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[生物--选修3：现代生物科技专题]
番木瓜有较高的营养价值和医用价值，但极易感染番木瓜环斑病毒（PRV）。科研人员通过现代生物技术大量培育抗病毒番木瓜并获得其中的有效成分，请根据所学知识回答下列问题：
（1）PRV是一种RNA病毒，科研人员提取该病毒的核酸，经反转录得到PRV CP基因（目的基因），利用目的基因构建______________，其中的终止子能使______________过程在所需要的地方停下来。将目的基因导入番木瓜细胞时，常用______________法，该方法需将目的基因插入到___________的T-DNA上，目的基因在番木瓜细胞中表达后，使受体细胞能有效抵抗PRV的侵染。
（2）要获得抗PRV番木瓜植株，需在___________的人工控制条件下，将受体细胞培养在人工配置的培养基上，给予适宜条件，诱导其产生______________、丛芽，最终形成完整的植株。
（3）为了检测目的基因是否表达，需从转基因番木瓜中提取蛋白质，用相应的抗体进行检测，该方法称为
_____________法。
（4）上述生物技术包括转基因技术和植物细胞工程中的______________技术。
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生物·选修3：现代生物科技专题
科研人员将病毒外壳蛋白(CP)基因转移到甜椒体内，培育出的抗病毒甜椒具有很好的抗病毒效果。请回答下列有关抗病毒甜椒培育过程的问题：
(1)获取含氨苄青霉素抗性基因的质粒：先在含_________________的培养基上培养细菌，然后从菌体中分离出含氨苄青霉素抗性基因的质粒。
(2)获取CP基因：从感染病毒的植物体内获得_____，然后用反转录的方法获得___（填“基因组”或“cDNA”）文库。基因组文库与cDNA文库相比，两者最显著的区别是____。
(3)构建基因表达载体：经反转录获得的目的基因的两端是平末端，需要用________连接酶将其与含平末端的载体连接。
(4)导入受体细胞：甜椒为双子叶植物，科研人员常用__________法导入，然后将受感染的组织细胞培育成愈伤组织，再经___________培育成转基因甜椒。
(5)目的基因的裣测与鉴定：目的基因在真核细胞中能否稳定遗传的关键___________。
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【选修3：现代生物科技专题】
草莓是我国的优质水果，营养价值很高，被誉为“水果皇后”，但却容易受到病毒的感染。科学家常采用两种方法培育新品种：其一，培育无病毒组培苗；其二，将草莓轻型黄边病毒的外壳蛋白基因（SMYELV-CP）导入草莓基因组中培育出转基因抗病毒草莓。请分析回答下列问题：
（1）若培育无病毒组培苗，通常采取植株_______________进行组织培养，转化后的草莓外植体需经过_______过程才能长成完整植株。从遗传学角度看，它能形成完整草莓植株的根本原因是____________。
（2）可利用PCR技术扩增目的基因SMYELV-CP，其前提是____________，以便根据这一序列合成引物。为保证目的基因的表达，重组载体上应含有特定的____________（复制原点、启动子、标记基因），它能被受体细胞的____________所识别，以便于催化转录过程。
（3）获得转基因草莓后，通过分子检测，此后还需要进行个体生物学水平鉴定MYELV—CP是否发挥作用，方法是______________。
（4）我国西北一些地区曾大量种植草莓，后却被硬性规定种植属于乔木的杨树，但由于降雨量少，致使许多地方的杨树长成半死不活状，结果防护林成为残败的“灰色长城”，其失败的原因主要是违背了_________原理。
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[生物——选修3:现代生物科技专题]
草莓是一种营养价值和经济价值都较高的草本植物，育种工作者对草莓外植体离体再生和遗传转化的研究越来越多。回答下列问题：
（1）草莓是无性繁殖作物，感染的病毒容易传染给后代，导致产量低、品质差，可以采用_______技术来脱除病毒。影响草莓外植体再生的因素有植株的基因型、________、___________等。
（2）通过转基因技术可改变草莓的抗病虫能力、对环境胁迫的抗性、储藏性和果实品质等，相应的目的基因能否在草莓细胞中表达的关键是____________，若经过转基因技术处理后没有获得相应的基因产物，原因可能是________________。
（3）还可利用转基因技术培育出带有乙肝病毒表面抗原基因的草莓用于疫苗生产，一般采用__________方法检测转基因草莓果实提取液中是否含有相应的抗原。
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【生物——选修3：现代生物科技专题】菊天牛是菊花的主要害虫之一，为达到防治目的，科研人员通过转基因技术培育出了抗虫菊花。请回答下列问题：
（1）可用 处理土壤农杆菌，使其处于 以便吸收重组质粒。
（2）将重组质粒导入土壤农杆菌的目的是利用农杆菌能够 的特点，使目的基因进入受体细胞中，并插入到菊花细胞的 上，最终形成转基因植株。
（3）用PCR方法检测转基因菊花是否含有目的的基因时，需根据 的脱氧核苷酸序列设计特异引物，以 为模板进行第一轮扩增。
