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目前，重组蛋白疫苗、腺病毒疫苗、核酸疫苗等多种类型的新冠病毒疫苗都在研发当中。新冠病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原，一男子与新冠肺炎患者有接触史，在进行医学隔离期间，检查发现该男子血清中有相应的抗S蛋白抗体出现。某研究小组研制重组蛋白疫苗的简要操作流程如下。请分析回答：
（1）疫苗研制实验步骤②构建重组表达载体A和重组表达载体B必须使用DNA连接酶，该酶的作用是_____________________。若不进行步骤②而将S蛋白基因直接导入大肠杆菌，一般情况下，不能得到表达的S蛋白，其原因是_______________________。
（2）为了检验步骤⑥所表达的S蛋白是否具有病毒S蛋白的抗原特性，可进行相关实验检测，实验思路是_________________________________。
（3）过程④的大量生产，需对导入表达载体A的大肠杆菌进行筛选和纯化培养。如图是纯化过程中一个平板的菌落分布，该接种方法是___________________；推测接种时可能的操作失误是_________________。
（4）注射疫苗是预防新冠肺炎的有效途径，但是并不意味着接种过新冠疫苗的人将来不会成为新冠肺炎患者。可能的原因有______________________。
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我国目前临床使用的乙肝疫苗大多为基因工程疫苗，其有效成分是一种叫做乙肝表面抗原的蛋白质（S蛋白），对应的基因为s基因。请回答：
（1）在构建重组DNA分子时，要用限制性核酸内切酶处理_________，并用_________酶使两者结合。将重组DNA分子导入到哺乳动物细胞，经筛选得到工程细胞。
（2）在细胞培养过程中，工程细胞在生长过程中有_________现象，需要定期使用_________酶处理，以便于分瓶培养。
（3）为提髙工程细胞培养的成功率，下列措施中不幸采用的是（_____）
A.取单个细胞进行培养 B.加入胰岛素 C.二氧化碳培养箱 D.加入动物血清
（4）由于哺乳动物细胞培养较难，成本较高，近些年科学家们又发明了“乳腺生物发生器”，进而从转基因动物的乳汁中提取所需产品。在这种技术中，作为重组DNA分子受体细胞的一般是__________________。
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我国目前临床使用的乙肝疫苗大多为基因工程疫苗，其有效成分是一种叫做乙肝表面抗原的蛋白质（S蛋白），对应的基因为s基因。请回答：
（1）在构建重组DNA分子时，要用限制性核酸内切酶处理_________，
并用_________酶使两者结合。将重组DNA分子导入到哺乳动物细胞，经筛选得到工程细胞。
（2）在细胞培养过程中，工程细胞在生长过程中有_________现象，需要定期使用_________酶处理，以便于分瓶培养。
（3）为提髙工程细胞培养的成功率，下列措施中不幸采用的是（_____）
A.取单个细胞进行培养 B.加入胰岛素 C.二氧化碳培养箱 D.加入动物血清
（4）由于哺乳动物细胞培养较难，成本较高，近些年科学家们又发明了“乳腺生物发生器”，进而从转基因动物的乳汁中提取所需产品。在这种技术中，作为重组DNA分子受体细胞的一般是__________________。
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人类在预防与诊疗传染性疾病过程中，经常使用疫苗和抗体。已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原。疫苗生产和抗体制备的流程如下图：
（1）过程①代表的是 ，过程③构建A基因重组载体时，启动子和终止子是重新构建的，其应该能被受体细胞的 所识别，以便于其转录。
（2）在将X进行扩大培养之前，至少需要经过两次筛选，方法分别是用 和 。
（3）以实验操作过程中用到的技术有 （至少写三个）。
（4）在给小鼠皮下注射A蛋白时，要重复注射几次的目的是 。
（5）对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的 来制备疫苗。对该传染病疑似患者确诊时，可以从疑似患者体内分离出病毒与已知病毒进行核酸序列比较，或用图中的
与分离出的病毒进行特异性检测。
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人类在预防与诊疗传染性疾病过程中，经常使用疫苗和抗体。已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原。疫苗生产和抗体制备的流程如下图：
（1）过程①代表的是 ，过程③构建A基因重组载体时，启动子和终止子是重新构建的，其应该能被受体细胞的 所识别，以便于其转录。
（2）在将X进行扩大培养之前，至少需要经过两次筛选，方法分别是用 和 。
（3）以实验操作过程中用到的技术有 （至少写三个）。
（4）在给小鼠皮下注射A蛋白时，要重复注射几次的目的是 。
（5）对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的 来制备疫苗。对该传染病疑似患者确诊时，可以从疑似患者体内分离出病毒与已知病毒进行核酸序列比较，或用图中的 与分离出的病毒进行特异性检测。
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某种能感染人的禽流感病毒为RNA病毒，该病毒表面有多种蛋白质，其中A蛋白为主要抗原（能被宿主细胞强烈识别）。可通过制备基因疫苗或蛋白质疫苗预防该病毒的感染。请回答下列问题：
（1）要获得编码A蛋白的基因疫苗，首先要提取该抗原的RNA并将RNA__________形成DNA（基因疫苗）。要获得大量的基因疫苗可利用PCR技术完成，该技术依据的原理是____________________。
