2016年，日本科学家发现一种细菌能够消化塑料（PET）这种细菌通过分泌PET降解酶（PETase）来完成塑料分解。下图是从细菌中获取PET降解酶基因的流程示意图，结合所学知识及相关信息回答下列问题：
（1）从细菌中提取DNA构建基因组文库和从基因组文库中分离得到目的基因I，两个过程都要用到的酶是_____________。
（2）B过程需要用到__________酶，用该方法形成的cDNA_________（选填“可以”、“不可以”）进行物种间的基因交流。
（3）从两种文库中获取的目的基因都可以利用__________技术大量扩增，该技术的前提，是要有一段___________序列，以便根据这一序列合成引物。
（4）由于大肠杆菌容易培养，科学家想把该基因导入大肠杆菌细胞中，在导入大肠杆菌细胞前，通常采用__________处理大肠杆菌细胞，使细胞处于一种_____________的生理状态。为检测目的基因是否成功在大肠杆菌细胞中表达，可采用______________技术。
高三生物综合题中等难度题
2016年，日本科学家发现一种细菌能够消化塑料（PET）这种细菌通过分泌PET降解酶（PETase）来完成塑料分解。下图是从细菌中获取PET降解酶基因的流程示意图，结合所学知识及相关信息回答下列问题：
（1）从细菌中提取DNA构建基因组文库和从基因组文库中分离得到目的基因I，两个过程都要用到的酶是_____________。
（2）B过程需要用到__________酶，用该方法形成的cDNA_________（选填“可以”、“不可以”）进行物种间的基因交流。
（3）从两种文库中获取的目的基因都可以利用__________技术大量扩增，该技术的前提，是要有一段___________序列，以便根据这一序列合成引物。
（4）由于大肠杆菌容易培养，科学家想把该基因导入大肠杆菌细胞中，在导入大肠杆菌细胞前，通常采用__________处理大肠杆菌细胞，使细胞处于一种_____________的生理状态。为检测目的基因是否成功在大肠杆菌细胞中表达，可采用______________技术。
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科研工作者从塑料瓶回收点附近的土壤中发现了能降解塑料的细菌，研究发现这种细菌含有能够分解塑料的酶，该细菌通过分解塑料获得碳源和能量。图27是从土壤中筛选该细菌的过程。
回答下列问题：
（1）本实验利用的培养基需用________法进行灭菌，无菌技术处理除了防止实验室培养物被其他外来微生物污染外，还可______________和______________。
（2）图中的细菌培养基最好选用_______（填“牛肉膏蛋白胨培养基”“麦芽汁琼脂培养基”或“马铃薯琼脂培养基”）；图中的选择培养基应以_______为唯一碳源，其原理是____________________________________________________。
（3）为了高效利用这种酶，可利用固定化细胞技术，与固定化酶相比，固定化细胞的优势是_____________________。可用包埋法制备固定化该细菌细胞，操作过程中的海藻酸钠作用是____________________________。
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聚对苯二甲酸乙二酯(PET)是塑料类水瓶的重要原料，科学家发现了以PET为碳源和能量来源的细菌，该发现对PET类材料的回收利用、环境治理意义重大。请回答下列问题：
（1）实验小组欲从土壤中获取PET降解菌，需将土壤样品置于________为唯一碳源的培养基中进行选择培养，其目的是______________。
（2）该实验小组选取PET浓度为800 mg·L-1的富集液进行系列稀释，分别取10-3、10-4和10-5倍数的稀释液0.1 mL涂布于培养基上，每个稀释倍数涂布三个平板，各平板的菌落数分别为（286、298、297)，(35、32、31)，(36、7、2)，不适合用于计数的为________倍数的稀释液，用另外两组稀释倍数的稀释液进行计数得到的细菌数不一致的原因可能是__________________________。
（3）倒平板时应使锥形瓶的瓶口通过火焰，目的是________。在倒平板的过程中，如果培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，则这个平板不能用来培养大肠杆菌，原因是____________。用平板划线法纯化PET降解菌的过程中，在第二次及其后的划线操作时，须从上一次划线的末端开始划线，原因是__________。
（4）在保藏PET降解菌菌种时，可采取____________的方法进行长期保存。
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2019年全国多个城市出台了本市的《生活垃圾分类管理办法》我们每天产生的塑料垃圾是惊人的，怎样处理塑料垃圾是迫在眉睫的问题。科学家发现了一种能分解聚乙烯（塑料的成分）的微生物：聚乙烯分解菌，它能分泌聚乙烯降解酶降解塑料，从中获取能量。
（1）聚乙烯分解菌与目前发现的新型冠状病毒在结构上的最大区别是____________________。
