生长的培养基称为完全培养基。营养缺陷型在基础理论研究和生产应用中有广泛作用。青霉素能抑制细菌细胞壁的生物合成，可用于淘汰野生型菌株。筛选营养缺陷型菌株一般通过四个环节，即诱变、淘汰野生型、检出和鉴定营养缺陷型。

1.取新活化枯草芽孢杆菌制备菌悬液，再用紫外线照射处理。下列关于将诱变后存活的个体培养，淘汰野生型菌株的做法和原理，正确的是（多选）

培养在含有青霉素的基本培养基中，淘汰野生型菌株，保留缺陷型菌株

培养在含有青霉素的补充培养基中，淘汰野生型菌株，保留缺陷型菌株

完全培养基中青霉素可以杀死野生型菌株，缺陷型菌株得以生存

补充培养基中缺陷型菌株可以生存，野生型菌株不能生存

基本培养基中野生型可以生长繁殖，青霉素将其杀死

基本培养基中缺陷型不可以生长繁殖，青霉素不能将其杀死

2.在培养皿倒上一层不含菌的基本培养基，待冷凝后加上一层含菌的基本培养基，其后再浇上一层不含菌的基本培养基。经培养后出现菌落，在皿底将菌落标记为A1、A2…，然后在其上再倒一薄层完全培养基，再培养，出现新的菌落，在皿底标记为B1、B2…，则A菌落与B菌落分别较可能是_______________、_______________（均选填野生型/突变型）。

3.将待测菌落处理后涂布于某培养基平板上培养，用灭菌牙签逐个挑取待测菌，先后点接于A培养基和B培养基平板上。前后位置及号码相对应。培养后观察。见图一。为检出营养缺陷型，A、B培养基应分别为__________培养基、__________培养基。菌落（      ）为营养缺陷型。

4.为鉴定上步检出的营养缺陷型是哪种营养缺陷型，将待测菌种悬液涂于图二含有基本培养基的培养皿中，培养皿背面划线标注C、D、E三区。C、D、E为三滤纸片，分别浸有氨基酸混合液、维生素混合液和碱基混合液。培养后观察。当观察到________________________现象，说明是该营养缺陷型。图二培养基也可称为_________培养基。

5.如检测菌为碱基类营养缺陷型，要进一步鉴定是哪种碱基营养缺陷型，可同图二方法加浸该营养物质的滤纸片，如加浸________________的滤纸片。

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已知某突变型酵母，其呼吸链在线粒体中断。下列推断错误的是

A. 突变酵母能产生[H]，且乙醇代谢途径未变

B. 突变酵母发酵效率高于野生型，可用于酿酒发酵

C. 氧气充足时，野生型酵母种群增值速率大于突变体

D. 通入氧气后，突变酵母的产物主要是C02和H2O

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科研人员在某地区野生型果蝇(正常眼色）种群中发现两只突变型褐眼雌果蝇，分别记为果蝇A和果蝇B。为研究果蝇A和果蝇B的突变是否为同一突变类型，进行了如下实验。

请回答：

(1)果蝇B发生了___________(填“显性”或“隐性”）突变，判断的依据是__________________。

(2)果蝇A的突变基因位于_______染色体上，判断的依据是_________________。

(3)实验一的子代中，导致雌、雄中正常眼色与褐眼比例差异的可能原因是_______，请用遗传图解方式表示实验一得到子代的过程(基因用字母R、r表示）。_________________

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某科研人员在某地区野生型果蝇（正常眼色）种群中发现两只突变型褐眼雌果蝇，分别记为果蝇A和果蝇B。为研究果蝇A和果蝇B的突变是否为同一突变类型，进行了如下实验（突变基因均能独立控制褐色素的合成而表现褐眼）。据此分析正确的是（　　 ）

A. 让果蝇A与实验二中F1代褐眼雄果蝇杂交，其后代出现褐眼果蝇的概率是2/3

B. 果蝇A发生了显性突变，突变基因位于常染色体上

C. 果蝇B发生了显性突变，突变基因位于X染色体上

D. 果蝇A发生了隐性突变，突变基因位于X染色体上

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为获得纤维素酶高产菌株，科研人员进行了下列分离、筛选、鉴定工作。

（1）为分离纤维素分解菌，科研人员配制了下表所示成分的培养基，该表空白处的两种成分是_________。

（2）科研人员将采集的富含纤维素的土壤放入无菌水中，振荡混匀，制成悬液。为获得较均匀分布的单菌落，还需要将悬液进行___________，用_________法接种于固体培养基上。

（3）选择单菌落数目适宜的培养基，加入一定浓度的刚果红溶液，一段时间后洗去培养基表面的刚果红溶液，观察并比较菌落和透明圈直径的比值，该比值_________（“大”、“小”）的菌落纤维素酶产量更高。

（4）将获得的菌株进行液体培养后，从培养液的_______（填“上清液”或“沉淀物”）提取获得纤维素酶。

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回答下列（一）、（二）两个小题：

（一）为获得果胶酶，科研人员进行了下列果胶酶高产菌株的分离、筛选、鉴定及果胶酶在生产上的应用试验。

（1）为分离果胶酶产生的某种霉菌，科研人员配制了下表所示成分的培养基，该表中应加入的成分a是_____________，该成分在培养基中的作用为___________________。在各种成分溶解配制好后应将pH调到___________，再进行高压蒸汽灭菌。

（2）将获得的菌株进行扩大培养后，再用_________________（工具）从滤液中获得粗提的果胶酶。如要检测获得的果胶酶活性，可先将等量的果胶酶和果胶混合处理适宜时间，再加入等量的______________，最后根据沉淀物的生成量来判断。

（3）在果汁和果酒制作过程中，常用果胶酶处理来提高相应产品的__________________。生产上通过明胶、海藻酸钠（包埋剂）或戊二醛（交联剂）等对果胶酶进行___________处理，以减少酶的使用量，降低生产成本。

（二）拟南芥中有抗冻基因CBF。苜蓿是温带地区重要的牧草，低温是制约其生长的限制因子之一。下图是培育转基因抗冻苜蓿植株的过程示意图，据图回答下列问题：

（1）图中的①先要用某种限制性核酸内切酶断开DNA片段中的___________个磷酸二酯键得到目的基因，再通过_________________技术获得大量的目的基因。这些目的基因必须要与质粒等载体重组后再导入宿主细胞，其主要原因是目的基因经重组后在宿主细胞内能实现___________（A．转录　 B．复制　　 C．翻译　　 D．整合到宿主DNA中）。

（2）图中的②过程的农杆菌经转化成功后再去感染苜蓿组织块，这种转基因方法的主要优点有______________________________、____________________________（至少写出二点）。

（3）图中的③过程若是通过胚胎发生途径实现，须将愈伤组织经______________培养得到大量的单细胞，再转移到含有适当配比的____________________________的培养基中继续分化成胚状体，最后形成相应的植株。

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