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ACC合成酶是乙烯合成过程中的关键酶,由ACC合成酶基因(简称A基因)控制合成。将A基因反向连接在启动子和终止子间可构成反义ACC合成酶基因(A1基因),转A1基因番茄的后熟过程变慢,利于番茄的储藏和运输。

请回答:

(1)从番茄的果肉细胞中提取RNA,利用RT-PCR获取A基因,即利用RNA和PCR技术获取目的基因。利用RT-PCR获取A基因所需要的酶主要有___________。在A基因扩增过程中需要特定的引物,该引物的作用是_____________________________。

(2)S1和S2为A基因和A1基因的特异性启动子,S2在番茄果肉细胞内起作用,S1在除果肉细胞外的其他细胞内起作用。在构建转A1基因表达载体时,启动子应选择____________,不选另一个的理由是___________________。A1基因的表达元件包括启动子、终止子以及反向连接在两者之间的A基因,若用农杆菌转化法将此元件整合到番茄细胞的染色体DNA上,则应将此元件应构建在Ti质粒的____________中。

(3)在检测番茄细胞的染色体DNA上是否插入了A1基因时,__________(填“能”“不能”)用放射性物质标记的A基因做探针进行检测,理由是________________________。检测表明,与非转基因番茄相比,转A1基因蕃茄的果肉细胞内乙烯含量下降,机理是______________________________。

高三生物综合题困难题

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