聚羟基脂肪酸酯（PHA）是由嗜盐细菌合成的一种胞内聚酯，它具有类似于合成塑料的理化特性，且...

聚羟基脂肪酸酯（PHA）是由嗜盐细菌合成的一种胞内聚酯，它具有类似于合成塑料的理化特性，且废弃后易被生物降解，可用于制造无污染的“绿色塑料”。科学家从某咸水湖中寻找生产PHA菌种的流程图如下。下列说法正确的是（　　 ）

①取湖水→②接种在培养基上→③培养→④挑取单菌落，分别扩大培养→⑤检测菌的数目和PHA的产量→⑥获得目标菌株

A.步骤②可用稀释涂布平板法接种到含合成塑料的选择培养基上

B.扩大培养时，接种后需要将培养基放入恒温箱倒置培养，以防杂菌污染

C.④所用到的培养基应加入琼脂，以便挑取单菌落获得纯化菌株

D.挑取菌落时，应挑取多个菌落并分别测定嗜盐细菌的PHA含量

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聚羟基脂肪酸酯（ PHA）是一种结构多样化、生物可降解的高分子聚合物，广泛应用于生活、医药、农业等多个方面。许多野生型微生物可以天然产生不同种类的PHA。科学家应用基因工程等技术，对野生嗜盐细菌进行改造， 作为高效生产PHA 的底盘微生物。

（1）基因工程常用原核生物作为受体细胞，原因是________________________。

基因工程的核心步骤是________________。

（2）科学家对嗜盐菌进行基因改造，使一种嗜盐菌能够产生多种PHA，利用的原理是基因控制性状途径中的________________________________。

基因改造需要用到的基因工程的工具酶是________________________________。

（3）PHA 在细菌细胞内的积累量可能受到细菌细胞体积的限制。科学家发现，让细菌的细胞分裂抑制因子SulA 或MinCD基因“过表达”，可以使细菌细胞不能正常分裂而形成纤维状延长的细菌，以提高细胞 PHA 的积累量。实验的关键是对SulA 或MinCD基因中的______________（填入相关的基因结构）进行改造。

（4）PHA被看好用于开发人工食道、神经导管等医疗材料，研究中可用动物细胞法判断PHA对细胞的毒性。基本研究思路是：首先使被培养细胞处于_______的环境；将细胞所需的基本营养物质按种类和所需数量严格配置成培养基，此类培养基称为__________________，在此培养基中还要加入___________，此外，通常还需加入血清等天然成分；在适宜环境条件下培养一段时间，根据变异细胞占全部培养细胞的百分数，可以判断PHA的毒性。

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（2014•河南模拟）聚羟基丁酸酯可被用于制造生物可降解塑料．如图是科研人员用微生物发酵技术以蔗糖为原料生产生物可降解塑料的过程示意图，请据图回答：

（1）制备筛选碱性天然菌种的培养基的一般步骤是：计算、称量、溶化、灭菌、 倒平板 ．培养基中的蔗糖可以为微生物的生长提供 碳源 ．该培养基除含有微生物所需的各种营养物质外，还应注意调整适宜的 PH ．

（2）为了获得纯净的培养物，实验用的培养基最好选用 高压蒸汽灭菌 法进行灭菌．

（3）为了检测菌液中活菌的数量是否适宜，可以采用 显微镜直接计数（稀释涂布平板法） 法进行计数，该方法计数的结果与实际数目相比 偏大（偏小） （偏大/偏小）．

（4）为使微生物易于从发酵液中分离且达反复使用的目的，可采用 固定化细胞 技术进行处理．该技术通常采用的方法是 包埋法 ．

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聚羟基丁酸酯可被用于制造生物可降解塑料。下图是科研人员用微生物发酵技术以蔗糖为原料生产生物可降解塑料的过程示意图，请据图回答：

(1)制备筛选碱性天然菌种的培养基的一般步骤是：计算、称量、溶化、灭菌、_________。培养基中的蔗糖可以为微生物的生长提供_________。该培养基除含有微生物所需的各种营养物质外，还应注意调整_________。

(2)为了获得纯净的培养物，实验用的培养基最好选用_________法进行灭菌。

(3)为了检测菌液中活菌的数量是否适宜，可以采用_________法进行计数，该方法计数的结果与实际数目相比_________（偏大／偏小）。

(4)为使微生物易于从发酵液中分离且达到反复使用的目的，可采用___________技术进行处理该技术通常采用的方法是__________。

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聚羟基烷酸酯（PHA）是微生物细胞内的―种可完全降解的生物塑料新型材料，可用剧烈搅拌法萃取分离，其流程为：冷冻干燥菌体与适量氯仿混合→用组织捣碎机搅拌并加入活性炭→50℃磁力搅拌并过滤→滤液浓缩→向浓缩液中加入冷乙醇作沉淀处理→干燥得到白色透明度高的PHA。请回答：

（1）萃取时对处理的生物材料的要求是__________，组织捣碎机搅拌的目的是__________。

（2）活性炭具有很强的吸附能力，在提取过程中，使用活性炭的目的是__________。

（3）在滤液浓缩之前要进行过滤，其目的是__________。

（4）氯仿是一种易挥发的有机溶剂，在光下与空气中的氧作用会分解产生剧毒的光气。利用氯仿萃取PHA的过程简单，对设备的要求不高，但在生产上，并不是一种值得提倡的工艺，原因是_______________。

