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生长激素是重要医药产品。科研人员利用基因工程构建乳房生物反应器，利用基因工程构建乳房生物反应器，首先要将生长激素基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，通过乳汁大量生产生长激素。请回答下列问题：
（1）在构建基因表达载体过程中，使用两种酶切割含目的基因的DNA片段和载体的优点是：________
A．防止目的基因和载体的任意连接 B．保证目的基因和载体的定向连接
C．防止目的基因自身连接 D．形成不同的黏性末端
（2）若选择胚胎干细胞作为受体细胞，采用核移植技术获得生物反应器比较容易，原因是胚胎干细胞分化程度______________，恢复其全能性相对容易。
（3）若选择胚胎干细胞作为受体细胞，通常用__________法将基因表达载体导入。从囊胚的__________中分离，可获取胚胎干细胞。
（4）若将幼体的组织离体进行细胞培养，经原代培养后分瓶继续培养，只有少数细胞存活下来，其遗传物质__________（发生/未发生）改变。
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（题文）（生物一选修3现代生物科技专题）
胰岛素是治疗人类糖尿病的重要药物。科研人员利用基因工程构建生物反应器，大量生产胰岛素。请回答下列问题。
（1）利用基因工程构建生物反应器，首先要获得胰岛素基因，在体外大量扩增胰岛素基因的方法是__________，前提是_________________________________。
（2）在构建基因表达载体过程中，先用双酶切割含目的基因的DNA片段和载体，优点是______________，然后用___________酶对目的基因和载体进行连接。
（3）构建生物反应器时一般选择受精卵作为受体细胞，原因是______________________。
（4）将基因表达载体导入受精卵的方法是___________，待受精卵发育至___________阶段进行移植，为获得基因型相同的后代，可采取______________________技术。
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胰岛素是治疗人类糖尿病的重要药物。科研人员利用基因工程构建生物反应器，大量生产胰岛素。请回答下列问题：
（1）利用基因工程构建生物反应器，首先要获得胰岛素基因，在体外大量扩增胰岛素基因的方法是______，若胰岛素基因含有a个碱基对，其中腺嘌呤占n/m，则体外扩增循环n次，消耗游离的胞嘧啶脱氧核苷酸_______个。
（2）在构建基因表达载体过程中，先用双酶切割含目的基因的DNA片段和载体，优点是______________。
（3）若选择胚胎干细胞作为受体细胞，采用核移植技术获得生物反应器比较容易，原因是____________。
（4）通常用显微注射法将基因表达载体导入胚胎干细胞，待胚胎干细胞发育至_________阶段时，将胚胎移入受体子宫内进行发育，为获得多个基因型完全相同的后代，可采取___________技术。
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科研人员利用现代生物技术培育出双转基因奶牛新品种，以便通过乳腺生物反应器生产人乳铁蛋白肽（抗细菌）和人干扰素（抗病毒）。下图1为重组质粒，图2为培育流程。
（1）构建重组质粒时，若人干扰素基因的序列是已知的，则可以通过_________获得该基因，然后再利用_________技术进行扩增。
（2）据图可知，人干扰素基因与_________基因可同时转录。人乳铁蛋白肽基因能在转基因奶牛的乳腺细胞中表达，人干扰素基因则可在全身细胞表达，这与构建重组质粒时_________的选择不同有关。
（3）通常利用_________（方法）将重组质粒导入③，在导入前需用_________将②进行分散处理培养。
（4）④过程涉及到的现代生物技术有_________、胚胎体外培养等。
（5）在培育转基因奶牛⑦时，下列有关叙述正确的是_________
A. 需从表达人干扰素基因的人体细胞中获取目的基因
B. 获得的重组胚胎需要进行性别鉴定才能进行⑤过程
C. 奶牛⑥为一般品种，需进行同期发情处理并未经配种
D. 通常利用DNA分子杂交技术检测转基因奶牛培育是否成功
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【生物——现代生物科技专题】
血清白蛋白是一种重要的医药产品，利用转基因牛乳腺生物反应器可生产人血清白蛋白，基本流程图如下，请据图回答以下问题：
(1)过程①称为_______。过程②表示目的基因的获取，该过程用到的工具酶是____________。
(2)过程③将基因导入上皮细胞常用的方法是_________。基因导入前须先构建__________________。
(3)过程④中去核卵母细胞需培养至_______期。过程⑤中，培养液中通常加入_____等天然成分。
(4)过程⑥采用的是______技术。为获取更多转基因牛，可对早期胚胎进行____________________。
(5)过程⑦从囊胚的_______可分离出ES细胞。培养ES细胞时，培养液中加入_______，可以分化为不同类型的细胞，体现了ES细胞的_______________________________。
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近年来，生物工程运用分子生物学的最新成就，发展出一系列的技术，可以为人类健康、生产、生活等服务。运用所学知识回答下列问题。
（1）科学家为了建立生产“干扰素”的乳房生物反应器，利用基因工程技术，构建含有启动子、______________、目的基因、复制原点和 _________等元件的基因表达载体，其中启动子的作用是__________________________________________，最后通过显微注射法，导入羊的_________中，最终发育成能生产干扰素的转基因羊。