（4）将转基因菊花嫩茎及叶片与人工饲料以适当比例混合后饲喂菊天牛2龄幼虫，实验结果如下表所示：
组别
死亡率（%）
实验组
转基因植株1
60．00
转基因植株2
53．33
对照组
13．33
①对照组应饲喂等量的 菊花嫩茎及叶片与人工饲料混合物。
②据表分析，实验组与对照组 差异显著，说明转基因菊花对菊天牛2龄幼虫有较强的毒杀作用。
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【生物——选修3：现代生物科技专题】青蒿素为名贵药材，由青蒿生产。科研人员尝试从以下方面获得青蒿素：
(1)利用 __________技术，由青蒿外植体通过_________ (生理过程) 形成愈伤组织。经检测愈伤组织不含青蒿素，而丛芽含少量，造成这种差异的根本原因是_____________。
(2)下图1表示青蒿和酵母菌细胞内的物质代谢过程，DXP、FPP、青蒿二烯均为青蒿素前体产物，各种酶由相应基因指导合成。图二表示基因工程实验结果。
①据图1，如果要通过基因工程技术让酵母菌生产青蒿二烯，则目的基因是______基因，基因表达载体除目的基因外，还需要有______基因便于后期筛选。
②将DXR基因导入青蒿，让DXR基因在青蒿中过量表达，通过增加FPP量最终提高青蒿素产量。除了提高青蒿素前体产物的方法，要获得高产青蒿植株，据图1分析，思路还有：____________。图2中，导入空白运载体的实验数据能用来说明_____________。
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[生物——选修3：现代生物科技专题]
科研人员通过以下三种途径快速繁殖猪的优良品种，请依此回答下列问题：
（1）途径①中的供体细胞应为传代_______代以内的细胞，受体细胞应为_____________，该途径可说明______________。
（2）途径②是把从猪输卵管中采集的卵母细胞进行物理化学联合刺激，使其激活并发育成胚胎，获得孤雌生殖克隆猪（二倍体），这些克隆猪的性别_______（都相同、不都相同）。为了获得更多的卵母细胞，可对良种母猪用促性腺激素进行_________处理。若要使同一胚胎的后代具有相同的遗传物质，可采用 的方法。
（3）途径③采用了基因工程的方法，该方法的核心步骤是_____________，可采用_____________方法来检测转基因猪的DNA上是否插入目的基因。
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[生物——选修3:现代生物科技专题]
2016年9月研究人员发现，从锥形蜗牛体内提取出的毒液有望帮助人类开发出超级速效的胰岛素。回答下列问题：
（1）科研人员尝试利用基因工程制造锥形蜗牛毒蛋白。在基因工程中，质粒载体作为某因工程的工具，应具有的基本条件是_______________（答出两点即可）；而作为基因表达载体，除满足上述基本条件外，还须具有目的基因、启动子和终止子。基因工程中既可以“缝合”双链DNA片段互补的黏性末端，又可以“缝合”双链DNA片段的平末端的是_____________酶。
（2）为了获得目的基因可以通过提取分析锥形蜗牛毒蛋白中的___________序列推知毒蛋白基因的核苷酸序列，在用PCR技术大量扩增目的基因。在用PCR技术扩增DNA时，目的基因DNA受热变性后解链为单链，___________与单链相应互补序列结合，然后在DNA聚合酶作用下进行___________，如此循环多次。
（3）将人工合成的目的基因导入大肠杆菌体内，一般需要先用___________处理大肠杆菌使之成为感受态细胞。经过目的基因的检测和表达，获得的锥形蜗牛毒蛋白活性未能达到期待的“速效胰岛素”的生物活性，导致这种差异的原因可能是___________。
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【生物选修3：现代生物科技专题】科研人员利用现代生物技术获得转基因奶牛，并利用乳腺生物反应器获得血清白蛋白。
（1）基因工程的核心步骤是__________。血清白蛋白基因结构比较复杂，获取的方法包括从基因文库中获取和___________，若目的基因想在受体细胞中顺利表达，需要在基因上游加入特定的__________，同时在基因下游加入终止子。
（2）目的基因导入奶牛受精卵中使用的方法是________，然后利用受精卵进行胚胎的早期培养，形成________________，然后进行胚胎移植。
（3）为了获得足够数量的受精卵，可对供体母牛注射___________使其超数排卵，随后利用获能处理的精子进行体外受精，精子的获能方法有培养法和_________________。
（4）若检测转基因胚胎是否成功，需要对早期胚胎进行___________，然后用__________技术检测目的基因是否成功导入。
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【生物——选修3 现代生物科技专题】(15分)
（1）目的基因主要是指 的基因，也可以是一些具有 的因子。
（2） 是基因工程的核心，cDNA文库属于 基因文库，
（3）科研人员利用蛋白质工程合成速效胰岛素，该技术的实验流程为：
① 其中，流程A是 ，流程B是 。
② 与基因工程相比较，蛋白质工程的优点是： 。
③ 由图可知，要改造蛋白质结构，最终是通过改造基因来实现的。请说明原因：
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