基因工程为培育抗病毒植物开辟了新途径,下图为研究人员培育转花叶病毒外壳蛋白基 因(CMV-CP基因,长度为740个碱基对)番茄的主要过程示意图(Kanr为卡那霉素抗性基因)。请回答:
(1)将CMV-CP基因导入番茄细胞后,培育的番茄植株具有抗CMV感染能力,这种现象属于植物的特异性免疫,该免疫过程中抗原是____。
(2)过程①接种的农杆菌细胞中,Kanr及CMV-CP基因应整合在Ti质粒的T-DNA内部,这是由于 __。使用液体培养基培养农杆菌的目的是____。
(3)为确定用于筛选的Kan适宜浓度,研究人员进行实验,结果如右表。最终确定过程③④加入的Kan浓度为35mg·L-1,该浓度既可___,又不至于因Kan浓度过高影响导入重组DNA细胞的生长发育。
Kan浓度/mg.L-1 | 接种外植体数 | 形成愈伤组织数 | 外植体状况 |
0 | 55 | 49 | 正常形成愈伤组织 |
25 | 66 | 2 | 只膨大、不易形成愈伤组织 |
35 | 66 | 0 | 变褐色死亡 |
50 | 64 | 0 | 变褐色死亡 |
(4)过程③、④所需的培养基为 __(填“固体”或“液体”)培养基。过程⑤再生植株抗性鉴定时,引物序列设计的主要依据是_____,引物序列长度及G+C比例直接影响着PCR过程中_______(填“变性”或“退火”或“延伸”)的温度。
(5)过程⑤电泳结果如图,其中l号为标准参照,2号为重组Ti质粒的PCR产物,3-6号为抗性植株DNA的PCR产物,可以确定3—6号再生植株中 ____号植株基因组中整合了CMV-CP基因。
高三生物综合题中等难度题
基因工程为培育抗病毒植物开辟了新途径,下图为研究人员培育转花叶病毒外壳蛋白基 因(CMV-CP基因,长度为740个碱基对)番茄的主要过程示意图(Kanr为卡那霉素抗性基因)。请回答:
(1)将CMV-CP基因导入番茄细胞后,培育的番茄植株具有抗CMV感染能力,这种现象属于植物的特异性免疫,该免疫过程中抗原是____。
(2)过程①接种的农杆菌细胞中,Kanr及CMV-CP基因应整合在Ti质粒的T-DNA内部,这是由于 __。使用液体培养基培养农杆菌的目的是____。
(3)为确定用于筛选的Kan适宜浓度,研究人员进行实验,结果如右表。最终确定过程③④加入的Kan浓度为35mg·L-1,该浓度既可___,又不至于因Kan浓度过高影响导入重组DNA细胞的生长发育。
Kan浓度/mg.L-1 | 接种外植体数 | 形成愈伤组织数 | 外植体状况 |
0 | 55 | 49 | 正常形成愈伤组织 |
25 | 66 | 2 | 只膨大、不易形成愈伤组织 |
35 | 66 | 0 | 变褐色死亡 |
50 | 64 | 0 | 变褐色死亡 |
(4)过程③、④所需的培养基为 __(填“固体”或“液体”)培养基。过程⑤再生植株抗性鉴定时,引物序列设计的主要依据是_____,引物序列长度及G+C比例直接影响着PCR过程中_______(填“变性”或“退火”或“延伸”)的温度。
(5)过程⑤电泳结果如图,其中l号为标准参照,2号为重组Ti质粒的PCR产物,3-6号为抗性植株DNA的PCR产物,可以确定3—6号再生植株中 ____号植株基因组中整合了CMV-CP基因。
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烟草花叶病毒(TMV)是一种在烟草及蔬菜等经济作物中广泛传播的病毒,对农业生产造成很大的危害。研究者利用植物基因工程的方法将烟草花叶病毒外壳蛋白基因(CP基因)导入烟草并在转化的烟草植株中表达,使其获得对烟草花叶病毒的抗性。下图是转化烟草植株的培育流程,请回答:
(1)含有CP基因的cDNA文库是通过将TMV的RNA进行 获得的。在对cDNA进行PCR扩增时,设计的引物自身不能含有 序列。
(2)将CP基因导入土壤农杆菌质粒的 ,其原因是 。
(3)含重组质粒的土壤农杆菌与烟草叶共培养前,对烟草叶的处理要求是 。
(4)共培养形成愈伤组织时的培养条件是必须 (有光或避光)。
(5)在配置诱导芽、根的培养基时,要注意在不同的培养阶段需调整 的比例。最终检测转基因是否成功,可用 方法进行检测。
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烟草花叶病毒(TMV)是一种在烟草及蔬菜等经济作物中广泛传播的病毒,对农业生产造成很大的危害。研究者利用植物基因工程的方法将烟草花叶病毒外壳蛋白基因(CP基因)导入烟草并在转化的烟草植株中表达,使其获得对烟草花叶病毒的抗性。下图是转化烟草植株的培育流程,请回答:
