对硝基苯酚（pNitrophenol，PNP）属于硝基苯酚类化合物（水溶液为黄色），主要来...

对硝基苯酚（pNitrophenol，PNP）属于硝基苯酚类化合物（水溶液为黄色），主要来源于农药、医药、染料、塑料等生产企业的排放，对植物、微生物、动物均有毒性。某研学小组从活性污泥中分离到一株PNP降解菌，对其形态、生理生化及降解特性进行研究。回答下列问题：

（1）取采自污水处理厂的活性污泥转接至富集培养液中，培养液配方如下表：

该培养液________（填“是”或“不是”）以PNP为唯一碳源，富集过程中连续转接至新鲜的富集培养液中5次，该步骤的目的是______________________________。

（2）将富集液进行梯度稀释，取适量稀释菌液在LB固体培养基上利用稀释涂布平板法进行分离，需要用到下图中的实验器材有________。在培养过程中，需放置________培养基一起培养，来检验培养基是否受到污染。

（3）挑取LB培养基上的单菌落转接到300 mg/L PNP的固体培养基上，按功能划分，该培养基属于________培养基；以菌落周围产生________作为筛选标记，最终得到一株降解能力较强的降解菌，命名为P62。

（4）下图是探究环境因素影响P62降解效果的实验数据。据图1分析，当温度在30 ℃左右时，P62的降解效果较好，推测可能的原因是________。据图2分析，在250 mL锥形瓶中的装液量为180 mL时，会明显抑制降解效果，推测________对降解效果影响较大。

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对硝基苯酚(PNP)颜色为黄色，若被分解则颜色消失，属于硝基苯酚类有机化合物的一种，主要来源于农药、医药、染料、塑料等生产企业排放，并广泛分布于环境中，对植物、微生物和动物均有毒性。某生物兴趣小组提出从污水厂曝气池长期驯化的污泥中分离出对硝基苯酚降解菌并研究其降解特性。回答下列问题：

(1)分离对硝基苯酚降解菌的选择培养基成分有：NH4NO3、KH2PO4、K2HPO4、NaCl、FeSO4、MgSO4·7H2O、PNP和琼脂；试从成分分析该选择培养基能起到筛选作用的原因是________________________。

(2)利用________________(方法)分离纯化得到单一的对硝基苯酚降解菌菌落，可以将在菌落周围是否产生____________作为筛选标记。

(3)若分离纯化后得到了两个菌落，这两个菌落的形态、大小、光泽度、颜色等________(填“一定”或“不一定”)相同。

(4)研究不同的糖类对硝基苯酚降解菌对PNP降解率的影响，得到的结果如表所示：

从表中可得出的结论是____________________________。

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对硝基苯酚（PNP）（分子式为C6H5N03）颜色为黄色，若被分解则颜色消失，属于硝基苯酚类有机化合物的一种，主要来源于农药、医药、染料、塑料等生产企业排放，并广泛分布于环境 中，对植物、微生物和动物均有毒性。某生物兴趣小组提出从污水厂曝气池长期驯化的污泥中 分离出对硝基苯酚降解菌并研究其降解特性。回答下列问题：

（1）分离对硝基苯酚降解菌常用________________培养基进行筛选，此培养基成分应如何设置才能达到分离的目的？_________。

（2）制备培养基的过程包括：计算→称重→溶化→灭菌→________，常用________方 法对培养基进行灭菌。

（3）利用________（方法）分离纯化得到单一的对硝基苯酚降解菌菌落，可以将在菌落周围是否产生________作为筛选标记。

（4）分离纯化所得菌种如需长期保存可采用________的方法。

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硝基苯酚（PNP）是硝基苯酚类化合物中的一种，呈黄色，对动植物、微生物均有毒性。某研究小组欲从废弃物中分离筛选能高效降解硝基苯酚（PNP）的菌株。回答下列问题。

（1）各种微生物培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源、_________（答出两点即可）。要从废弃物中对硝基苯酚（PNP）降解菌进行分离，应在以适量的_________为唯一碳源的培养基中培养。

（2）把从废弃物中采集的样品进行接种、连续富集、转接等操作，最后通过_________（填方法）接种到配制好的迭择培养基中，以便对菌落进行分离和计数，可通过_______（填颜色）消失的情况判断菌株的降解能力，进而筛选出高效菌株。

（3）研究和应用微生物的前提是________________________。在实验室培养微生物时，对玻璃器皿和试管口等容易被污染的部位常用的灭菌方法分别是________________。

（4）微生物接种的方法很多，在平板划线操作时，每次划线之前都要灼烧接种环，原因是_____________________。

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硝基苯酚（PNP)呈黄色，是一种工业污染物，可被微生物降解为无色物质。目前最有前途的处理方法是用高效PNP降解菌处理含PNP的废水。请回答下列问题：

