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科学家成功制备出“嫁接”了人胰岛素基因的工程菌，它能大量合成人胰岛素，用来治疗糖尿病，使胰岛素的生产成本大大降低。回答相关问题：
（1）利用PCR技术扩增DNA时，需要在反应体系中添加的有机物质有_________、热稳定性DNA聚合酶、引物和4种脱氧核糖核苷三磷酸。已知DNA的合成方向总是从子链的5′端向3′端延伸，利用PCR技术以上图的DNA片段为模板扩增目的基因，需使用引物________（从A、B、C、D四种单链片段中选择）。
（2）利用某人的胰岛B细胞为材料，同时构建cDNA文库和基因组文库，cDNA文库中含有的基因数目比基因组文库中的少，其原因是_______________________________________。
（3）人的基因中有内含子，转录后内含子对应的RNA序列会被切除，而大肠杆菌没有相应机制。故想让大肠杆菌表达出人胰岛素，应从________（填“cDNA文库”或“基因组文库”）中获得人胰岛素基因。
（4）分别从DNA重组和基因的表达角度分析基因工程能够成功的两个原因_______________________________、_________________________。
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【生物——选修3:现代生物科技专题】
人类利用转基因技术成功获得了能大量合成胰岛素的大肠杆菌，它看起来与普通细菌没有什么不同，却可用来治疗糖尿病等疾病，使族岛素的生产成本大大降低。
（1）野生型大肠杆菌不能合成胰岛素的根本原因是______________。人体骨骼肌细胞________（填“能”或“不能”）合成胰岛素，原因是____________________________________________。
（2）转基因技术过程中常常会使用PCR扩增仪，其目的是______________________，该过程需要在反应体系中添加的有机物包括___________、模板、4种脱氧核苷酸、_______________。
（3）该技术的受体细胞是大肠杆菌，常用Ca2+处理受体细胞的目的是______________________。该技术常用的运载体是_________________________________。
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德国研究人员最近开发出一种新的生产工艺，利用转基因烟草生产抗艾滋病病毒药物，这项工艺可以大大降低生产抗艾滋病病毒药物的成本。植物型抗艾滋病药物的成功开发，对治疗艾滋病药物的普及具有重要意义。如图为制备转基因烟草流程示意图，请回答问题：
（1）构建携带外源基因的质粒时，需要使用的工具酶是___________。
（2）图中目的基因导入烟草细胞的方法是____________，除此之外导入植物受体细胞的方法还可以是_______。
（3）将含有目的基因的受体细胞培养成烟草植株的技术叫做__________，其理论基础是________________。
（4）在培养过程中，除添加必要的营养物质，还需要向培养基中添加________，同时除提供适宜的温度、光照和氧气等环境条件外，成功的关键是___________________________。
（5）与该培养过程所用培养基相比，用于动物细胞培养的培养液除含有水分、无机盐、糖类、维生素以及氨基酸等之外，还需要添加____________________。
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胰岛素是治疗人类糖尿病的重要药物。科研人员利用基因工程构建生物反应器，大量生产胰岛素。请回答下列问题：
（1）利用基因工程构建生物反应器，首先要获得胰岛素基因，在体外大量扩增胰岛素基因的方法是______，若胰岛素基因含有a个碱基对，其中腺嘌呤占n/m，则体外扩增循环n次，消耗游离的胞嘧啶脱氧核苷酸_______个。
（2）在构建基因表达载体过程中，先用双酶切割含目的基因的DNA片段和载体，优点是______________。
（3）若选择胚胎干细胞作为受体细胞，采用核移植技术获得生物反应器比较容易，原因是____________。
（4）通常用显微注射法将基因表达载体导入胚胎干细胞，待胚胎干细胞发育至_________阶段时，将胚胎移入受体子宫内进行发育，为获得多个基因型完全相同的后代，可采取___________技术。
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胰岛素是治疗糖尿病的重要药物。目前，人类已经成功的利用大肠杆菌生产出重组人胰岛素。请回答下列问题：
（1）用基因工程生产人胰岛素时，可先提取人胰岛B细胞中的_________，通过逆转录获得胰岛素基因，再利用__________技术扩增目的基因。胰岛素基因能被准确扩增的原因是________________。
（2）大肠杆菌常用作基因工程的受体菌，主要原因是_________________。
（3）为使人胰岛素基因在大肠杆菌体内成功表达，需要构建基因表达载体，在基因的首端需要添加人胰岛素基因的______________，其作用是__________________。
（4）从大肠杆菌中得到的胰岛素需经体外加工才具有生物活性，原因是大肠杆菌_______。制备好的胰岛素通常要低温冷藏，过高的温度会使胰岛素的_____________被破坏，从而变性失活。
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（五）回答下列有关基因工程的问题
从人的胰岛细胞中制备胰岛素编码基因，再用DNA连接酶与合适的质粒拼接成重组质粒。将重组质粒导入酵母菌中便可实现重组人胰岛素的工业化生产，用于治疗糖尿病。