（2）以A蛋白作为疫苗比基因疫苗更安全，其原因是A蛋白自身没有感染力，但保留有__________。A蛋白进入人体将引起人体特异性免疫中的__________免疫。
（3）若利用基因工程技术培育能在分泌乳汁时产生A蛋白的牛，需要向牛的受精卵中导入__________。在目的基因的前端位置上有一段特殊结构的DNA片段，称为__________，它是__________识别和结合的位点。在上述研究中 要获得胚胎干细胞，则其来源于囊胚的__________或胚胎的原始性腺。
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疫苗和抗体已被广泛应用于预防与诊疗传染性疾病的过程，已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原。疫苗的生产和抗体的制备流程如下图所示，请回答下列问题：
（1）③构建A基因重组载体时，启动子是重新构建的，它应该能被受体细胞的________所识别，以便于其催化转录过程。
（2）下图为A基因的结构示意图，已知Ⅱ区的碱基数是2000个，其中阴影区域碱基数是800个，空白区域中G和C的总数共有400个，则由该区域转录产生的能指导蛋白质合成的mRNA中A和U的总数是_______个。
（3）在给小鼠皮下注射A蛋白质时，要重复注射几次的目的是通过二次免疫，增加小鼠体内的_______数目。过程⑥的实质为_______。
（4）在将X进行扩大培养前，至少需要经过_______次筛选，其中包括_______和_______，扩大培养的原理是_______。
（5）对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的_______来制备疫苗。对该传染病疑似患者确诊时，可以从疑似患者体内分离出病毒与已知病毒进行核酸序列比较，或用图中的_______与分离中的病毒进行特异性检测。
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现代生物技术与技术应用
已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原。 疫苗的生产和抗体的制备流程如图所示。 请回答下列问题
（1）图中X的名称是_____。
（2）A基因重组载体（ 重组质粒） 在受体细胞中表达出A蛋白，该过程除证明了质粒可以作为运载体外，还证明了_____。
A、质粒能自我复制 B．质粒有一个或多个酶切点
C．质粒有标记基因 D．生物间共用相同遗传密码子
（3）A基因在大肠杆菌细胞内表达时，表达出的蛋白质可能会被降解。 为防止蛋白质被降解，在实验中对选用受体细胞大肠杆菌的要求是_____（ 填文字）。
（4）在提取分离A蛋白生产过程中，要保持A蛋白的活性，需注意的事项有（ 多选）_____。
A、适宜的温度 B．添加逆转录酶
C．适宜的pH D．添加蛋白酶抑制剂
形成有效的重组质粒，选择适当的限制性内切酶很重要。 如图1示意大肠杆菌质粒的相关基因与限制酶切点；图2示意有关限制酶在DNA分子中的具体切点。
（5）要成功转入目的基因且重组效率较高，选择限制酶的方案是_____，其原因是_____。
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已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原。疫苗的生产和抗体的制备流程如下图所示。请回答下列问题：
（1）过程①代表的是____________，过程③构建A基因重组载体时，启动子和终止子是重新构建的，它们应该能被受体细胞的__________所识别，以便于其催化转录过程。
（2）上图为A基因的结构示意图，已知Ⅱ区的碱基数是2 000个，其中阴影区域碱基数是800个，空白区域中G和C的总数共有400个，则由该区域能指导蛋白质合成的片段转录产生的mRNA中A和U总数是________个。
（3）在给小鼠皮下注射A蛋白时，要重复注射几次的目的是通过二次免疫，增加小鼠体内的______________数目。
（4）在将X进行扩大培养前，至少需要经过2次筛选，第一次是将____________________筛选出来，第二次是将____________________________筛选出来。
（5）对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的__________来制备疫苗。对该传染病疑似患者确诊时，可以从疑似患者体内分离出病毒与已知病毒进行核酸序列比较，或用图中的__________________与分离出的病毒进行特异性检测。
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将乙型肝炎病毒表面抗原的基因插入酵母菌基因组中，使之在酵母菌细胞中充分表达，获得的产物经纯化后可制成乙型肝炎疫苗。回答下列问题：
（1）获取乙型肝炎病毒表面抗原基因的方法有多种，如可根据表面抗原蛋白质的结构推测__________，进而推测目的基因的脱氧核苷酸序列，再进行人工合成。目的基因合成后可在Taq酶的作用下通过PCR技术大量扩增，该技术的原理是_________；扩增前要根据一段已知目的基因的核苷酸序列合成______________。
（2）目的基因在导入酵母菌细胞之前需要构建基因表达载体，该过程的工具酶有________。基因表达载体中RNA聚合酶识别和结合的部位被称为_________________________。
（3）目的基因在受体细胞中是否翻译出蛋白质，可用___________技术来检测。若目的基因导入酵母菌细胞后未能稳定维持和表达其遗传特性，其原因可能是______________________（答出两点即可）。
（4）实验证明，一定时间内间隔注射该疫苗3次效果更好，其主要原因是___________。
并用_________酶使两者结合。将重组DNA分子导入到哺乳动物细胞，经筛选得到工程细胞。