(1)含有CP基因的cDNA文库是通过将TMV的RNA进行 获得的。在对cDNA进行PCR扩增时,设计的引物自身不能含有 序列。
(2)将CP基因导入土壤农杆菌质粒的 ,其原因是__________________________
_________________________________________________________________ 。
(3)含重组质粒的土壤农杆菌与烟草叶共培养过程中,对烟草叶的处理要求是 ________________________________________。
(4)用含重组质粒的土壤农杆菌感染烟草叶成功后,共培养形成愈伤组织时的培养条件是必须 。
(5)在诱导芽、根的培养基中需添加 才能进行筛选,并要注意在不同的培养阶段需调整 的比例。
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乙肝病毒表面有T1蛋白和T2蛋白,免疫接种实验表明这两种蛋白质都可引起实验动物的免疫反应。科研人员用农杆菌转化法培育出转基因番茄,用于生产可口服的乙肝病毒疫苗,为预防乙肝开辟了一条新途径。回答下列问题:
(1)T1蛋白和T2蛋白进入实验动物的肠道后,会被实验动物小肠黏膜上的一种M细胞当做_________处理,进而引发一系列的免疫反应,最终产生相应的___________,使实验动物获得了对乙肝病毒的免疫能力。
(2)构建基因表达载体是基因工程的核心,其目的是___________;构建表达载体时,需要选择果实特异性启动子,其目的是_________________________________。
(3)用转基因番茄生产可口服的乙肝病毒疫苗(含T1蛋白),若要检测目的基因是否翻译出T1蛋白,可用的检测物质是___________(填“乃蛋白的基因”或“T1蛋白的抗体”),该检测方法称为_________。
(4)获得转基因番茄植株后,已确定该植株所结番茄中含有T2蛋白,此后还要对T2蛋白的功能进行个体水平的鉴定,方法是_______________________________________________________。
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某植物细胞中含有抗烟草花叶病毒(TMV)基因,可以合成一种抗TMV蛋白,使叶片对TMV具有抗感染性。烟草是重要的经济作物,由于TMV的感染会导致大幅度减产。研究人员利用转基因技术培育出了抗TMV的烟草,主要流程如下图所示。
(1)对受体细胞来说目的基因也可以叫__________________。
(2)①过程涉及有__________________酶。
(3)②过程的操作环境是__________________。
(4)将重组Ti质粒导入上述受体细胞时__________________(要/不要)使用钙离子处理以增加细胞壁的通透性。
(5)上述卡那霉素的作用是_________________。上述培养基叫_________________培养基(按功能划分)。
(6)基因工程除了在农业上可以获得抗逆性的农作物外,在环境保护方面也展现出诱人的前景,请列举出一个例子_______________。
(7)图中④过程主要采用_______________方法。
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某植物细胞中含有抗烟草花叶病毒(TMV)基因,可以合成一种抗TMV蛋白,使叶片对TMV具有抗感染性。烟草是重要的经济作物,由于TMV的感染会导致大幅度减产。研究人员利用转基因技术培育出了抗TMV的烟草,主要流程如下图所示:
(1)对受体细胞来说,目的基因也可以叫__________________。
(2)①过程涉及有__________________酶。
(3)②过程的操作环境是__________________。
(4)将重组Ti质粒导入上述受体细胞时____________(要/不要)使用钙离子处理以增加细胞壁的通透性。
(5)上述卡那霉素的作用是_________________。上述培养基叫_________________培养基(按功能划分)。
(6)若两种限制酶的识别序列及切割位点如下:
则理论上酶Ⅱ可作用的范围是酶Ⅰ的_______________倍。
(7)基因工程除了在农业上可以获得抗逆性的农作物外,在环境保护方面也展现出诱人的前景,请列举出一个例子_______________。
