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“黄金大米”是一种新型转基因大米，其β-胡萝卜素的含量是普通大米的23倍，因大米抛光后呈现黄色而得名。通过转基因技术将胡萝卜素转化酶体系转入到大米胚乳中获得“黄金大米”的培育流程如图所示。请回答下列问题：（已知酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—）
（1）在基因工程中使用的载体除图中质粒外，还有________________等，图中基因Ⅰ、Ⅱ的作用是________________________________________________。
（2）图中涉及的酶Ⅰ或酶Ⅱ主要是从________中分离纯化出来的。据图分析，在构建基因表达载体c的过程中，质粒需用________（限制酶Ⅰ或限制酶Ⅱ）进行切割。
（3）图中通过过程a、b获取目的基因的方法是________法，该方法获得的目的基因________（“含”、“不含”）启动子。若过程d用到了农杆菌转化法，则目的基因插入的c的位置应该是________________。
（4）为检测水稻细胞是否表达出胡萝卜素转化酶，用到的检测方法是________。过程e获得符合要求的个体需要用到的植物激素是________。
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“黄金大米”是在普通大米中转入合成β–胡萝卜素所需的两个外源基因（玉米来源的八氢番茄红素合酶基因和细菌来源的胡萝卜素脱氢酶基因），使原本不能合成β–胡萝卜素的水稻胚乳变得可以合成，大米呈现出金黄色，故称为“黄金大米”。据此回答下列问题。
（1）从玉米、细菌体内获取的基因能拼接在一起，原因是______________。
（2）运载这两种基因的质粒上的组件往往需要进行加工：
①若在培育出的“黄金大米”中检测不到______________，说明需对启动子或终止子进行加工或替换，八氢番茄红素合酶基因和胡萝卜素脱氢酶基因的启动子应来自______________。
②为便于将两个外源基因及其他组件拼接到质粒上，所选质粒应满足的条件是_____________________。
③在重组质粒上添加合适的标记基因也是重要的一个环节，标记基因往往是______________基因，其作用是______________。
（3）借助蛋白质工程可提高细菌来源的胡萝卜素脱氢酶的活性，其基本途径是_____________________。
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胡萝卜素是一种常见的食品添加剂，美国、日本等国通过转基因技术培育出一种黄金大米。将同时含有酶A、酶B、酶D这三种酶基因的表达载体导入水稻细胞。已知酶A基因来自细菌，酶B基因来自玉米，酶D基因来自其他植物，其中的酶A基因和酶B基因可使水稻胚乳富含β-胡萝卜素而呈现金黄色，请回答下列问题：
（1）酶A、B、D基因遗传信息不同的原因是___________________________。
（2）科学家获取酶A、B、D基因的方法各不相同，酶A基因是通过PCR获得，PCR的前提是设计引物，需要引物的原因是_____________________________。酶B基因是从cDNA文库中获得，即从高效表达___________________（填生物）细胞中获取mRNA，通过反转录获取cDNA，构建cDNA文库；酶D作为标记基因，其作用是________________________________________________。
（3）要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，检测的方法是用________________作为探针，与______________________________结合，若结果显示杂交带，表明目的基因插入到染色体DNA上。
（4）若控制酶B基因有1656个碱基对，下图表示筛选获得的受体细胞中编码酶B的mRNA的部分碱基序列（已知：起始密码子为AUG，GUG；终止密码子为UAA，UAG，UGA）
图中框内mRNA片段包含了___________个密码子，如框后的序列未知，预测框后的第一个密码子最多__________种。
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胡萝卜素是一种常见的食品添加剂，美国、日本等国通过转基因技术培育出一种黄金大米。将同时含有酶A、酶B、酶D这三种酶基因的表达载体导入水稻细胞。已知酶A基因来自细菌，酶B基因来自玉米，酶D基因来自其他植物，其中的酶A基因和酶B基因可使水稻胚乳富含β-胡萝卜素而呈现金黄色，请回答下列问题：
（1）酶A、B、D基因遗传信息不同的原因是___________________________。
（2）科学家获取酶A、B、D基因的方法各不相同，酶A基因是通过PCR获得，PCR的前提是设计引物，需要引物的原因是_____________________________。酶B基因是从cDNA文库中获得，即从高效表达___________________（填生物）细胞中获取mRNA，通过反转录获取cDNA，构建cDNA文库；酶D作为标记基因，其作用是________________________________________________。
（3）要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，检测的方法是用________________作为探针，与______________________________结合，若结果显示杂交带，表明目的基因插入到染色体DNA上。
（4）若控制酶B基因有1656个碱基对，下图表示筛选获得的受体细胞中编码酶B的mRNA的部分碱基序列（已知：起始密码子为AUG，GUG；终止密码子为UAA，UAG，UGA）
图中框内mRNA片段包含了___________个密码子，如框后的序列未知，预测框后的第一个密码子最多__________种。
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胡萝卜素是一种常见的食品添加剂，美国、日本等国通过转基因技术培有出一种黄金大米。如用将同时含有酶A、酶B、酶D这二种酶基因的表达载体导人水稱细跑.已知酶A基因来自细菌，酶B基因来自玉米，酶D基因来自其他植物，其中的酶A基因和酶B基因可使水稻胚乳富含β-胡麦卜素而呈现金黄色。请回答下列问题：