（2）在筛选聚乙烯分解菌过程中，应选择含___________丰富的垃圾场土壤，制作培养基时，应将___________作为培养基中的唯一碳源，并使用___________灭菌法对培养基进行灭菌。
（3）在制备培养基时，按照培养基配方准确称量各组分，将其溶解、定容后，需先调节培养基的pH，再灭菌倒平板的原因是____________________。倒平板时的温度一般是50℃的原因是__________________。
（4）甲、乙两位同学用稀释涂布平板法测定所选土壤样品中聚乙烯分解菌的数量，在同一稀释倍数下得到以下结果：
甲同学涂布了3个平板统计的菌落数分别是110、140和149，取平均值133。
乙同学涂布了3个平板，统计的菌落数分别是27、169和176，取平均值124。
这两位同学的结果中，___________的结果可信度低，其原因是：____________________。
（5）为测定聚乙烯降解酶降解塑料的能力，需要先将该分离出来，常用凝胶色谱法，凝胶色谱法分离聚乙烯降解酶的基本过程：样品加入后进行洗脱，而后收集聚乙烯降解酶。最后收集到的蛋白质样品与刚洗脱时收集到的蛋白质相比，分子质量较___________（填“大”或“小”），原因是___________________。
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塑料的主要成分是PET，化学式:COC6H4COOCH2CH2O，PET极端稳定，日常中极难降解，这也是废弃塑料的污染是人类的一大环境难题的原因。科学家最近刚刚筛选获得了一种细菌Ideonella sakaiensis,据说这一新的细菌能有效降解PET。请回答下列问题：
（1）研究人员欲验证Ideonella sakaiensis菌株是否能降解PET，需要配制_________的培养基用于培养该细菌；若该细菌可以___________，说明Ideonella sakaiensis能够降解PET；若Ideonella sakaiensis全部死亡，则说明不能降解PET。
（2）欲分离并计数获得分解PET的纯化的Ideonella sakaiensis菌株，可用_____________(填接种方法），所用的接种工具为______。
（3）这种细菌在试管液体培养基中培养时其菌体分布如图，由图并结合前面的材料可判断该细菌的新陈代谢类型应该是_____________，所以用液体培养基培养这一种细菌时需要_______________。
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塑料的主要成分是PET，化学式:COC6H4COOCH2CH2O，PET极端稳定，日常中极难降解，这也是废弃塑料的污染是人类的一大环境难题的原因。科学家最近刚刚筛选获得了一种细菌Ideonella sakaiensis,据说这一新的细菌能有效降解PET。请回答下列问题：
（1）研究人员欲验证Ideonella sakaiensis菌株是否能降解PET，需要配制_________的培养基用于培养该细菌；若该细菌可以___________，说明Ideonella sakaiensis能够降解PET；若Ideonella sakaiensis全部死亡，则说明不能降解PET。
（2）欲分离并计数获得分解PET的纯化的Ideonella sakaiensis菌株，可用_____________(填接种方法），所用的接种工具为______。
（3）这种细菌在试管液体培养基中培养时其菌体分布如图，由图并结合前面的材料可判断该细菌的新陈代谢类型应该是_____________，所以用液体培养基培养这一种细菌时需要_______________。
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塑料的主要成分是PET，化学式:COC6H4COOCH2CH2O，PET极端稳定，日常中极难降解，这也是废弃塑料的污染是人类的一大环境难题的原因。科学家最近刚刚筛选获得了一种细菌Ideonella sakaiensis,据说这一新的细菌能有效降解PET。请回答下列问题：
（1）研究人员欲验证Ideonella sakaiensis菌株是否能降解PET，需要配制_________的培养基用于培养该细菌；若该细菌可以___________，说明Ideonella sakaiensis能够降解PET；若Ideonella sakaiensis全部死亡，则说明不能降解PET。
（2）欲分离并计数获得分解PET的纯化的Ideonella sakaiensis菌株，可用_____________(填接种方法），所用的接种工具为______。
（3）这种细菌在试管液体培养基中培养时其菌体分布如图，由图并结合前面的材料可判断该细菌的新陈代谢类型应该是_____________，所以用液体培养基培养这一种细菌时需要_______________。
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研究人员发现一种可以分解PET（聚对苯二甲酸乙二酯）塑料的细菌S，有望帮助解决塑料垃圾污染问题。细菌S在自然界中以PET塑料为营养源生存并繁殖，其能产生两种酶逐步分解PET塑料，最终产生C02和水。回答下列问题：
