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我国目前临床使用的乙肝疫苗大多为基因工程疫苗，其有效成分是一种叫做乙肝表面抗原的蛋白质（S蛋白），对应的基因为s基因。请回答：
（1）在构建重组DNA分子时，要用限制性核酸内切酶处理_________，并用_________酶使两者结合。将重组DNA分子导入到哺乳动物细胞，经筛选得到工程细胞。
（2）在细胞培养过程中，工程细胞在生长过程中有_________现象，需要定期使用_________酶处理，以便于分瓶培养。
（3）为提髙工程细胞培养的成功率，下列措施中不幸采用的是（_____）
A.取单个细胞进行培养 B.加入胰岛素 C.二氧化碳培养箱 D.加入动物血清
（4）由于哺乳动物细胞培养较难，成本较高，近些年科学家们又发明了“乳腺生物发生器”，进而从转基因动物的乳汁中提取所需产品。在这种技术中，作为重组DNA分子受体细胞的一般是__________________。
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我国目前临床使用的乙肝疫苗大多为基因工程疫苗，其有效成分是一种叫做乙肝表面抗原的蛋白质（S蛋白），对应的基因为s基因。请回答：
（1）在构建重组DNA分子时，要用限制性核酸内切酶处理_________，
并用_________酶使两者结合。将重组DNA分子导入到哺乳动物细胞，经筛选得到工程细胞。（2）在细胞培养过程中，工程细胞在生长过程中有_________现象，需要定期使用_________酶处理，以便于分瓶培养。
（3）为提髙工程细胞培养的成功率，下列措施中不幸采用的是（_____）
A.取单个细胞进行培养 B.加入胰岛素 C.二氧化碳培养箱 D.加入动物血清
（4）由于哺乳动物细胞培养较难，成本较高，近些年科学家们又发明了“乳腺生物发生器”，进而从转基因动物的乳汁中提取所需产品。在这种技术中，作为重组DNA分子受体细胞的一般是__________________。
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(12分)【生物——现代生物科技专题】我国目前临床使用的乙肝疫苗大多为基因工程疫苗，其有效成分是乙肝表面抗原蛋白。下图是将乙肝表面抗原基因转移到烟草细胞内生产乙肝疫苗的示意图，请据图回答：
(1)过程①表示_________。为了使目的基因正常表达，其首端必须有______识别和结合的部位。若限制酶切出了平末端，要选择___________进行连接。
(2)目的基因通过过程②进入农杆菌细胞内，并在农杆菌细胞内维持稳定和表达的过程称为___________。
(3)将乙肝表面抗原基因导入烟草细胞的方法称为________________。
(4)将乙肝表面抗原基因导入烟草细胞后，需要进行基因的检测与鉴定：首先检测____是否插入了乙肝表面抗原基因；其次检测_____是否转录出相应的mRNA；最后检测乙肝表面抗原基因是否翻译出乙肝表面抗原蛋白，检测的方法是____________。
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乙型肝炎是由乙肝病毒（一种DNA病毒）引起的一种慢性传染病。临床上用于预防乙肝的疫苗大多数为基因工程疫苗，其有效成分是乙肝病毒表面的抗原蛋白（简称乙肝表面抗原）。如图为乙肝疫苗的生产过程示意图，回答下列问题：
（1）在疫苗生产过程中，需要从乙肝患者的肝细胞中提取乙肝表面抗原的mRNA，原因是_______________然后利用乙肝表面抗原的mRNA在_______________催化作用下合成乙肝表面抗原基因。
（2）图中①过程为_______________，为使乙肝表面抗原基因正常表达，基因表达载体的首端需要添加启动子，作用是___________________。
（3）图中三种方法均可获得相同的乙肝疫苗，其理论依据是_______________。为提高重组DNA导入酵母菌的转化效率，常用_______________溶液处理酵母菌细胞。从微生物的特点角度分析，用发酵工程的方法生产乙肝疫苗的优点是_______________。
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乙肝病毒是一种DNA病毒，侵入人体后专门寄生在肝脏细胞中。乙肝疫苗是应用基因工程技术生产的疫苗，其主要成分是乙肝病毒的表面抗原蛋白。下列叙述不正确的是
A．乙肝疫苗不具备感染性和致病性，但可刺激机体产生抗体
B．乙肝病毒侵入人体后可诱发人体产生细胞免疫过程
C．生产乙肝疫苗需将乙肝病毒表面抗原蛋白基因导入受体细胞中并使之表达
D．可在液体培养基中大量增殖乙肝病毒并提取其表面抗原蛋白制成疫苗
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现有的肝硬化、肝癌多从乙肝发展而来，接种乙肝疫苗是预防乙肝病毒感染的最有效方法。现在乙型肝炎疫苗的研制已经到了基因工程疫苗阶段。
图为“乙肝基因工程疫苗”的生产和使用过程，将乙肝病毒表面蛋白(HBsAg)基因片段导入大肠杆菌，让重组后的大肠杆菌在培养过程中产生HBsAg。其中选用的质粒lacZ基因可使细菌利用加入培养基的物质X-gal，从而使菌落显现出蓝色，若无该基因，菌落则成白色。
