乙型肝炎是由乙肝病毒（一种DNA病毒）引起的一种慢性传染病。临床上用于预防乙肝的疫苗大多数为基因工程疫苗，其有效成分是乙肝病毒表面的抗原蛋白（简称乙肝表面抗原）。如图为乙肝疫苗的生产过程示意图，回答下列问题：
（1）在疫苗生产过程中，需要从乙肝患者的肝细胞中提取乙肝表面抗原的mRNA，原因是_______________然后利用乙肝表面抗原的mRNA在_______________催化作用下合成乙肝表面抗原基因。
（2）图中①过程为_______________，为使乙肝表面抗原基因正常表达，基因表达载体的首端需要添加启动子，作用是___________________。
（3）图中三种方法均可获得相同的乙肝疫苗，其理论依据是_______________。为提高重组DNA导入酵母菌的转化效率，常用_______________溶液处理酵母菌细胞。从微生物的特点角度分析，用发酵工程的方法生产乙肝疫苗的优点是_______________。
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乙型肝炎是由乙肝病毒（一种DNA病毒）引起的一种慢性传染病。临床上用于预防乙肝的疫苗大多数为基因工程疫苗，其有效成分是乙肝病毒表面的抗原蛋白（简称乙肝表面抗原）。如图为乙肝疫苗的生产过程示意图，回答下列问题：
（1）在疫苗生产过程中，需要从乙肝患者的肝细胞中提取乙肝表面抗原的mRNA，原因是_______________然后利用乙肝表面抗原的mRNA在_______________催化作用下合成乙肝表面抗原基因。
（2）图中①过程为_______________，为使乙肝表面抗原基因正常表达，基因表达载体的首端需要添加启动子，作用是___________________。
（3）图中三种方法均可获得相同的乙肝疫苗，其理论依据是_______________。为提高重组DNA导入酵母菌的转化效率，常用_______________溶液处理酵母菌细胞。从微生物的特点角度分析，用发酵工程的方法生产乙肝疫苗的优点是_______________。
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回答有关现代生物技术的问题
乙肝是由乙型肝炎病毒（HBV）引起的一种慢性传染病，主要采用基因工程乙肝疫苗进行防治。科研人员采用转基因技术将乙肝病毒表面抗原（HBsAg）基因片段导入酵母细胞或中国仓鼠卵巢细胞（CHO），让重组后的酵母或CHO细胞在体外培养过程中产生HBsAg，将其分离、提纯之后制成乙肝疫苗，部分生产过程如图。
（1）下列①～④表示获得重组CHO细胞的步骤，其中步骤④是______；①-④步骤的正确排序是______。
①重组DNA分子导入CHO细胞
②筛选成功导入HBsAg基因的CHO细胞
③人工合成HBsAg基因
④______
（2）大量培养重组酵母和重组CHO细胞生产乙肝疫苗过程中，需将培养液中HBsAg与其他杂质分离，可采用的方法是______（多选）。
A．破碎细胞 B．加入硫酸铵 C．改变pH D．冷冻干燥
（3）利用重组酵母和重组CHO细胞生产乙肝疫苗，分别属于生物工程中的______、______领域。
（4）利用重组CHO细胞和重组酵母生产基因工程乙肝疫苗，目前都在进行规模化生产，但两种方法各有不足和优势。请在下列选项中选择合适的编号填入表对应的空格中，以表示你对此问题的分析（编号可重复选用）：
①结构简单、遗传操作较为容易
②表达的HBsAg更接近天然形式，疫苗稳定性好
③表达的HBsAg与天然形式存在差异
④培养条件要求高，生产成本较高
⑤可将HBsAg分泌到胞外，易于分离提纯
⑥易于培养、繁殖迅速，生产成本较低
| 利用重组酵母细胞 生产乙肝疫苗 | 利用重组CHO细胞 生产乙肝疫苗 | |
| 优势 | ______ | ______ |
| 不足 | ______ | ______ |
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人类是乙型肝炎病毒的唯一宿主，接种乙肝疫苗是预防乙肝病毒感染的最有效方法。乙型肝炎疫苗的研制先后经历了血源性疫苗和基因工程疫苗阶段。请回答：
（1）血源性“乙型肝炎疫苗”是取用乙肝病毒感染者的血液，用高速离心提纯血液中的乙肝病毒，之后再灭活，制成乙肝疫苗。乙肝病毒结构中的__________________________成分是激发免疫反应的抗原。
（2）上图为“乙肝基因工程疫苗”的生产和使用过程，质粒中lacZ基因可使细菌利用加入培养基的物质X-gal，从而使菌落显现出蓝色，若无该基因，菌落则成白色。图中过程①有两种限制酶选择方案，它们分别是__________________。
（3）获取目的基因的方法除了图中用酶切的方法从细胞中分离以外，还可以通过_______________来获得。据图可知，该目的基因的具体功能是___________________________________________________________。
