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蛛丝蛋白纤维是目前已知的最坚韧的天然纤维之一，又被称为“生物钢”。为了提高羊毛纤维的拉伸强度，科学家将蜘蛛牵丝蛋白基因整合到羊胎儿成纤维细胞，并用此细胞作为核供体，结合核移植技术，成功获得了能合成蛛丝蛋白的转基因细毛羊。回答下列问题。
（1）检测蜘蛛牵丝蛋白基因是否成功导入到羊胎儿成纤维细胞，一般采用的方法是_______，可使用_______作为探针对目的基因检测。
（2）将转基因成功的羊胎儿成纤维细胞作为核供体细胞，在对其进行体外培养时，传代一般都控制在10代以内，原因是_______。
（3）用细毛羊卵母细胞作为核移植的受体，在核移植之前必须先对卵母细胞进行的操作有_______。
（4）为检测出生小羊是否成功表达牵丝蛋白基因，可采用的方法有_______（填序号）。
①DNA测序 ②染色体倍性分析 ③体细胞结构分析 ④抗原-抗体杂交 ⑤对羊毛纤维进行拉伸度测试
（5）为了提高已有重组胚胎的利用率，可采用_______技术，但此技术产生同卵多胚的数量是有限的，从后代数量的角度分析，采用羊胎儿成纤维细胞进行转基因体细胞克隆的优势在于_______。
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2011年，科学家将蜘蛛的相关基因导入山羊体内，创造出转基因山羊，使羊奶中含有一种独特的蛛丝蛋白。利用这种蛛丝蛋白制造的蛛丝纤维具有很高的强度和伸缩性。可制成防弹背心、降落伞绳等。下面是生产原理图，请回答问题：
（1）在①过程中用到的酶是____________________。
（2）将基因表达载体导入受体细胞常用的方法是_________________。如果导入的受体细胞为体细胞，则③过程需要的技术操作是________________，重组细胞才具有发育的全能性。
（3）④过程所用的胚胎工程技术是__________________，该过程所用培养液中通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和______________等。
（4）进行⑤过程需要的技术操作是______________，最佳时期是______________期。
（5）进行⑥过程时，需要对供、受体母羊进行选择，并_________________处理。
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2011年，科学家将蜘蛛的相关基因导入山羊体内，创造出转基因山羊，使羊奶中含有一种独特的蛛丝蛋白。利用这种蛛丝蛋白制造的蛛丝纤维具有很高的强度和伸缩性。可制成防弹背心、降落伞绳等。下面是生产原理图，请回答问题：
（1）在①过程中用到的酶是__________，在②过程中用到的酶是__________。
（2）将基因表达载体导入受体细胞常用的方法是__________。如果导入的受体细胞为体细胞，则③过程需要的技术操作是__________，重组细胞才具有发育的全能性。
（3）④过程所用的胚胎工程技术是__________，该过程所用培养液中通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和__________等。
（4）进行⑤过程需要的技术操作是__________，最佳时期是__________期。
（5）进行⑥过程时，需要对供、受体母羊进行选择，并__________处理。
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蛛丝蛋白因具有形成非凡力学特性丝纤维的能力而引人注目，科学家拟从蜘蛛体内提取蛛丝蛋白基因的mRNA，采用基因工程的方法培养能从乳汁中提取蛛丝蛋白的转基因山羊。回答下列问题。
（1）利用蛛丝蛋白基因的mRNA在____________的催化下可合成蛛丝蛋白基因。
（2）PCR的原理是____________。合成的蛛丝蛋白基因可在PCR扩增仪中用多聚酶链式反应（PCR技术）快速扩增，利用PCR技术扩增目的基因的前提是要有____________，以便据此合成引物，扩增过程要用到一种特殊的酶是________________________。
（3）科学家将蛛丝蛋白基因与____________等调控组件重组在一起，通过显微注射等方法导入山羊的受精卵中最终得到乳汁中含有蛛丝蛋白的转基因山羊，这种转基因山羊称为____________。
（4）胚胎干细胞介导法是培育转基因动物的主要途径之一，胚胎干细胞是由早期胚胎或____________中分离出来的一类细胞，在功能上具有____________。
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科学家将蜘蛛的蛛丝蛋白基因导入山羊体内，得到转基因“蜘蛛羊”，该羊的乳汁中含有蛛丝蛋白，高强度的蛛丝蛋白可用于许多重要的特种工业领域，生产流程见下图。请回答：
（1）将蛛丝蛋白基因和载体通过甲过程形成的X为__________，该过程通常用相同的限制酶进行切割，原因是____________________。
（2）为了获得蛛丝蛋白，图中的受体细胞应该选择__________羊（填性别）的ES细胞，这是因为ES细胞在功能上具有____________________。
（3）受体细胞在体外培养时，采用的培养基是__________（固体、液体）培养基，并在培养环境中的空气必须加5%CO2，目的是____________________。
