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（题文）（生物一选修3现代生物科技专题）
胰岛素是治疗人类糖尿病的重要药物。科研人员利用基因工程构建生物反应器，大量生产胰岛素。请回答下列问题。
（1）利用基因工程构建生物反应器，首先要获得胰岛素基因，在体外大量扩增胰岛素基因的方法是__________，前提是_________________________________。
（2）在构建基因表达载体过程中，先用双酶切割含目的基因的DNA片段和载体，优点是______________，然后用___________酶对目的基因和载体进行连接。
（3）构建生物反应器时一般选择受精卵作为受体细胞，原因是______________________。
（4）将基因表达载体导入受精卵的方法是___________，待受精卵发育至___________阶段进行移植，为获得基因型相同的后代，可采取______________________技术。
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胰岛素是治疗人类糖尿病的重要药物。科研人员利用基因工程构建生物反应器，大量生产胰岛素。请回答下列问题：
（1）利用基因工程构建生物反应器，首先要获得胰岛素基因，在体外大量扩增胰岛素基因的方法是______，若胰岛素基因含有a个碱基对，其中腺嘌呤占n/m，则体外扩增循环n次，消耗游离的胞嘧啶脱氧核苷酸_______个。
（2）在构建基因表达载体过程中，先用双酶切割含目的基因的DNA片段和载体，优点是______________。
（3）若选择胚胎干细胞作为受体细胞，采用核移植技术获得生物反应器比较容易，原因是____________。
（4）通常用显微注射法将基因表达载体导入胚胎干细胞，待胚胎干细胞发育至_________阶段时，将胚胎移入受体子宫内进行发育，为获得多个基因型完全相同的后代，可采取___________技术。
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生长激素是重要医药产品。科研人员利用基因工程构建乳房生物反应器，利用基因工程构建乳房生物反应器，首先要将生长激素基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，通过乳汁大量生产生长激素。请回答下列问题：
（1）在构建基因表达载体过程中，使用两种酶切割含目的基因的DNA片段和载体的优点是：________
A．防止目的基因和载体的任意连接 B．保证目的基因和载体的定向连接
C．防止目的基因自身连接 D．形成不同的黏性末端
（2）若选择胚胎干细胞作为受体细胞，采用核移植技术获得生物反应器比较容易，原因是胚胎干细胞分化程度______________，恢复其全能性相对容易。
（3）若选择胚胎干细胞作为受体细胞，通常用__________法将基因表达载体导入。从囊胚的__________中分离，可获取胚胎干细胞。
（4）若将幼体的组织离体进行细胞培养，经原代培养后分瓶继续培养，只有少数细胞存活下来，其遗传物质__________（发生/未发生）改变。
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胰岛素是治疗糖尿病的重要药物。目前，人类已经成功的利用大肠杆菌生产出重组人胰岛素。请回答下列问题：
（1）用基因工程生产人胰岛素时，可先提取人胰岛B细胞中的_________，通过逆转录获得胰岛素基因，再利用__________技术扩增目的基因。胰岛素基因能被准确扩增的原因是________________。
（2）大肠杆菌常用作基因工程的受体菌，主要原因是_________________。
（3）为使人胰岛素基因在大肠杆菌体内成功表达，需要构建基因表达载体，在基因的首端需要添加人胰岛素基因的______________，其作用是__________________。
（4）从大肠杆菌中得到的胰岛素需经体外加工才具有生物活性，原因是大肠杆菌_______。制备好的胰岛素通常要低温冷藏，过高的温度会使胰岛素的_____________被破坏，从而变性失活。
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胰岛素是治疗糖尿病的重要药物。人类已经成功的利用大肠杆菌生产出重组人胰岛素。请回答下列问题：
(1)用基因工程生产人胰岛素时，可先提取人胰岛B细胞中的mRNA作___________，然后在___________的作用下合成胰岛素基因。
(2)利用PCR技术扩增胰岛素基因前根据一段已知目的基因的核苷酸序列合成___________，扩增后的胰岛素基因不能直接导人大肠杆菌体内的原因是____________________________________________。
(3)利用大肠杆菌生产出重组人胰岛素的核心是______________________，基因工程中的转化是指_________________________________的过程。将重组胰岛素基因导入大肠杆菌内，最常用的转化方法是______________________。