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【生物——选修3：现代生物科技专题】CpTI蛋白是由豇豆的胰蛋白酶抑制基因（CpTI基因）控制合成的，该蛋白主要存在于细胞质基质中，具有广谱的抗虫特性。但细胞质基质中存在大量蛋白酶，使CpTI蛋白降解造成毒性减弱，因而转CpTI基因抗虫水稻抗虫能力不十分理想。2008年4月3日《参考消息》报道，中科院遗传与发育生物学研究所朱桢等已培育出一种转SCK基因抗虫水稻品种，与转CpTI基因抗虫水稻相比，对害虫的致死率大大提高。SCK基因是由他们对CpTI基因进行修饰而成，SCK基因指导合成的CpTI蛋白被固定在内质网中，因此转SCK基因水稻对害虫的致死率大大提高了。

（1）SCK基因水稻细胞中CpTI蛋白含量高的原因是_______________。

（2）基因工程是在____________水平上进行设计和施工。

（3）质粒DNA分子上有特殊的标记基因，如________等。标记基因的作用是_____________。

（4）为了检测转基因水稻中SCK基因是否插入到水稻染色体的DNA上，需要采用___________技术，从转基因水稻中提取出DNA，用　　　 　　 ___　 作探针进行检测；为了鉴定SCK基因导入水稻细胞后，是否赋予了水稻抗虫特性，在个体生物学水平上需要做抗虫的接种实验，以确定________________________。

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拟从餐厨垃圾中分离具有高效降解能力的微生物制成菌剂，用于餐厨垃圾高效无害化处理。配制用于培养菌种的培养基（如下表），为比较这些菌种的降解效果，分别配制含有餐厨垃圾主要成分（淀粉、蛋白质、脂肪和纤维素）的培养基，检测效果如图。相关说法不正确的是（　　 ）

培养菌种用培养基

A.根据配方可知，该培养基属于固体培养基

B.在涂布过程中需要用到涂布器和酒精灯

C.透明圈表示菌种可降解培养基中含有的餐厨垃圾成分

D.D0/D的值越大，说明菌种的降解效果越好

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塑料的主要成分是PET，化学式:COC6H4COOCH2CH2O，PET极端稳定，日常中极难降解，这也是废弃塑料的污染是人类的一大环境难题的原因。科学家最近刚刚筛选获得了一种细菌Ideonella sakaiensis,据说这一新的细菌能有效降解PET。请回答下列问题：

（1）研究人员欲验证Ideonella sakaiensis菌株是否能降解PET，需要配制_________的培养基用于培养该细菌；若该细菌可以___________，说明Ideonella sakaiensis能够降解PET；若Ideonella sakaiensis全部死亡，则说明不能降解PET。

（2）欲分离并计数获得分解PET的纯化的Ideonella sakaiensis菌株，可用_____________(填接种方法），所用的接种工具为______。

（3）这种细菌在试管液体培养基中培养时其菌体分布如图，由图并结合前面的材料可判断该细菌的新陈代谢类型应该是_____________，所以用液体培养基培养这一种细菌时需要_______________。

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塑料的主要成分是PET，化学式:COC6H4COOCH2CH2O，PET极端稳定，日常中极难降解，这也是废弃塑料的污染是人类的一大环境难题的原因。科学家最近刚刚筛选获得了一种细菌Ideonella sakaiensis,据说这一新的细菌能有效降解PET。请回答下列问题：

（1）研究人员欲验证Ideonella sakaiensis菌株是否能降解PET，需要配制_________的培养基用于培养该细菌；若该细菌可以___________，说明Ideonella sakaiensis能够降解PET；若Ideonella sakaiensis全部死亡，则说明不能降解PET。

（2）欲分离并计数获得分解PET的纯化的Ideonella sakaiensis菌株，可用_____________(填接种方法），所用的接种工具为______。

（3）这种细菌在试管液体培养基中培养时其菌体分布如图，由图并结合前面的材料可判断该细菌的新陈代谢类型应该是_____________，所以用液体培养基培养这一种细菌时需要_______________。

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塑料的主要成分是PET，化学式:COC6H4COOCH2CH2O，PET极端稳定，日常中极难降解，这也是废弃塑料的污染是人类的一大环境难题的原因。科学家最近刚刚筛选获得了一种细菌Ideonella sakaiensis,据说这一新的细菌能有效降解PET。请回答下列问题：

（1）研究人员欲验证Ideonella sakaiensis菌株是否能降解PET，需要配制_________的培养基用于培养该细菌；若该细菌可以___________，说明Ideonella sakaiensis能够降解PET；若Ideonella sakaiensis全部死亡，则说明不能降解PET。

（2）欲分离并计数获得分解PET的纯化的Ideonella sakaiensis菌株，可用_____________(填接种方法），所用的接种工具为______。

（3）这种细菌在试管液体培养基中培养时其菌体分布如图，由图并结合前面的材料可判断该细菌的新陈代谢类型应该是_____________，所以用液体培养基培养这一种细菌时需要_______________。

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