突尼斯软籽石榴是一种热门水果，深受大家喜爱，但其抗寒能力差，这成为限制该种石榴栽培的重要因素。科学家们利用基因工程对其进行定向改造，以得到抗寒性强的优良品种。下图表示构建基因表达载体的方法，图中标注的是限制酶的酶切位点，请回答下列问题：
（1）在切割目的基因时选择的两种限制酶最好为____________________，选择两种限制酶的优势是可避免________________。
（2）可通过________技术对获得的抗寒基因进行体外扩增，该过程使DNA解旋的方法与细胞内复制时的差异是________________，体外扩增时使用的酶具有的显著特点是__________________。
（3）将重组质粒导入经________（过程）培养成的软籽石榴的愈伤组织中常用________法。
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突尼斯软籽石榴是一种热门水果，深受大家喜爱，但其抗寒能力差，这成为限制该种石榴栽培的重要因素。科学家们利用基因工程对其进行定向改造，以得到抗寒性强的优良品种。下图表示构建基因表达载体的方法，图中标注的是限制酶的酶切位点，请回答下列问题：
（1）在切割目的基因时选择的两种限制酶最好为____________________，选择两种限制酶的优势是可避免________________。
（2）可通过________技术对获得的抗寒基因进行体外扩增，该过程使DNA解旋的方法与细胞内复制时的差异是________________，体外扩增时使用的酶具有的显著特点是__________________。
（3）将重组质粒导入经________（过程）培养成的软籽石榴的愈伤组织中常用________法。
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突尼斯软籽石榴是一种热门水果，深受大家喜爱，但其抗寒能力差，这成为限制该种石榴栽培的重要因素。科学家们利用基因工程对其进行定向改造，以得到抗寒性强的优良品种。下图表示构建基因表达载体的方法，图中标注的是限制酶的酶切位点，请回答下列问题：
（1）在切割目的基因时选择的两种限制酶最好为____________________，选择两种限制酶的优势是可避免________________。
（2）可通过________技术对获得的抗寒基因进行体外扩增，该过程使DNA解旋的方法与细胞内复制时的差异是________________，体外扩增时使用的酶具有的显著特点是__________________。
（3）将重组质粒导入经________（过程）培养成的软籽石榴的愈伤组织中常用________法。
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（8分）某地是全国最适宜生产水果的生态区之一，生产的苹果浓缩果汁酸度优于其他地区的苹果，深受欧美市场欢迎，发展无病毒苗木成为建立高产优质商品苹果基地的重要措施。
（1）下面是某地农林科学院进行苹果试管苗培养的一般过程：
请填写a、c所表示的内容。a．________ c．________
（2）实验室一般使用保存的培养基母液来制备MS固体培养基，配制母液时，无机物中________浓缩10倍，________浓缩100倍。
（3）该过程中a、c的启动关键在于培养基中所加 ________和细胞分裂素的浓度、________以及________。
（4）醋酸杆菌是生产苹果醋必用的菌种，可以从食醋中分离得到纯化的醋酸杆菌。扩大培养醋酸杆菌时，一般采用平板倒置培养，原因是________
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某地是全国最适宜生产水果的生态区之一，生产的苹果浓缩果汁酸度优于其他地区的苹果，深受欧美市场欢迎，发展无病毒苗木成为建立高产优质商品苹果基地的重要措施。
（1）下面是某地农林科学院进行苹果试管苗培养的一般过程：
请填写a、c所表示的内容。a．________ c．
（2）实验室一般使用保存的培养基母液来制备MS固体培养基，配制母液时，无机物中________ 浓缩10倍，________ ________浓缩100倍。
（3）该过程中a、c的启动关键在于培养基中所加生长素和细胞分裂素的浓度、________以及________。
（4）醋酸杆菌是生产苹果醋必用的菌种，可以从食醋中分离得到纯化的醋酸杆菌。扩大培养醋酸杆菌时，一般采用平板倒置培养，原因是________
（5）在传统发酵技术中，果醋的制作往往在果酒制作基础上进行，请用相关反应式表示：________
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某地是全国最适宜生产水果的生态区之一，生产的苹果浓缩果汁酸度优于其他地区的苹果，深受欧美市场欢迎，发展无病毒苗木成为建立高产优质商品苹果基地的重要措施。
（1）下面是某地农林科学院进行苹果试管苗培养的一般过程：
请填写a～c所表示的内容。 a．_______ b．_________ c．_________
（2）实验室一般使用保存的培养基母液来制备MS固体培养基，配制母液时，无机物中________浓缩10倍，________浓缩100倍。
（3）该过程中 a、c 的启动关键在于培养基中所加生长素和细胞分裂素的浓度、______________________以及______________。
（4）通过植物组织培养的方法，除了可以快速繁殖优良植物，还可以和________结合培育__________________。
（5）离体的植物细胞能发育成完整植株的根本原因是________________。
（6）醋酸杆菌是生产苹果醋必用的菌种，可以从食醋中分离得到纯化的醋酸杆菌。扩大培养醋酸杆菌时，一般采用平板倒置培养，原因是_____________________________。