（4）为了筛选含目的基因的重组质粒的大肠杆菌，可在培养大肠杆菌的通用培养基中加入______和______，培养一段时间挑选出_________色的菌落进一步培养获得大量目的菌。
（5）用基因工程疫苗接种比血源性疫苗更安全，因为血源性疫苗制备过程中需要保证_______________成功。
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人类是乙型肝炎病毒的唯一宿主，现有的肝硬化、肝癌多从乙肝发展而来，接种乙肝疫苗是预防乙肝病毒感染的最有效方法。乙型肝炎疫苗的研制先后经历了血源性疫苗和基因工程疫苗阶段。乙肝基因工程疫苗的生产和使用过程如下：
（1）从图可知，该目的基因的具体功能是______。
（2）若要迅速获取大量的目的基因，以提高重组质粒生产的效率，常用的技术是（写全称）______。过程②常需要 处理大肠杆菌细胞，促使转化完成。
（3）要形成有效的重组质粒，选择适当的限制性内切酶很重要，图1示意大肠杆菌质粒的相关基因与限制酶切点；图2示意有关限制酶在DNA分子中的具体切点。
①要成功转入目的基因，有两种选择限制酶的方案，它们分别是______或______。
②下图是筛选、获取含有目的基因大肠杆菌的基本过程：B、C培养基中除基本营养物质外还应分别加入的抗生素 、 ，在B、C两个培养基中含有重组质粒的大肠杆菌形成的菌落共有 个。
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人类是乙型肝炎病毒的唯一宿主，现有的肝硬化、肝癌多从乙肝发展而来，接种乙肝疫苗是预防乙肝病毒感染的最有效方法。乙型肝炎疫苗的研制先后经历了血源性疫苗和基因工程疫苗阶段。血源性“乙型肝炎疫苗”是取用乙肝病毒感染者的血液，用高速离心提纯血液中的乙肝病毒，之后再灭活，制成乙肝疫苗。基因工程乙肝疫苗的生产和使用过程如图1，图2示意大肠杆菌质粒的相关基因与限制酶切点；图3示意有关限制酶在DNA分子中的具体切点。请回答相关问题：
（1）从图1可知，该目的基因的具体功能是______________。
（2）选择大肠杆菌质粒作为运载体的原因是______________。
（3）用基因工程疫苗接种比血源性疫苗更安全，试从疫苗的结构特点解释原因:__________。
（4）形成有效的重组质粒，选择适当的限制性内切酶很重要。某学习小组根据图2和图3提出了三种方案：单独使用BamHⅠ、分别使用BamHⅠ和EcoRⅠ以及分别使用HindⅢ和EcoRⅠ，且认为选择使用BamHⅠ和EcoRⅠ最佳。该方案的优点是________________。如果选择使用HindⅢ和EcoRⅠ，则在构建重组质粒后，还需要运用_________技术以检测目的基因是否导入受体细胞。
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现有的肝硬化、肝癌多从乙肝发展而来，接种乙肝疫苗是预防乙肝病毒感染的最有效方法。现在乙型肝炎疫苗的研制已经到了基因工程疫苗阶段。
图为“乙肝基因工程疫苗”的生产和使用过程，将乙肝病毒表面蛋白(HBsAg)基因片段导入大肠杆菌，让重组后的大肠杆菌在培养过程中产生HBsAg。其中选用的质粒lacZ基因可使细菌利用加入培养基的物质X-gal，从而使菌落显现出蓝色，若无该基因，菌落则成白色。
1.下列①～④表示基因工程疫苗研制的步骤，其中步骤①是___________；①-④步骤的正确排序是________________。
① ？ ②重组DNA分子导入大肠杆菌
③获取HBsAg基因 ④HBsAg基因与运载体的连接
2.据图可知获取HBsAg基因选用的限制酶方案是 。
A.EcoRV和BamHI B.只用EcoRV C.只用EcoRI D.只用BamHI
3.图中所示抗原蛋白HBsAg和相应抗体的基因表达过程中，不同的是 。
A.基因所来源的物种 B.转录出的mRNA碱基序列
C.氨基酸对应遗传密码子表 D.翻译出的氨基酸序列
4.为了获得产生HBsAg的大肠杆菌，培养一段时间挑选出_____（蓝色/白色）的菌落进一步培养，分子HBsAg属于免疫反应中的_____________。
5.接种基因工程疫苗比接种灭活获减毒的病毒疫苗更安全，试从疫苗的结构特点解释原因：___________________________________________________。
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人类是乙型肝炎病毒的唯一宿主，接种乙肝疫苗是预防乙肝病毒感染的最有效方法。下图为“转基因酵母乙肝疫苗”的生产过程示意图，该过程所用酵母菌为毕赤酵母菌，其体内无天然质粒，科学家改造出了下图所示的pPIC9K质粒（松弛控制型，复制不受宿主细胞控制）用作载体，其与目的基因形成的重组质粒经酶切后可以与酵母菌染色体发生同源重组，将目的基因整合与染色体组已实现表达。请回答下列问题：