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某植物细胞中含有抗烟草花叶病毒(TMV)基因,可以合成一种抗TMV蛋白,使叶片对TMV具有抗感染性。烟草是重要的经济作物,由于TMV的感染会导致大幅度减产。研究人员利用转基因技术培育出了抗TMV的烟草,主要流程如下图所示。
(1)对受体细胞来说目的基因也可以叫__________________。
(2)①过程涉及有__________________酶。
(3)②过程的操作环境是__________________。
(4)将重组Ti质粒导入上述受体细胞时__________________(要/不要)使用钙离子处理以增加细胞壁的通透性。
(5)上述卡那霉素的作用是___________。上述培养基叫______________培养基(按功能划分)。
(6)若两种限制酶的识别序列及切割位点如下:
则理论上 酶Ⅱ可作用的范围是酶Ⅰ的_______________倍。
(7)基因工程除了在农业上可以获得抗逆性的农作物外,在环境保护方面也展现出诱人的前景,请列举出一个例子_______________。
(8)图中④过程主要采用_______________方法。
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植物像人一样也会生病,引起植物生病的微生物称为病原微生物,主要有病毒、真菌和细菌等。烟草由于受到烟草花叶病毒的侵染而减产。我国科学家利用基因工程技术成功地培育出抗烟草花叶病毒的烟草。下图是转基因烟草培育过程示意图,据图分析回答下列问题:
(1)质粒是基因工程中常用的载体,质粒是一种裸露的、结构简单、具有自我复制能力的很小的___________分子,至少有一个至多个___________位点。载体除质粒之外还可以用___________、___________等。
(2)基因表达载体导入烟草细胞常用的方法是___________。
(3)作为目的基因载体的质粒往往要带有一个抗生素抗性基因,该抗性基因的作用是____________________________________________。
(4)转基因工程改良动植物品种最突出的优点是___________________。
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生物·选修3:现代生物科技专题
科研人员将病毒外壳蛋白(CP)基因转移到甜椒体内,培育出的抗病毒甜椒具有很好的抗病毒效果。请回答下列有关抗病毒甜椒培育过程的问题:
(1)获取含氨苄青霉素抗性基因的质粒:先在含_________________的培养基上培养细菌,然后从菌体中分离出含氨苄青霉素抗性基因的质粒。
(2)获取CP基因:从感染病毒的植物体内获得_____,然后用反转录的方法获得___(填“基因组”或“cDNA”)文库。基因组文库与cDNA文库相比,两者最显著的区别是____。
(3)构建基因表达载体:经反转录获得的目的基因的两端是平末端,需要用________连接酶将其与含平末端的载体连接。
(4)导入受体细胞:甜椒为双子叶植物,科研人员常用__________法导入,然后将受感染的组织细胞培育成愈伤组织,再经___________培育成转基因甜椒。
(5)目的基因的裣测与鉴定:目的基因在真核细胞中能否稳定遗传的关键___________。
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绞股蓝细胞中含有抗烟草花叶病毒(TMV)基因,可以合成一种抗TMV蛋白,叶片对 TMV具有抗感染性。烟草是重要的经济作物,由于 TMV 的感染会导致大幅度减产。研究人员利用转基因技术培育出了抗TMV的烟草,主要流程如下图所示:
(1)科学家首先从绞股蓝细胞中提取抗TMV基因转录的RNA,然后合成目的基因。图中过程①表示 ,获得的DNA必须在两侧添加 和 。
(2)过程③构建的重组Ti 质粒时,必须使用 和 两种工具酶。
(3)由图分析,在过程③构建的重组Ti 质粒上应该含有卡那霉素抗性基因作为 ,重组Ti 质粒导入烟草体细胞的方法是 。
(4)在过程⑤培养基中除含有卡那霉素及植物必需的各种营养成分外,还必须添加 ,以保证受体细胞能培养成再生植株。
(5)过程⑥可采取 的方法,检测植株是否合成了抗TMV蛋白。在个体水平的鉴定过程中,可通过 的方法来确定植株是否具有抗性。
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