（1）细菌S能分解PET塑料，有些细菌则不能，根本原因是__________。细菌S不能以PET塑料的分解产物C02作为碳源的原因是____________________。
（2）用来筛选细菌S的培养基中含有KH2P04和Na2HP04，其作用是____________________。
（3）研究人员将初步筛选的细菌S菌液稀释，稀释倍数分别为104、105和106，取0.lmL涂布于培养基上，每个稀释倍数分别涂布三个平板，各平板的菌落数分别为（242、254、246），（39、37、34），（35、6、2）。以上三组不适合用于计数的为___________倍数的稀释液，用另外两组稀释倍数进行计数得到的细菌数不一致的原因可能是________________________________________。
（4）某同学认为为防止杂菌污染，可在培养基中加入青霉素，你认为该同学的观点__________（填“正确”或“不正确”），理由是______________________________。
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【生物——选修1:生物技术实践】
聚对苯二甲酸乙二酯(PET)是塑料类水瓶的重要原料,科学家发现了以PET为碳源和能量来源的细菌，该发现对PET类材料的回收利用、环境治理意义重大。请回答下列问题：
（1）实验小组欲从土壤中获取PET降解菌,需将土壤样品置于________为唯一碳源的培养基中进行选择培养，其目的是______________。
（2）该实验小组选取PET浓度为800mg·L-1的富集液进行系列稀释，分别取10-3、10-4和10-5倍数的稀释液0.1 mL涂布于培养基上，每个稀释倍数涂布三个平板，各平板的菌落数分别为（286、298、297)，(35、32、31),(36、7、2),不适合用于计数的为________倍数的稀释液,用另外两组稀释倍数的稀释液进
行计数得到的细菌数不一致的原因可能是__________________________。
（3）倒平板时应使锥形瓶的瓶口通过火焰，目的是________。在倒平板的过程中，如果培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，则这个平板不能用来培养大肠杆菌，原因是____________。用平板划线法纯化PET降解菌的过程中，在第二次及其后的划线操作时,须从上一次划线的末端开始划线，原因是__________。
（4）在保藏PET降解菌菌种时，可采取____________的方法进行长期保存。
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细菌、病毒等病原微生物给人类的健康带来了极大的危害，千百年来，人们一直在努力寻找能够与这些病原微生物抗衡的药物。直到1928年英国的细菌学家弗莱明（A.Fleming）通过实验发现了青霉菌分泌的青霉素能有效地杀死细菌，1941年英国剑桥大学毕业的科学家弗洛理（H.W.Florey）和钱恩（E.B.Chain）研究出了大规模生产青霉素的方法，并于1943年用于临床治疗，才使得成千上万的人得到救治。鉴于弗莱明、弗洛理、钱恩在青霉素研究和开发方面做出的巨大贡献，三人共享了1945年的诺贝尔医学和生理学奖。青霉素的研制成功，激发了微生物学和医学史上规模最大的科学探索活动，开创了抗菌药物开发的新纪元，各种抗生素的研制、开发和利用蓬勃发展。目前，人们经常使用的抗生素有200多种，在人类控制感染性疾病等方面起到了重要的作用。
请回答下列问题：
（1）微生物在代谢过程中，会产生多种多样的代谢产物，根据代谢产物与微生物生长繁殖的关系，青霉素属于___________。高产青霉素菌株是通过________技术培育而获得的。
（2）青霉素不仅应用在医疗方面，在基因工程技术中仍有广泛的应用。请举一例说明青霉素在基因工程操作步骤中的应用：____________________________________________
（3）抗生素是指微生物在代谢过程中产生的，能抑制或杀灭其他种类微生物的化学物质。抗生素类药物刚刚开始使用时，人们普遍地认为它能有效地杀灭细菌而对人体无害。但是，近60年的实践说明，细菌可以针对一种甚至几种抗生素产生耐药性。以前用抗生素容易对付的结核杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎双球菌等，现在已经产生了对一种或几种抗生素的耐药性，医生有时也无计可施，现在这个名单正在变得越来越长。细菌为什么会产生抗药性呢？
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（4）下列使用抗生素的事例有可能是你和你的家人经历过的，请你分析其合理性。
①甲患了流行性感冒立即使用抗生素，他认为早用抗生素可以更早地痊愈。
②乙在生病时，为了更快地控制病情，自行在医嘱的基础上加大服药计量。
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（5）在生活中，你能否为你的父母设计一个小实验，证明青霉素能有效地抑制和杀灭细菌？
①你将选择什么样的实验材料？ ②简要写出操作过程。③请预期实验结果。
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