（2）在单克隆抗体制备过程中，诱导______细胞与骨髓瘤细胞融合获得杂交瘤细胞，此过程需要两次筛选，笫二次筛选出_____________________________，单克隆抗体的优点有____________________________________________________________________。
（3）在胚胎工程中，通过对供体母羊注射_______________激素，促进其_______________，从而获得大量羊的卵母细胞；获取的卵母细胞需要培养至减数第二次分裂中期，才能与_________的精子结合。
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我国科研人员应用基因工程技术制备生物源鲜味八肽，下图为重组质粒构建过程及限制酶切割位点。请回答下列问题：
（1）已知鲜味八肽的氨基酸序列，科研人员利用序列设计软件，通过________法，最终得到DNA片段的序列为：
5＇-CCCAGATCTGGG……TAGGAATTCGAGCTC-3＇
3＇-GGGTCTAGACCC……ATCCTTAAGCTCGAG-5＇
用限制酶切割上述DMA片段后，获得含目的基因的DNA片段为__________________。
（2）使用上述两种限制酶较只使用一种限制酶的优点是_________________。构建该重组质粒过程中T4DNA连接酶________(能、否）用E.coliDNA连接酶替代，原因是_________________。
（3）目的基因PCR时，需先合成相应的引物。下列引物中热稳定性较高的是_____________。
引物P1:5＇-TAATACGACTCACTATAG-3＇
引物P2:5＇-AGCAAGAGACTCCTCATCACCCTT-3＇
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hNaDC3（人钠/二羧酸协同转运蛋白-3）主要分布于肾脏等重要器官，它具有促进人肾小管上皮细胞能量代谢和转运等功能。科研人员利用基因工程技术构建绿色荧光蛋白与hNaDC3融合基因，并在肾小管上皮细胞中表达，以动态观察hNaDC3在肾小管上皮细胞中的定位情况，为进一步研究hNaDC3的生理功能奠定基础。研究主要过程如图（实验中使用的限制酶SacⅠ的识别序列是GAGCT↓C，限制酶SacⅡ识别序列是CCGC↓GG）。请分析回答：
（1）与PCR相比，过程①需要的特有的酶是_______，应从人体__________（器官）的组织细胞中获得模板RNA。
（2）DNA分子被SacⅠ切割后，形成的黏性末端是______。过程②选用SacⅠ、SacⅡ分别切割hNaDC3基因和质粒载体，可实现目的基因定向插入并正常表达的原因是_________。
（3）过程③可获得多种重组DNA，可依据不同DNA分子的大小，运用________（技术）分离、筛选重组表达载体。过程④将重组表达载体导入猪肾小管上皮细胞最常用的方法是____________。
（4）显微观察导入“绿色荧光蛋白-hNaDC3融合基因”的猪肾小管上皮细胞后发现：转染后第1天绿色荧光混合分布于细胞质和细胞膜，核中未见绿色荧光；到第5天绿色荧光清晰聚集于细胞膜，细胞质和细胞核中未见绿色荧光。根据这一观察结果还不能得出“hNaDC3是在细胞质中生成后，在细胞膜上发挥作用”的结论，需要设置对照实验以排除绿色荧光蛋白本身的定位，对照实验的设计思路是___________。
（5）研究人员以较高浓度的葡萄糖溶液培养导入融合基因的猪肾小管上皮细胞，一段时间后发现，转染细胞的细胞膜上绿色荧光明显增强。这一实验结果可以说明______。
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长春花是原产于非洲东海岸的野生花卉，其所含的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。基因tms的编码产物能促进生长素的合成，科研人员利用基因tms构建重组Ti质粒，对愈伤组织进行遗传改造，解决了长春碱供不应求的问题，操作流程如下。请回答下列问题：
(1)过程①是指__________________，过程②多采用的方法是_________________。
(2)若从基因文库中获得基因tms，________(基因组文库／cDNA文库)中获取的基因含有启动子，启动子的功能是_____________________。作为运载体的Ti质粒应含有________________，用以筛选含目的基因的细胞。
(3)用PCR技术扩增目的基因，目的基因DNA受热变性后解链为单链，____________与单链相应互补序列结合，然后在___________的作用下延伸，如此重复循环。
(4)长春碱杀死癌细胞的同时对正常细胞也有毒性作用，为降低长春碱对正常细胞的毒性，可以利用______________制备技术制成“生物导弹”进行靶向治疗。
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长春花是原产于非洲东海岸的野生花卉，其所含的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。基因tms的编码产物能促进生长素的合成，科研人员利用基因tms构建重组Ti质粒，对愈伤组织进行遗传改造，解决了长春碱供不应求的问题。操作流程如下图所示，请回答下列问题：
（1）过程①的培养条件是________（至少答出三点），需要添加的植物激素有_______________。
（2）若基因tms是从cDNA文库中获取的，应用时还须添加启动子和终止子，启动子的功能是_____________。
（3）长春碱杀死癌细胞的同时对正常细胞也有毒性作用，为降低长春碱对正常细胞的毒性，可以利用制备_________技术制成“生物导弹”进行靶向治疗。
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