（1）欲获得PNP降解菌，所选用的固体培养基中应加入_______________做为唯一碳源，从功能上看该培养基属于______________培养基。

（2）将含PNP降解菌的培养液接种在此固体培养基止，常釆用的方法有_________________________，PNP降解菌的降解效率可通过___________________鉴别。

（3）实验操作中获得纯净培养物的关键是______________；实验室中常用到的灭菌方法有__________(至少答出两项）。

（4）若某同学培养的菌落数明显低于班级平均值,原因可能是_____________________________。

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硝基苯酚是工业污水中重要污染物，某同学欲从污水处理厂污泥中分离分解硝基苯酚的细菌。请回答下列有关问题：

（1）为了筛选污泥中可分解硝基苯酚的细菌，在配置培养基时应选择________(硝基苯酚，硝基苯酚+牛肉膏，硝基苯酚十葡萄糖）作为碳源，不采用其他两组的原因是_______________。

（2）纯化菌株时，通常使用的划线工具是_____________。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落，第二划线区域的第一条线上无菌落，其它划线上有菌落。分析造成第一条线无菌落的可能原因有___________；_____________。

（3）进行梯度稀释时的一般操作是将1mL菌液移入盛有_______mL的无菌水中；常用______法进行活菌计数，其原理是_________，但统计的菌落数往往___________（填“多于”或“少于”)稀释液中的活菌数，原因是__________________。

（4）实验数据显示，当培养基中加入碳源葡萄糖时，该细菌降解速率明显提高，原因可能是_______。

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[选修1:生物技术实践]

硝基苯酚是工业污水中重要污染物，某同学欲从污水处理厂污泥中分离分解硝基苯酚的细菌。请回答下列有关问题：

（1）为了筛选污泥中可分解硝基苯酚的细菌，在配置培养基时应选择_______(硝基苯酚，硝基苯酚+牛肉膏，硝基苯酚十葡萄糖）作为碳源，不采用其他两组的原因是________。

（2）纯化菌株时，通常使用的划线工具是__________________。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落，第二划线区域的第一条线上无菌落，其它划线上有菌落。分析造成第二划线区域的第一条线无菌落的可能原因是________________（答一点即可）。

（3）进行梯度稀释时的一般操作是将1mL菌液移入盛有____mL的无菌水中；常用_______法进行活菌计数，其原理是_____________________，但统计的菌落数往往___________（填“多于”或“少于”)稀释液中的活菌数，原因是__________________________。

（4）实验数据显示，当培养基中加入碳源葡萄糖时，该细菌降解速率明显提高，原因可能是__________________________________________。

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硝基苯酚是工业污水中重要污染物，某研究小组欲从污水处理厂污泥中分离分解硝基苯酚的细菌。请回答下列有关问题：

（1）为了筛选污泥中可分解硝基苯酚的细菌，在配置培养基时应选择___________作为唯一碳源。从功能上来看，该培养基属于是________培养基。配制培养基时除需提供碳源、氮源、水和无机盐外，培养基还需要满足微生物生长对特殊营养物质、___________的要求。

（2）该小组采用平板划线法分离分解硝基苯酚的细菌操作时应该注意的事项有：___________（填序号）。

①整个操作过程需要在酒精灯旁进行

②在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环

③在灼烧接种环之后，立刻进行划线

④在作第二次以及其后的划线操作时，总是从上一次划线的末端开始划线

⑤不要将最后一区的划线与第一区相连

⑥在划线操作结束时，不需要灼烧接种环

（3）若接种过程和培养过程均符合要求，结果却在培养基上观察到了不同形态的菌落（不考虑分解硝基苯酚的细菌存在多种变异类型），则产生这种现象的可能原因是：______________________；若培养基的配制、接种及培养等过程的操作均规范无误，则这些细菌所利用的碳源可能是___________，其代谢类型（同化作用）是___________。

（4）进行菌落数量统计时，要选取菌落数目稳定时的记录作为结果，这样可以防止___________。

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在细胞有氧呼吸过程中，2，4-二硝基苯酚(DNP)能抑制ATP合成过程，但对水的生成没有影响。下列叙述正确的是

A.DNP不会影响有氧呼吸的第一阶段

B.DNP主要在线粒体基质中发挥作用

C.DNP作用于肌细胞时，线粒体内膜上散失的热能将增加

D.DNP能抑制人体血液中葡萄糖进入红细胞，进而抑制细胞有氧呼吸过程

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细胞有氧呼吸产生的NADH，与氧结合形成水。2，4—二硝基苯酚（DNP）对该代谢过程没有影响，但能抑制ATP合成。DNP作用于不同类型细胞的结果如下表，从结果得出的推论错误的是

A. A　　 B. B　　 C. C　　 D. D

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