1.本实验操作中，所选用的受体细胞是_________。
2.若人胰岛素编码基因是使用限制酶PstI（识别序列和切割位点如图1所示）切开的，那么如图2所示的质粒应使用限制酶________切开，才能保证人胰岛素编码基因与质粒直接粘连拼接。
3.如果人胰岛素编码基因和质粒的大小分别为0.5 kb和3.2 kb（1 kb = 1000对碱基），那么安装了单个人胰岛素编码基因的重组质粒用限制酶EcoRI和AatII联合酶切后，所产生的DNA片段大小应为______kb和_____kb。
4.将上述人胰岛素编码基因与质粒的连接产物和受体细胞混合进行导入操作，之后还需要筛选，这是因为_______。（可多选）
A. 人胰岛素基因和质粒连接形成重组质粒
B. 导入成功的概率很低，大部分酵母菌没有导入任何质粒
C. 人胰岛素基因自我连接
D. 连接之后可能产生空质粒，导入后产生含有空质粒的酵母菌
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（题文）（生物一选修3现代生物科技专题）
胰岛素是治疗人类糖尿病的重要药物。科研人员利用基因工程构建生物反应器，大量生产胰岛素。请回答下列问题。
（1）利用基因工程构建生物反应器，首先要获得胰岛素基因，在体外大量扩增胰岛素基因的方法是__________，前提是_________________________________。
（2）在构建基因表达载体过程中，先用双酶切割含目的基因的DNA片段和载体，优点是______________，然后用___________酶对目的基因和载体进行连接。
（3）构建生物反应器时一般选择受精卵作为受体细胞，原因是______________________。
（4）将基因表达载体导入受精卵的方法是___________，待受精卵发育至___________阶段进行移植，为获得基因型相同的后代，可采取______________________技术。
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（四）回答下列有关生物工程的问题
从人的胰岛细胞中制备胰岛素编码基因，将其与合适的质粒用产自大肠杆菌的DNA连接酶拼接成重组分子，后者导入酵母中便可实现重组人胰岛素的工业化生产，用于糖尿病的治疗。
1.下列与质粒的基本单位相同的有_____________ （填编号）
① 胰岛素基因 ② mRNA ③ 拟核DNA ④ 人胰岛素
2.若人胰岛素编码基因两端是用限制酶PstI（识别序列和切割位点如图2所示）切开的，那么如图1所示的质粒应使用限制酶________切开，才能保证人胰岛素编码基因与质粒直接粘连拼接。
3.已转到重组质粒上的单个人胰岛素编码基因能否再用2题中的限制酶切开？__________，理由是_________________。
4.将重组质粒导入酵母细胞，并进行大规模培养便可获得人胰岛素产品。上述人胰岛素产品生产过程中利用到的生物工程领域有___________。（填编号）
①发酵工程 ②基因工程 ③细胞工程 ④酶工程
5.医学上还利用生物工程技术将小鼠骨髓瘤细胞与一种B淋巴细胞融合，融合后细胞经培养可产生单克隆抗体，其理论依据有___________ 。（填编号）
①骨髓瘤细胞可以产生抗体，但不能无限增殖
②骨髓瘤细胞可以无限增殖，但不能产生抗体
③B淋巴细胞可以产生抗体，但不能无限增殖
④B淋巴细胞只有与骨髓瘤细胞融合才能产生抗体
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胰岛素是治疗糖尿病的重要药物。人类已经成功的利用大肠杆菌生产出重组人胰岛素。请回答下列问题：
(1)用基因工程生产人胰岛素时，可先提取人胰岛B细胞中的mRNA作___________，然后在___________的作用下合成胰岛素基因。
(2)利用PCR技术扩增胰岛素基因前根据一段已知目的基因的核苷酸序列合成___________，扩增后的胰岛素基因不能直接导人大肠杆菌体内的原因是____________________________________________。
(3)利用大肠杆菌生产出重组人胰岛素的核心是______________________，基因工程中的转化是指_________________________________的过程。将重组胰岛素基因导入大肠杆菌内，最常用的转化方法是______________________。
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（13分）（1）.用来治疗糖尿病的胰岛素，过去主要靠从动物体器官、组织中提取，但因受原料限制，无法推广。现在，可以用发酵工程的方法来生产胰岛素。若用大肠杆菌发酵来生产胰岛素，并结合基因工程，下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，请据图作答。
①能否利用人的皮肤细胞来完成①过程？________，为什么？________
。
②过程②必需的酶是________酶，过程③必需的酶是________酶。
③若A中共有a个碱基对，其中鸟嘌呤有b个，则③④⑤过程连续进行4次，至少需要提供胸腺嘧啶________个。
④在利用AB获得C的过程中，必须用________切割A和B，使它们产生________，再加入 ________，才可形成C。
⑤为使过程⑧更易进行，可用________（试剂）处理D。以增大的通透性，让重组DNA进人大肠杆菌体内。
(2)从概念上分析，这种基因重组与孟德尔基因自由组合所产生的基因重组有何不同?
________
________(至少两个方面)。
（3）有人提出“吃基因补基因”，你是否赞成这种观点，试从新陈代谢的角度简要说明理由：________