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根据以下植物基因工程的操作步骤，回答有关问题。
（1）利用PCR技术从cDNA文库中获取目的基因（基因序列未知），需根据相应蛋白质的氨基酸序列设计多种引物，原因是____________，基因表达载体中目的基因上游的____________是RNA聚合酶的识别位点。
（2）将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是____________。
（3）下图是利用CRISPR/Cas9基因编辑技术将目的基因导入植物受体细胞的示意图。图中质粒含CRISPR基因和Cas9基因，CRISPR基因转录的sgRNA可以特异性识别细胞核DNA分子中的特定序列，Cas9基因表达的Cas9酶能切割被sgRNA识别的DNA序列。重组片段中的目的基因，能通过DNA损伤修复和被切割的DNA序列连接。
sgRNA通过____________特异性识别细胞核DNA分子中的有关序列，sgRNA、Cas9酶和基因工程中的基本工具____________作用相似。不同基因工程中利用的CRISPR/Cas9质粒有差异，这些质粒中所含的CRISPR基因通常是____________（填“相同”或“不同”）的，所含的Cas9基因通常是____________（填“相同”或“不同”）的。
（4）利用CRISPR/Cas9基因编辑技术将目的基因导入受体细胞与“（2）”中使用的方法相比，优点是____________。
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获取目的基因是实施基因工程的第一步，获取的方式也多种多样。从基因文库中直接获取和利用PCR技术扩增就是两种常用的方式，回答下列问题：
（1）基因文库中cDNA文库与基因组文库相比，前者较小，原因是_________。
（2）PCR过程所依据的原理是_______________，扩增过程需要加入_______________酶。
（3）构建基因表达载体时，目的基因的首端必须含有________，它的作用是___________。
（4）将目的基因导入到植物细胞中有多种方法，请写出两种_________________________。
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获取目的基因是实施基因工程的第一步，获取的方式也多种多样。从基因文库中直接获取和利用PCR技术扩增就是两种常用的方式，回答下列问题：
（1）基因文库中cDNA文库与基因组文库相比，前者较小，原因是_________。
（2）PCR过程所依据的原理是_______________，扩增过程需要加入_______________酶。
（3）构建基因表达载体时，目的基因的首端必须含有________，它的作用是___________。
（4）将目的基因导入到植物细胞中有多种方法，请写出两种_________________________。
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下图表示基因工程中目的基因的获取示意图，不正确的是：
A.同种生物的基因组文库大于cDNA文库
B.③表示PCR技术，用来扩增目的基因
C.从基因文库中要得到所需目的基因，可根据目的基因的有关信息来获取
D.只要基因的核苷酸序列已知，就只能通过人工合成的方法获取
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获取目的基因的方法有多种，下列不属于目的基因获取方法的是
A．从基因组文库中获取 B．cDNA文库中获取
C．从含目的基因生物细胞中获取 D．利用PCR技术获取
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下列获取目的基因的方法中，需要模板的是
①从基因组文库中获取目的基因 ②利用PCR技术扩增目的基因 ③构建cDNA文库 ④通过DNA合成仪利用化学方法人工合成目的基因
A.②③ B.①② C.③④ D.②④
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基因工程技术又称为DNA重组技术，回答相关问题：
（1）在基因工程中，获取目的基因主要有两大途径，即______和从_______中分离。
（2）利用某植物的成熟叶片为材料，同时构建cDNA文库和基因组文库，两个文库相比，cDNA文库中含有的基因数目比基因组文库中的少，其原因是______。
（3）在基因表达载体中，启动子是______聚合酶识别并结合的部位。若采用原核生物作为基因表达载体的受体细胞，最常用的原核生物是______。
（4）将目的基因导入植物细胞时，采用最多的方法是 法。
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关于生物工程和技术的说法正确的是（ ）
A. 从某生物cDNA文库中获取的目的基因，不含基因中的启动子
B. PCR反应中温度的周期性改变是为了DNA聚合酶催化不同的反应
C. 抗虫基因成功地插入到植物细胞染色体上即说明能正常表达
D. 植物组织培养的过程中需要用到纤维素酶和果胶酶
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为培育含油量高的油菜，研究人员尝试利用基因工程等技术获得了转基因油菜品种。回答问题：
（1）研究人员依据基因的已知序列设计引物，采用PCR技术从陆地棉基因文库中获取酶D基因，从拟南芥基因中获取转运肽基因，所含限制酶（Cla I、Sac I、Xba I）的酶切位点如图甲所示。
若用______________和______________酶处理酶D基因和转运肽基因后，可得到A端与______________端（填图中字母）相连的重组基因。
（2）将上述重组基因进一步处理，插入图乙所示T质粒的T-DNA中，T-DNA上有______________限制酶切位点，构建______________并导入农杆菌中。将获得的农杆菌接种在含______________的固体平板上培养得到含重组基因的单菌落，再利用液体培养基震荡培养，可以得到用于转化的侵染液。
（3）剪取油菜的叶片放入侵染液中一段时间，此过程的目的是______________，进一步筛选后获得转基因油菜细胞，该细胞通过______________技术，可培育成转基因油菜植株，其主要原理是____________。
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请利用所学知识回答基因工程胚胎工程、细胞工程和生态工程的有关问题。
（1）目的基因的获取方法有：从基因文库中获的、______________、利用PCR技术扩增。扩增的过程是：DNA在______________℃下变性、引物与单链相应互补序列结合、子链延伸，如此重复循环多次。
基因工程核心步骤的名称是：__________________________________________。
（2）胡萝卜的组织培养的实验中要注意将外植体进行______________（消毒或灭菌）。愈伤组织形成后，要将生长良好的愈伤组织转接到______________（脱分化或分化）培养基上，一段时间后诱导出试管苗再移栽大田，培养成正常植株。
（3）对于小鼠兔和家畜可用______________处理使其排出更多的卵子，这种获得卵母细胞的方法叫______________。
（4）“三北”防护林在最初阶段单一种植了大片的樟子松，导致偶然滋生的松毛虫肆虐一时，原因是没有遵循生态工程的______________理。