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生物·选修3：现代生物科技专题
科研人员将病毒外壳蛋白(CP)基因转移到甜椒体内，培育出的抗病毒甜椒具有很好的抗病毒效果。请回答下列有关抗病毒甜椒培育过程的问题：
(1)获取含氨苄青霉素抗性基因的质粒：先在含_________________的培养基上培养细菌，然后从菌体中分离出含氨苄青霉素抗性基因的质粒。
(2)获取CP基因：从感染病毒的植物体内获得_____，然后用反转录的方法获得___（填“基因组”或“cDNA”）文库。基因组文库与cDNA文库相比，两者最显著的区别是____。
(3)构建基因表达载体：经反转录获得的目的基因的两端是平末端，需要用________连接酶将其与含平末端的载体连接。
(4)导入受体细胞：甜椒为双子叶植物，科研人员常用__________法导入，然后将受感染的组织细胞培育成愈伤组织，再经___________培育成转基因甜椒。
(5)目的基因的裣测与鉴定：目的基因在真核细胞中能否稳定遗传的关键___________。
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【生物选修3-现代生物科技专题】狂犬病的病原体为RNA病毒，其表面的G蛋白可作为主要抗原用于制备狂犬疫苗，研究人员利用生物工程技术培育出转G基因番茄，实现G蛋白的大量生产。其基本技术流程如下图。请回答：
（1）图中过程①称为______；用PCR扩增方法获取G基因，则需要用到______酶，该方法能够成功获取G基因的前提是_____________________，以便合成引物。过程②采用最多的方法是______。
（2）图中N称为______；过程③称为______。
（3）食用G基因已有效表达的转基因番茄果实______（能/不能）预防狂犬病。原因是_____________。
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[生物--选修3：现代生物科技专题]
番木瓜有较高的营养价值和医用价值，但极易感染番木瓜环斑病毒（PRV）。科研人员通过现代生物技术大量培育抗病毒番木瓜并获得其中的有效成分，请根据所学知识回答下列问题：
（1）PRV是一种RNA病毒，科研人员提取该病毒的核酸，经反转录得到PRV CP基因（目的基因），利用目的基因构建______________，其中的终止子能使______________过程在所需要的地方停下来。将目的基因导入番木瓜细胞时，常用______________法，该方法需将目的基因插入到___________的T-DNA上，目的基因在番木瓜细胞中表达后，使受体细胞能有效抵抗PRV的侵染。
（2）要获得抗PRV番木瓜植株，需在___________的人工控制条件下，将受体细胞培养在人工配置的培养基上，给予适宜条件，诱导其产生______________、丛芽，最终形成完整的植株。
（3）为了检测目的基因是否表达，需从转基因番木瓜中提取蛋白质，用相应的抗体进行检测，该方法称为
_____________法。
（4）上述生物技术包括转基因技术和植物细胞工程中的______________技术。
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【生物一一选修3:现代生物科技专题】基因疫苗是指编码外源性抗原的基因导入人和动物体内，让其在宿主细胞中表达抗原蛋白，诱导机体产生免疫应答。某科研所计划利用基因疫苗，通过基因工程和胚胎工程技术培育具有口蹄疫免疫特性的高产奶牛。请回答下列问题：
(1)基因表达软体的构建是基因工程的核心，一个完整的基因表达载体至少包括目的基因、_______、标记基因等。
(2)动物基因工程常用的受体细胞是___________，因为该细胞的全能性高，一般用______法将目的基因导入受体细胞。
(3)欲检测高产奶牛体内是否出现口蹄疫病毒的抗原蛋白，在分子水平上检的方法及结果是从转基因牛中提取________，用_______杂交，如果出现杂交带，表明奶牛中出现了抗原蛋白，如果不出现杂交带，表明奶牛中未出现抗原蛋白。
(4)胚胎工程最后一道工序处胚胎移植，其实效是___________ 。
(5)为提高胚胎的利用率，可以采用胚胎分割技术，应该选用什么样的胚胎进行分割___________？
(6)现已经通过基因工程和胚胎工程技术培育出一头具有口蹄疫免疫特性的高产奶牛，可以采用___________技术获得更多具有口蹄疫免疫特性的高产奶牛。
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【生物一选修3现代生物科技专题】
艾滋病病毒（HIV)外壳的包膜上有多种蛋白质，其中包膜糖蛋白（env)基因编码gpl60蛋白，进一步加工成gpl20蛋白，具有较强的抗原性。制备抗HIV gpl20的单克隆抗体，为艾滋病的治疗带来希望。请回答下列问题：
(1)若利用动物细胞工程制备抗HIV gpl20的单克隆抗体，涉及到的技术手段主要有______________。
(2)细胞融合常用的生物诱导剂是_________。融合后需要用特定的选择性培养基筛选，只有融合的_____才能生长，这种细胞的特点是__________。
(3)若要大量制备该单克隆抗体，可将筛选出来的细胞进行体外培养，在培养液中通入一定浓度的C02，主要作用是_________________。
(4)科研人员设想用基因工程制备能表达抗HIV gpl20抗体的重组细胞，获得目的基因可利用PCR技术扩增，需要在反应体系中添加的有机物有__________、Taq酶和4种脱氧核苷酸。利用_______法将目的基因导入骨髓瘤细胞。基因工程的核心是__________________。