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胰岛素是治疗糖尿病的重要药物。如图是利用大肠杆菌生产人胰岛素的部分过程示意图。请据图分析回答下列问题：
(1)过程②称为__________。若将某种生物发育的某个时期的mRNA经过程②产生的多种互补DNA片段与载体结合后储存在一个受体菌群中，这个受体菌群体称为这种生物的_______文库。
(2)________(填“能”或“不能”)用人体皮肤细胞来完成过程①，简述理由_____________。
(3)与基因组文库的基因相比，由过程④获得的目的基因中不包含________________。
(4)在基因工程操作步骤中，获得A的步骤称为________________，A的名称是____________。
(5)该目的基因在大肠杆菌表达出来的产物却没有生物活性，其主要原因是_______________。
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糖尿病是一种常见病,其发病率有逐年上升的局势，治疗糖尿病少不了胰岛素。如图表示运用基因工程技术生产胰岛素的几条途径。据图回答下列问题：
(1)科研人员用显微注射技术将重组质粒M转移到受体细胞A中,细胞A应该是___________。
(2)科研人员用DNA分子杂交技术检测胰岛素基因是否整合到转基因母羊的DNA上,以______为探针,使探针与羊基因组的DNA杂交,如果显示出________________，则表明胰岛素基因已插人染色体DNA中。
(3)受体细胞B应该是莴苣的_______________(填“体细胞”“卵细胞”或“受精卵),过程2常用的方法是______________。导入该细胞后,需对该细胞进行组织培养,经____________过程形成愈伤组织。
(4)若该转基因“胰岛素羊”乳汁中检测到胰岛素,该胰岛素与转基因“胰岛素细菌”产生的胰岛素相比不同之处是_____________________。其原因___________________。
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糖尿病是一种常见病，其发病率有逐年上升的趋势，治疗糖尿病少不了胰岛素。如图表示运用基因工程技术生产胰岛素的几条途径。据图回答下列问题：
（1）科研人员用显微注射技术将重组质粒M转移到受体细胞A中，细胞A应该是________。
（2）科研人员用DNA分子杂交技术检测胰岛素基因是否整合到转基因母羊的DNA上，以________为探针，使探针与羊基因组的DNA杂交，如果显示出________，则表明胰岛素基因已插入染色体DNA中。
（3）受体细胞B应该是莴苣的________（填“体细胞”“卵细胞”或“受精卵”），过程②常用的方法是________。导入该细胞后，需对该细胞进行组织培养，经________过程形成愈伤组织。
（4）转基因羊乳腺细胞分泌的胰岛素经检测具有生物活性，请回答，转基因大肠杆菌产生的胰岛素________（填“有生物活性”或“无生物活性”）。其原因是___________________。
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科学家成功制备出“嫁接”了人胰岛素基因的工程菌，它能大量合成人胰岛素，用来治疗糖尿病，使胰岛素的生产成本大大降低。回答相关问题：
（1）利用PCR技术扩增DNA时，需要在反应体系中添加的有机物质有_________、热稳定性DNA聚合酶、引物和4种脱氧核糖核苷三磷酸。已知DNA的合成方向总是从子链的5′端向3′端延伸，利用PCR技术以上图的DNA片段为模板扩增目的基因，需使用引物________（从A、B、C、D四种单链片段中选择）。
（2）利用某人的胰岛B细胞为材料，同时构建cDNA文库和基因组文库，cDNA文库中含有的基因数目比基因组文库中的少，其原因是_______________________________________。
（3）人的基因中有内含子，转录后内含子对应的RNA序列会被切除，而大肠杆菌没有相应机制。故想让大肠杆菌表达出人胰岛素，应从________（填“cDNA文库”或“基因组文库”）中获得人胰岛素基因。
（4）分别从DNA重组和基因的表达角度分析基因工程能够成功的两个原因_______________________________、_________________________。
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（7分）胰岛素是治疗糖尿病的重要药物。下图是利用基因工程技术生产人胰岛素时扩增目的基因的过程。请据图回答。
（1）尿糖检测的方法之一是在待检尿样中加入_______________试剂。
（2）不能利用人的皮肤细胞来完成①过程的理由是_________。
（3）与④相比，②不同的碱基配对方式是_________。
（4）若胰岛素mRNA中鸟嘌呤、胞嘧啶和腺嘌呤分别占碱基总数的32%、26%和19%，则B中含有腺嘌呤________%。
（5）若C中有1000个碱基对，其中腺嘌呤400个，重复进行⑤时消耗9000个游离的胞嘧啶脱氧核苷酸，则⑤过程重复进行了_______次。
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