（4）转基因山羊的性状出能产生蛛丝蛋白外，与提供ES细胞的个体不完全相同的原因有__________。（答出两点即可）
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【生物——选修3：现代生物科技专题】
I．蛛蛛的蛛丝蛋白有重要的应用，基因工程创造出了转基因“蜘蛛羊”，该羊的乳汁中含有蛛丝蛋白，回答有关问题：
（1）产生蛛丝蛋白的基因被称为 ，获取时需要用到的酶为 。
（2）最核心的步骤是构建含蛛丝蛋白基因的表达载体，除蛛丝蛋白基因外，表达载体还必需有启动子、 、 ；再将表达载体导入羊的 （用受精卵细胞或乳腺细胞或体细胞作答）细胞获得重组细胞。
II．研究人员已经弄清了青蒿细胞中青蒿素的合成途径（如图中实线方框内所示），并且发现酵母细胞也能够产生合成青蒿素的中间产物FPP（如图中虚线方框内所示）。结合所学知识回答下列问题：
（3）根据图示代谢过程，科学家在培育能产生青蒿素的转基因酵母细胞过程中，需要向酵母细胞中导入上图中的 基因。
（4）利用青蒿直接提取青蒿素，体现了生物多样性的 价值，还可以通过植物细胞工程技术，利用青蒿的叶肉细胞脱分化为具有分生能力的薄壁细胞进而形成 _，再从中提取青蒿素，实现青蒿素的工厂化生产。
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蜘蛛丝是自然界中机械性能最好的天然蛋白纤维，其强度高于制作防弹衣的凯夫拉纤维，有广泛的应用前景。但如何大量获取蜘蛛丝纤维的问题一直难以解决。2018年8月，中科院分子植物科学卓越创新中心利用基因工程技术成功的在家蚕丝腺和蚕茧中大量表达蜘蛛丝蛋白。回答下列问题：
（1）构建基因表达载体时（如图所示），需要在目的基因前后两端分别引入______________的酶切位点，该方法比用同一种酶进行酶切的优势是___________________________（答出一点即可）。
（2）利用PCR技术扩增蜘蛛丝基因前，需根据目的基因的核苷酸序列设计____种引物，进行PCR时需加热至90～95℃然后冷却至55～60℃，此操作的目的是__________________。
（3）为能从蚕丝中提取蛛丝蛋白，基因表达载体中目的基因的首段必须含有使其仅能在蚕的丝腺细胞中特异性表达的_______。当其与______识别和结合，才能驱动转录过程，最终翻译成功。
（4）在研究过程中，发现目的基因已经插入到蚕丝腺细胞染色体的DNA上，蚕丝中却未能提取到蜘蛛丝，请分析原因及检测方法_________________。
（5）研究人员发现若将蛛丝蛋白31号位的色氨酸替换为酪氨酸，蛛丝韧性可提高50%，此成果所用到的工程技术为_____________________________________________。
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科学工作者通过基因工程创造出了“蜘蛛羊”，该羊的乳汁中含有蛛丝蛋白，高强度的蛛丝蛋白可用于许多重要的特种工业领域。请回答：
（1）为保证实验成功，产生蛛丝蛋白的基因需要从 （基因组／c DNA）文库中获取，并与 等调控组件重组在一起，然后与载体相连构建成表达载体；再通过 方法，将表达载体导入羊的 ，获得重组细胞。
（2）将获得的重组细胞培养成早期胚胎后，移植到经过 处理的受体母羊子宫内。因为我们对细胞所需的营养条件还没有完全研究清楚，所以在早期胚胎的培养中，往往还需要添加 。若需要一次产生两头转基因“蜘蛛羊”可将早期胚胎进行____ 处理。
（3）若所得到的“蜘蛛羊”（已知表达载体已进入细胞）乳汁中没有检测到蛛丝蛋白，科学家为判断问题所在，应该采用 技术来检测。
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（10分）【生物——现代生物技术专题】
内蒙古白绒山羊的血管内皮生长因子基因（VEGF164），若在皮肤毛囊细胞中特异性表达，可促进毛囊发育和毛发生长，显著提高羊毛产量。科学家将该基因导人羊胎儿的成纤维细胞核，成功培育出转基因克隆山羊。技术流程如下图，其中EcoR I、SaII、SphI为限制酶。
请据图回答。
（1）在构建基因表达载体的过程中，应采用____（填限制酶名称）对质粒和含绿色荧光基因的DNA片段进行酶切，再经相应处理形成重组质粒。其中绿色荧光基因的作用是____。
（2）要使VEGF164在皮肤毛囊中表达，须将它与羊绒蛋白基因的____筹调控组件重组起来，构建基因表达载体。
（3）图中①将基因表达载体导入胎儿成纤维细胞核的方法是____。将导入成功的细胞核注入到去核的卵母细胞构成重组细胞，培养成早期胚胎，经图中②____技术可培育成转基因克隆山羊。
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蜘蛛丝(丝蛋白)被称为“生物钢”，有着超强的抗张强度，可制成防弹背心、降落伞等。蜘蛛丝还可被制成人造韧带和人造肌腱。科学家研究出集中生产蜘蛛丝的方法——培育转基因蜘蛛羊作为乳腺生物反应器。下列有关乳腺生物反应器的说法，错误的是
A. 将蜘蛛丝蛋白基因与乳腺蛋白基因的启动子等结合在一起构建成表达载体
B. 可通过显微注射技术将表达载体导入羊的受精卵中
C. 可用丝蛋白基因探针与该羊口腔上皮细胞mRNA杂交，检测目的基因是否发挥作用
D. 上述培育转基因蜘蛛羊的过程涉及到基因工程、动物细胞培养、胚胎移植等技术
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