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【选修3：现代生物科技专题】
草莓是我国的优质水果，营养价值很高，被誉为“水果皇后”，但却容易受到病毒的感染。科学家常采用两种方法培育新品种：其一，培育无病毒组培苗；其二，将草莓轻型黄边病毒的外壳蛋白基因（SMYELV-CP）导入草莓基因组中培育出转基因抗病毒草莓。请分析回答下列问题：
（1）若培育无病毒组培苗，通常采取植株_______________进行组织培养，转化后的草莓外植体需经过_______过程才能长成完整植株。从遗传学角度看，它能形成完整草莓植株的根本原因是____________。
（2）可利用PCR技术扩增目的基因SMYELV-CP，其前提是____________，以便根据这一序列合成引物。为保证目的基因的表达，重组载体上应含有特定的____________（复制原点、启动子、标记基因），它能被受体细胞的____________所识别，以便于催化转录过程。
（3）获得转基因草莓后，通过分子检测，此后还需要进行个体生物学水平鉴定MYELV—CP是否发挥作用，方法是______________。
（4）我国西北一些地区曾大量种植草莓，后却被硬性规定种植属于乔木的杨树，但由于降雨量少，致使许多地方的杨树长成半死不活状，结果防护林成为残败的“灰色长城”，其失败的原因主要是违背了_________原理。
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【生物——选修3：现代生物科技专题】
为培育出含β-胡萝卜素的“黄金大米”，科研人员提出以下两套培育方案。请分析回答下列问题：
（1）甲方案中，β-胡萝卜素基因能在玉米和水稻体内出现相同表达结果的原因是_________。构建重组质粒时，常用Ti质粒作为载体，是因为Ti质粒上具有___________，它能把目的基因整合到水稻体细胞的________上。
（2）乙方案中，在体细胞杂交前需要用纤维素酶和果胶酶除去细胞壁获得原生质体，诱导其融合的化学试剂常用______________。通过⑤获得“黄金大米”幼苗需要经过_______________两个过程，在培养过程中，除了在培养基中添加营养物质外还需要添加_______________。
（3）与传统育种方法相比，甲、乙两套方案共同的优点是_________________________。
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[生物——选修3:现代生物科技专题]
2016年9月研究人员发现，从锥形蜗牛体内提取出的毒液有望帮助人类开发出超级速效的胰岛素。回答下列问题：
（1）科研人员尝试利用基因工程制造锥形蜗牛毒蛋白。在基因工程中，质粒载体作为某因工程的工具，应具有的基本条件是_______________（答出两点即可）；而作为基因表达载体，除满足上述基本条件外，还须具有目的基因、启动子和终止子。基因工程中既可以“缝合”双链DNA片段互补的黏性末端，又可以“缝合”双链DNA片段的平末端的是_____________酶。
（2）为了获得目的基因可以通过提取分析锥形蜗牛毒蛋白中的___________序列推知毒蛋白基因的核苷酸序列，在用PCR技术大量扩增目的基因。在用PCR技术扩增DNA时，目的基因DNA受热变性后解链为单链，___________与单链相应互补序列结合，然后在DNA聚合酶作用下进行___________，如此循环多次。
（3）将人工合成的目的基因导入大肠杆菌体内，一般需要先用___________处理大肠杆菌使之成为感受态细胞。经过目的基因的检测和表达，获得的锥形蜗牛毒蛋白活性未能达到期待的“速效胰岛素”的生物活性，导致这种差异的原因可能是___________。
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【生物——选修3 现代生物科技专题】(15分)
（1）目的基因主要是指 的基因，也可以是一些具有 的因子。
（2） 是基因工程的核心，cDNA文库属于 基因文库，
（3）科研人员利用蛋白质工程合成速效胰岛素，该技术的实验流程为：
① 其中，流程A是 ，流程B是 。
② 与基因工程相比较，蛋白质工程的优点是： 。
③ 由图可知，要改造蛋白质结构，最终是通过改造基因来实现的。请说明原因：
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科研人员利用现代生物技术培育出双转基因奶牛新品种，以便通过乳腺生物反应器生产人乳铁蛋白肽（抗细菌）和人干扰素（抗病毒）。下图1为重组质粒，图2为培育流程。
（1）构建重组质粒时，若人干扰素基因的序列是已知的，则可以通过_________获得该基因，然后再利用_________技术进行扩增。
（2）据图可知，人干扰素基因与_________基因可同时转录。人乳铁蛋白肽基因能在转基因奶牛的乳腺细胞中表达，人干扰素基因则可在全身细胞表达，这与构建重组质粒时_________的选择不同有关。
（3）通常利用_________（方法）将重组质粒导入③，在导入前需用_________将②进行分散处理培养。
（4）④过程涉及到的现代生物技术有_________、胚胎体外培养等。
（5）在培育转基因奶牛⑦时，下列有关叙述正确的是_________
A. 需从表达人干扰素基因的人体细胞中获取目的基因
B. 获得的重组胚胎需要进行性别鉴定才能进行⑤过程
C. 奶牛⑥为一般品种，需进行同期发情处理并未经配种
D. 通常利用DNA分子杂交技术检测转基因奶牛培育是否成功
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