（1）酶A、B、D基因遗传信息不同的原因是___________________________________。
（2）科学家获取酶A、B、D基因的方法各不相同，酶A基因是通过PCR获得，该过程中DNA解旋需加热至_______℃；酶B基因是从cDNA文库中获得，cDNA文库和基因组文库相比，基因中_______(填“有”或“无”)启动子，酶D基因作为标记基因，其作用是_________________________。
（3）将含有这三种酶基因的表达载休导人受体细胞可用我国科学家独创的一种方法，该方法简便经济，此方法叫______________。
（4）要检测转基因生物的染色体DNA上星否插入了目的基因，检测方法采用______________技术用放射性同位素标记的DNA片段作为__________________，与基因组DNA结合，若结果显示出杂交带，表明目的基因已插入染色体DNA中。
（5）成功导入上述基因的水稻细胞可通过植物组织培养技术获得幼苗，在组织培养实验中，为什么要强调相关材料，器具的灭菌以及无菌操作？___________________________________。
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（11分）我们日常吃的大米中铁含量极低，科研人员通过基因工程等技术，培育出了铁含量比普通大米高60%的转基因水稻，改良了稻米的营养品质。下图为培育转基因水稻过程示意图，请分析回答。
（1）铁结合蛋白基因来自菜豆，可通过 扩增获取，如果该基因脱氧核苷酸序列已知且比较小，还可用 方法直接人工合成。
（2）构建重组Ti质粒时，通常先要用 分别切割 。将重组Ti质粒导入农杆菌时，可以用 处理农杆菌，使重组Ti质粒易于导入。
（3）将含有重组Ti质粒的农杆菌与水稻愈伤组织共同培养时，通过培养基2的筛选培养，可以获得 ；培养基3与培养基2的区别是 。检测培育转基因水稻的目的是否达到，需要检测转基因稻米 。
（4）为研究外源基因的遗传方式，将T0代植株上收获的种子种植成T1代株系，检测各单株的潮霉素抗性。在检测的多数T1代株系内，抗潮霉素植株与潮霉素敏感植株的比例为3∶1，此结果说明外源基因的遗传符合 。有少数T1代株系的所有植株都表现为对潮霉素敏感，但其体内能检测到铁结合蛋白基因，造成这一结果最可能的原因是 。
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我们日常吃的大米中铁含量极低，科研人员通过基因工程等技术，培育出了铁含量比普通大米高60%的转基因水稻，改良了稻米的营养品质。下面为培育转基因水稻过程示意图，请回答：
（1）在上述工程中，铁结合蛋白基因称为___________，利用PCR技术扩增铁结合蛋白基因时，需要在反应体系中添加的有机物质是___________、___________、4种脱氧核糖核苷酸和耐热性的DNA聚合酶，扩增过程在PCR扩增仪中完成。
（2）将铁结合蛋白基因导入小鼠体内之前，需要操作的核心步骤是______________________，此步骤最常用的工具是___________。
（3）将含有重组Ti质粒的农杆菌与水稻愈伤组织共同培养时，通过培养基2的筛选培养，可以获得______________________；培养基3与培养基2的主要区别是_________________________________。
（4）检测培育转基因水稻的目的是否达到，需要检测转基因水稻______________________。
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我们日常吃的大米中铁含量极低，科研人员通过基因工程等技术，培育出了铁含量比普通大米高60％的转基因水稻，改良了稻米的营养品质。下图为培育转基因水稻过程示意图，请回答：
(1)在上述工程中，铁结合蛋白基因称为____________（1分），获取该基因后常用___________技术进行扩增。
(2)构建重组Ti质粒时，通常要用同种限制酶分别切割___________和__________。将重组Ti质粒转入农杆菌时，可以用___________处理农杆菌，使重组Ti质粒易于导入。
(3)将含有重组Ti质粒的农杆菌与水稻愈伤组织共同培养时，通过培养基2的筛选培养，可以获得__________；培养基3与培养基2的区别是_________。
(4)检测培育转基因水稻的目的是否达到，需要检测转基因水稻____________。
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我们日常吃的大米中铁含量极低，科研人员通过基因工程等技术，培育出了铁含量比普通大米高60%的转基因水稻，改良了稻米的营养品质。下图为培育转基因水稻过程示意图，请分析回答。
（1）重组Ti质粒中，铁结合蛋白基因作为______基因，潮霉素抗性基因作为______基因。
（2）构建重组Ti质粒时，铁结合蛋白基因应插入到_______中，以便后续随之整合到________。
（3）将含有重组Ti质粒的农杆菌与水稻愈伤组织共同培养时，通过培养基2的筛选培养 ___________，以获得愈伤组织细胞；利用培养基3培养的目的是___________。
（4）将基因工程生产的铁结合蛋白与天然的铁结合蛋白的功能活性进行比较，以确定转基因产品的功能活性是否与天然产品相同，这属于________水平的检测。
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铁元素是人体细胞生命活动不可缺少的微量元素。我们日常吃的大米中铁含量极低，科研人员通过基因工程等技术，培育出了铁含量比普通大米高60%的转基因水稻，改良了稻米的营养品质。下图为培育转基因水稻过程示意图，请分析回答：
（1）获取目的基因是实施基因工程的第一步。铁结合蛋白基因来自菜豆，且基因的脱氧核苷酸序列已知，可以用__________法获得此目的基因或用___________扩增目的基因。
（2）____________的构建是实施基因工程的第二步，也是基因工程的核心。
（3）构建重组Ti质粒时，通常要用___________分别切割_________________________。将重组Ti质粒转入农杆菌时，可以用__________处理农杆菌，使重组Ti质粒易于导入。
（4）将含有重组Ti质粒的农杆菌与水稻愈伤组织共同培养时，通过培养基2的筛选培养，可以获得_____；培养基3与培养基2的区别是________________。检测培育转基因水稻的目的是否达到，需要检测转基因水稻___________________。