（1）如果要将HBsAg基因和pPIC9K质粒重组，应该在HBsAg基因两侧的A和B位置接上限制酶_________的识别序列，这样设计的优点是可避免质粒和目的基因的自身环化。步骤1应选用___________（填“E•coli”或“T4”）DNA连接酶。
（2）步骤2的目的是______________________。已知大肠杆菌每20分钟分裂一次，若1个大肠杆菌中导入了 10个重组质粒，则1小时后可从1个大肠杆菌的后代中得到重组质粒的个数___________。
（3）步骤4中应选用限制酶___________切割重组质粒以获得一段线性DNA，然后将其导入毕赤酵母菌细胞。为了确认毕赤酵母菌转化是否成功，应在培养基中加入___________以便筛选。除此以外，还可以用分子杂交技术鉴定上图中的毕赤酵母菌转化是否成功，过程如下图所示:
根据图中显示结果推算，若要获得16个成功导入该基因的酵母菌菌落，则上图中的酵母菌菌落数至少要为___________个。
（4）已知质粒在细胞传代过程中有丢失现象，试分析毕赤酵母表达系统的遗传稳定性高于大肠杆菌表达系统的主要原因_________________________________。
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乙肝病毒是一种DNA病毒。中国的乙肝病毒携带者约占总人口的10%。我国科学家通过基因工程生产出乙型肝炎病毒疫苗，为预防乙肝提供了有力的保障。回答下列问题：
（1）乙肝病毒专一侵染肝细胞的原因是_____________。
（2）乙肝病毒的基因组可编码的蛋白质及功能如下:Core蛋白是外壳蛋白；Pre-core与抑制宿主的免疫反应有关；X蛋白与病毒复制有关；S蛋白是病毒的包膜蛋白，与病毒进入细胞有关。通过基因工程生产的乙肝疫苗的有效成分是上述病毒蛋白中的___________________。
（3）通过基因工程生产乙肝疫苗的过程如图所示：
a.若要获得大量的目的基因，可采用PCR技术进行体外扩增，该技术中使用的引物有__________种，其作用是_________________。
b.在①②过程中需使用的工具酶是____________。②过程中常用的载体是__________。
c.为提高②过程的转化效率，常采用的方法是_____________。
（4）使用酵母菌作为受体菌生产乙肝疫苗的效果更好，从细胞结构的角度分析，原因是___________。
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乙型肝炎病毒（HBV）是一种DNA病毒，可通过多种途径传染。研究表明肝炎患者的肝癌发病率比自然人群高，HBV与原发性肝癌密切相关。注射乙型肝炎疫苗是预防乙型肝炎最有效的方法，以下说法正确的是（ ）
A. HBV携带者一般是不需要注射乙肝疫苗的
B. 接种乙肝疫苗后人体会产生相应抗体，该抗体可与病毒类的所有抗原结合
C. 抗HBV的抗体也能和侵入肝细胞内的病毒特异性结合，阻止其增殖
D. 第一次接触HBV时，由于体内没有相应的记忆细胞，因此只能发生非特异性免疫
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回答下列关于基因工程的问题。
口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的一种偶蹄动物传染病，目前常用接种弱毒疫苗的方法预防。疫苗的主要成分是该病毒的一种结构蛋白VPI。科学家尝试利用转基因番茄来生产口蹄疫疫苗，过程如下图1所示。图2表示目的基因与pZHZ1质粒构建重组质粒的过程，E、F、G、H分别为A、B、C、D四种不同限制酶的酶切位点。请据图回答。
1．如图1所示，口蹄疫病毒的遗传物质为RNA，则在过程①中，必须用到的酶是 ；在过程②中，必须用到的酶是 。
2．图2所示，若限制酶A、B切割出的末端完全不同，那么用这种双酶切的方法构建重组质粒的优点是 。
3．已知质粒pZHZ1的长度为3.7kb，（1kb=1000对碱基)其中EF区域长度为0.2kb，GE区域长度为0.8kb，FH区域长度为0.5kb。现分别用限制酶G、H切割重组质粒pZHZ2样品，结果被酶G切割成1.6kb和3.1kb两个片段，被酶H切割成1.2kb和3.5kb两个片段。据酶切结果判断VPI基因大小为 kb，并将目的基因内部的酶G、酶H切割位点用相应的字母标注在答案纸的对应位置 。
4．过程⑥的培养基中除了加入各种必需营养物质和 等激素外，还需要添加 筛选出含有重组质粒的叶片小段。
5．获得表达VPI蛋白的番茄植株以后，需要进行免疫效力的测定。具体方法是：将转基因番茄叶片提取液注射到豚鼠体内，每半个月注射一次，三次后检测豚鼠血液内产生的 的数量。
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