1.下列①～④表示基因工程疫苗研制的步骤，其中步骤①是___________；①-④步骤的正确排序是________________。
① ？ ②重组DNA分子导入大肠杆菌
③获取HBsAg基因 ④HBsAg基因与运载体的连接
2.据图可知获取HBsAg基因选用的限制酶方案是 。
A.EcoRV和BamHI B.只用EcoRV C.只用EcoRI D.只用BamHI
3.图中所示抗原蛋白HBsAg和相应抗体的基因表达过程中，不同的是 。
A.基因所来源的物种 B.转录出的mRNA碱基序列
C.氨基酸对应遗传密码子表 D.翻译出的氨基酸序列
4.为了获得产生HBsAg的大肠杆菌，培养一段时间挑选出_____（蓝色/白色）的菌落进一步培养，分子HBsAg属于免疫反应中的_____________。
5.接种基因工程疫苗比接种灭活获减毒的病毒疫苗更安全，试从疫苗的结构特点解释原因：___________________________________________________。
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乙肝表面抗原是乙肝病毒的蛋白质外壳，该蛋白质由乙肝病毒的乙肝表面抗原基因控制合成。利用乙肝表面抗原可以制成乙肝疫苗。科学家将乙肝表面抗原基因(SSI)导人双子叶植物马铃薯细胞中，成功获得了乙肝表面抗原，为乙肝疫苗的制备提供了新的途径。回答下列问题：
(l)在获得SSI基因后，若需要增加其数量，可以采用___ 技术进行扩增，该技术的前提是有____以便合成引物；该操作过程中需要将反应体系加热至90～95℃，其作用是____。
(2)将SSI基因导人马铃薯细胞之前，需要构建基因表达载体，该结构上启动子的作用是 _________。构建基因表达载体时，一般是将SSI基因插入到农杆菌的___上。
(3)通过筛选可以获得成功导人SSI基因的马铃薯细胞，然后利用____技术对该细胞进行培养可以获得转基因马铃薯植株；可以通过抗原一抗体杂交技术进行检测，若出现____，则说明该植株已产生乙肝表面抗原。
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某高校研发的幽门螺杆菌疫苗为基因工程疫苗，对该菌引发的胃炎、胃溃疡等疾病具有较好的预防效果，其有效成分是一种该菌表面抗原蛋白质，请回答下列问题。
（1）根据表面抗原蛋白质的氨基酸序列推测出目的基因的 ，进行人工合成，然后通过 技术大量扩增。
（2）基因工程的核心步骤是 ，要利用 连接被限制酶切开的磷酸二酯键。
（3）目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程，称为 。在表达过程中，启动子需与 识别和结合，从而驱动转录过程。最终翻译是否成功，常用的检测方法是 。
（4）实验证明，一定时间内间隔口服该疫苗3次效果更好，其主要原因是体内产生的 细胞数量增多，导致获得的免疫预防作用更强，持续时间更久。
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某高校研发的幽门螺杆菌疫苗为基因工程疫苗，对该菌引发的胃炎、胃溃疡等疾病具有较好的预防效果，其有效成分是一种该菌表面抗原蛋白质，请回答下列问题。
（1）根据表面抗原蛋白质的氨基酸序列推测出目的基因的_______（1分），进行人工合成，然后通过______技术大量扩增。
（2）基因工程的核心步骤是_______。其中标记基因的作用是 。
（3）目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞
内维持稳定和表达的过程，称为______。在表达过程中，启动子需与______识别和结合，从而驱动转录过程。最终翻译是否成功，常用的检测方法是_________。（4）实验证明，一定时间内间隔口服该疫苗3次效果更好，其主要原因是体内产生的________细胞数量增多，导致获得的免疫预防作用更强，持续时间更久。
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某高校研发的幽门螺杆菌疫苗为基因工程疫苗，对该菌引发的胃炎、胃溃疡等疾病具有较好的预防效果，其有效成分是一种该菌表面抗原蛋白质，请回答下列问题。
（1）根据表面抗原蛋白质的氨基酸序列推测出目的基因的_______，进行人工合成，然后通过______技术大量扩增。
（2）基因工程的核心步骤是_______。其中标记基因的作用是 。
（3）目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞 内维持稳定和表达的过程，称为______。在表达过程中，启动子需与______识别和结合，从而驱动转录过程。最终翻译是否成功，常用的检测方法是_________。
（4）实验证明，一定时间内间隔口服该疫苗3次效果更好，其主要原因是体内产生的________细胞数量增多，导致获得的免疫预防作用更强，持续时间更久。
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并用_________酶使两者结合。将重组DNA分子导入到哺乳动物细胞，经筛选得到工程细胞。
内维持稳定和表达的过程，称为______。在表达过程中，启动子需与______识别