（7）在传统发酵技术中，果醋的制作往往在果酒制作基础上进行，请用相关反应式表示：______________________________________。
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某地盛产石榴，酿制的石榴酒深受大众喜爱，请回答以下问题。
（1）用石榴发酵制作石榴酒的过程中，起主要作用的微生物是_______，其发酵液因具有___________的特点，可以抑制大多数其它微生物的生长。
（2）发酵装置内加入石榴汁后要留约1／3的空间，目的是____________、 ________________________。
（3）石榴汁发酵后，可用______________来鉴定发酵液中的酒精。有人将石榴酒酿成了石榴醋，可能的原因是________________________________。
（4）选择优质石榴品种利用组织培养法培育幼苗，可提高石榴产量。培养过程中若控制离体组织细胞能分裂但不分化，常用的两种激素及使用顺序为__________________________________________________。
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【生物——选修3 现代生物科技专题】科学家将拟南芥的抗寒基因（CBFl），转入香蕉以获得抗寒的香蕉品种。下图是某质粒载体上的Aac I、Xba I、EcoR I、Hind III四种限制酶的切割位点示意图。
据图回答问题：
（1）在该实验中为构建基因表达载体，用Sac I、Xba I切下CBFl基因后，对质粒载体进行切割的限制酶是___________，理由是___________。
（2）连接CBFl基因到该质粒载体后，作为基因表达载体的组成还必须有___________。将重组质粒导入香蕉细胞最用的方法是___________。
（3）为了鉴别受体细胞中是否含有CBFl基因，可用含___________的培养基进行筛选。
（4）科学家将生长健壮、苗龄一次的转基因香蕉（实验组）与非转基因香蕉（对照组）进行___________处理，鉴定两组之间的抗寒性差异，如果___________，则说明获得了抗寒的香蕉优质品种。
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蓝莓富含花青素，含有丰富的营养成分，是世界粮农组织推荐的五大健康水果之一，蓝莓的深加工产品也深受人们的喜爱，下图是某实验室利用蓝莓酒制作蓝莓醋的实验装置，回答以下问题：
（1）果醋发酵需要的菌种是___________，实验前需将该菌种在_______上进行扩大培养。
（2）甲中是蓝莓酒和蒸馏水的混合物，其比例是
A.1：2 B.1：4 C. 2：1 D.4：1
（3）乙中是经__________灭菌过的锯末，采用__________法将发酵菌株固定在锯末上制成固定化菌株，可大幅缩短生产周期，降低生产成本和提高生产效率，并增强果醋的风味。
（4）若该菌种在杂菌污染，欲消除污染的杂菌，最简单的方法是___________________。
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在某些深海鱼中发现的抗冻蛋白基因A控制合成的抗冻蛋白A有较好的应用价值，通过转基因技术获得抗寒能力提高的植株。回答有关问题：
（1）从深海鱼提取和纯化DNA时，选择NaCl溶液的合适浓度，利用DNA和其它杂质在不同NaCl溶液中 的特性，达到分离目的，加入一定量 可以进一步获得含杂质较少的DNA。
（2）构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割DNA后，可能产生黏性末端，也可能产生 末端。若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接，则应选择能使二者产生 黏性末端的限制酶。
（3）为了检测A基因转录的mRNA是否翻译成抗冻蛋白A，需从转基因生物提取 ，用相应的抗体进行 。
（4）若要用动物细胞工程技术，制备抗A抗体的杂交瘤细胞，需取免疫后小鼠的B淋巴细胞，并将该细胞与体外培养的小鼠骨髓瘤细胞按一定比例加入试管中，再加入 诱导细胞融合。细胞融合实验完成后，融合体系中除含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外，可能还有 ，体系中出现多种类型细胞的原因是 。
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基因工程
为扩大可耕地面积，增加粮食产量，沿海滩涂盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐碱基因培育出了耐盐碱水稻新品系，为解决我国的粮食问题做出了重要贡献。
几种限制酶识别序列及切割位点表
| 限制酶 | AluⅠ | EcoRⅠ | PstⅠ | SmaⅠ |
| 切割位点 |
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1.图中过程①是基因工程的______步骤，除了图示方法外，还可以用______方法达成同一目的。
2.过程②采用PCR技术是为了实现基因的扩增，该过程需要用到的原料主要是______。
3.如果要将耐盐碱基因和质粒重组，应该在图中两侧的A和B位置接上______限制酶识别序列。如果从连接效率更高的角度，最好选择____________________
A．EcoRⅠ和EcoRⅠ
B．PstⅠ和SmaⅠ
C．EcoRⅠ和PstⅠ
D．EcoRⅠ和SmaⅠ
4.从基因工程的分类上，图示的基因工程属于______基因工程。
5.耐盐碱基因成功导入了水稻细胞中，是否一定意味着该基因工程取得了成功？______，如果是请分析原因，如果否请提出一个从个体水平检测该基因工程是否成功的方案。______。
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