某实验小组利用下图所示质粒和目的基因来构建基因表达载体，将目的基因导入大肠杆菌细胞并表达。...

某实验小组利用下图所示质粒和目的基因来构建基因表达载体，将目的基因导入大肠杆菌细胞并表达。下列叙述正确的是（　　 ）

A.图中的质粒用酶A切割后，会产生8个游离的磷酸基团

B.在构建重组质粒时，可用酶A和酶C切割质粒和目的基因

C.成功导入目的基因的大肠杆菌可在含四环素的培养基中生长

D.若用酶B和酶C切割，可以避免质粒的自身环化

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下列有关基因工程的叙述,正确的是(　 )

A.目的基因导入受体细胞后,一定能稳定遗传

B.DNA连接酶的作用是将两个黏性末端的碱基连接起来

C.基因表达载体的构建是基因工程的核心

D.常用的运载体有大肠杆菌、噬菌体和动植物病毒等

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下列有关基因工程的叙述，正确的是

A．目的基因导入受体细胞后，一定能稳定遗传

B．DNA连接酶的作用是将两个粘性末端的碱基连接起来

C．基因表达载体的构建是基因工程的核心

D．常用的运载体有大肠杆菌、噬菌体和动植物病毒等

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下列有关基因工程的叙述，正确的是

A．目的基因经土壤农杆菌导入植物受体细胞后，整合到受体细胞染色体上，因此一定能稳定遗传

B．DNA连接酶的作用是将两个粘性末端的碱基连接起来

C．基因表达载体的构建是基因工程的核心，其上的启动子部位具有RNA聚合酶的结合位点

D．常用的运载体有大肠杆菌、噬菌体和动植物病毒等

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下列有关基因工程的叙述，正确的是

A．目的基因经土壤农杆菌导入植物受体细胞后，整合到受体细胞染色体上，因此一定能稳定遗传

B．DNA连接酶的作用是将两个粘性末端的碱基连接起来

C．基因表达载体的构建是基因工程的核心，其上的启动子部位具有RNA聚合酶的结合位点

D．常用的运载体有大肠杆菌、噬菌体和动植物病毒等

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科学家以质粒为载体，将金属硫蛋白基因导入烟草细胞中，培育出了汞吸收能力极强的转基因烟草。下列叙述正确的是（　　 ）

A.质粒作为载体必须具备的条件之一是具有标记基因

B.构建基因表达载体时需要限制酶和DNA聚合酶参与

C.金属硫蛋白基因插入启动子和终止子之间以便大量复制

D.培育转基因烟草时选用的受体细胞一定是受精卵

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下图为抗除草剂转基因烟草的构建过程，下列叙述错误的是（　 ）

A．构建重组质粒时需要限制酶和DNA连接酶

B．③常采用农杆菌转化法将目的基因导入烟草细胞内

C．用含大量霉菌的培养基筛选转基因烟草细胞

D．④需经植物组织培养过程才能获得抗除草剂转基因烟草

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下列关于基因工程的叙述,正确的是

A.基因表达载体的构建是核心步骤

B.常用的工具酶是限制酶和DNA连接酶

C.基因治疗现已被广泛使用

D.常用显微注射法将目的基因导入大肠杆菌

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我国科学家通过基因工程成功培育出转基因抗虫棉。请回答下列问题。

（1）基因工程常用质粒作为载体，是由于质粒具有　　　　 、　　　　 等特点。

（2）利用农杆菌转化法将抗虫基因导入植物细胞，构建重组Ti质粒时，需将含抗虫基因的DNA片段插入到Ti质粒DNA的　　　　 区域上。

（3）利用PCR技术扩增抗虫基因过程中，将温度加热至90-950C，然后冷却至55-600C，再加热至70-75℃的目的是　　　　　　　　　　　　

（4）农杆菌侵染植物细胞后，可以使抗虫基因插入到植物细胞中染色体的DNA上，则是否一定能表现出抗虫性状？　　　　 ，理由是　　　　　　　　　　　　

（5）可利用　　　　 技术将含有抗虫基因的植物细胞培育成抗虫植株，该技术证明了分化的植物细胞，仍然具有　　　　　　　　　　　　

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鸡干抗素是一种具有高效和广谱抗病毒作用的细胞因子，广泛用于动物领域的抗病毒治疗。科研人员将鸡干扰素基因作为目的基因，构建基因表达载体，通过农杆菌介导法导入烟草，以获得抗病毒烟草。下图为科研人员制备能合成鸡干扰素的烟草愈伤组织细胞的流程，①-④表示相关的操作，两种限制酶的识别序列及切割位点如表所示。请回答下列问题：

(1)步骤①中，利用PCR技术扩增干扰素基因时，设计引物序列的主要依据是_____________。科研人员还在两种引物的一端分别加上了______________和_____________序列，以便于后续的剪切和连接。

(2)步骤②所构建的基因表达载体中末标注出的必需元件还有_______________________，步骤③中需先用__________________处理农杆菌以便将基因表达载体导入细胞。

(3)步骤④中，科研人员提取愈伤组织细胞的RNA后，先通过逆转录获得DNA，再通过PCR扩增制备探针，若最终未能检测出干扰素基因，其可能原因是_________________________。

(4)用烟草花叶病毒对获得的转基因烟草和普通烟草进行接种实验，接种后第19天对照组植株进入病情指数(植物受病毒侵染的严重程度)为100的平台期，而转基因植株在第______天才进入平台期，但此时的病情指数为79，说明转基因烟草植株对病毒的侵染表现出一定的抗性，但抗性较低，可能的原因有_______________________________。

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