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近年来,化肥对农业生产的负面影响及对环境的污染日益引起人们的关注。由于固氮菌能固定大气中的氮气,提高土壤的氮含量,因而分离得到自生固氮菌(不与植物形成共生体)用以对土壤进行接种已成为一个新的研究方向。下表是微生物培养时常用的两种培养基,回答下列问题:

培养基甲

马铃薯

葡萄糖

琼脂

蒸馏水

pH

200g

20 g

15~20g

1000 ml

自然

培养基乙

甘露醇(或蔗糖、葡萄糖)

KH2PO4

MgSO4·7H2O

NaCl

CaSO4·2H2O

CaCO2

琼脂

pH

10g

0.2 g

0.2 g

0.2g

0.1 g

5g

20 g

1000 ml

自然

(1)分离固氮菌选用___(填“甲”或“乙”)培养基。从土壤深度看,选填____ ( “表层”或“深层”)的土壤容易得到自生固氮菌的菌种,获得的土样用______溶解后备用。

(2)接种前,将灭过菌的培养基放在37℃的恒温箱中培养24h,目的是______。

(3)用接种环蘸取少许稀泥浆,在培养基表面轻点15~20处,此操作过程中需对接种环进行______次灼烧灭菌。接好种的培养皿要在______处写明实验内容、接种人和日期。培养3~4天后可在接种的稀泥浆周围看到黏膜液状培养物,这是含有自生固氮菌的标志。

(4)某特定染液能使自生固氮菌着色,挑取黏液,用该染液染色后制成涂片,制成的涂片在______(填“低倍”或“高倍”)显微镜下观察固氮菌的形态特征。筛选到的菌落需进一步分离纯化,纯化自生固氮菌的培养接种方法最常用的两种是______。

高三生物综合题简单题

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