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胡萝卜素作为一种重要的天然色素在人们的日常生活中有着广泛的应用，在胡萝卜素的多种生产方式中，使用三孢布拉氏霉菌进行发酵生产的方法，以及产品的高纯度、无毒副作用及绿色环保等优点受到人们的广泛重视。请回答下列问题：
（1）用平板划线法纯化三孢布拉氏霉菌，通常使用的划线工具是___________，其灭菌方法是___________。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断的长满了菌，第二划线区域的第一条线上无菌落，其它划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有_____________。
（2）常用___________法进行活菌计数，但统计的菌落数往往比活菌实际数目低。
（3）不同的材料选用的提取方法不同，根据胡萝卜素具有______________的特点。常用__________法提取胡萝卜素。提取胡萝卜素时，干燥过程应控制好温度和_____________以防止胡萝卜素分解。
（4）提取的胡萝卜素样品通过_____________法进行鉴定，确定是否提取到胡萝卜素。
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胡萝卜素作为一种重要的天然色素在人们的日常生活中有着广泛的应用，在胡萝卜素的多种生产方式中，使用三孢布拉氏霉菌进行发酵生产的方法，以及产品的高纯度、无毒副作用及绿色环保等优点受到人们的广泛重视。请回答下列问题：
（1）用平板划线法纯化三孢布拉氏霉菌，通常使用的划线工具是___________，其灭菌方法是___________。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断的长满了菌，第二划线区域的第一条线上无菌落，其它划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有_____________。
（2）常用___________法进行活菌计数，但统计的菌落数往往比活菌实际数目低。
（3）不同的材料选用的提取方法不同，根据胡萝卜素具有______________的特点。常用__________法提取胡萝卜素。提取胡萝卜素时，干燥过程应控制好温度和_____________以防止胡萝卜素分解。
（4）提取的胡萝卜素样品通过_____________法进行鉴定，确定是否提取到胡萝卜素。
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【生物——选修1：生物技术实践】
胡萝卜素作为一种重要的天然色素在人们的日常生活中有着广泛的应用，在胡萝卜素的多种生产方式中，使用三孢布拉氏霉菌进行发酵生产的方法，以及产品的高纯度、无毒副作用及绿色环保等优点受到人们的广泛重视。请回答下列问题：
（1）用平板划线法纯化三孢布拉氏霉菌，通常使用的划线工具是___________，其灭菌方法是___________。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断的长满了菌，第二划线区域的第一条线上无菌落，其它划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有_________________________________。
（2）常用___________法进行活菌计数，但统计的菌落数往往比活菌实际数目低。
（3）不同的材料选用的提取方法不同，根据胡萝卜素具有______________的特点。常用______________法提取胡萝卜素。提取胡萝卜素时，干燥过程应控制好温度和______________以防止胡萝卜素分解。
（4）提取的胡萝卜素样品通过_____________法进行鉴定，确定是否提取到胡萝卜素。
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胡萝卜素作为一种重要的天然色素在人们的日常生活中有着广泛的应用。胡萝卜素可以通过微生物发酵的方法获得。研究小组尝试用橙色粘球菌生产胡萝卜素，请回答问题：
（1）从富含有机质的土壤中取样后，要进行选择培养，其目的是____________________。
（2）用平板划线法纯化橙色粘球菌，通常使用的划线工具是___________，其灭菌方法是___________。某个平板共划线5个区域，则该过程中需要从试管中沾取 _____次菌液。培养一段时间后，挑取平板上形态大小和隆起度等一致的、橙黄色的_____进行重复培养，直到分离出单一菌株。
（3）用萃取法从该微生物菌体中提取胡萝卜素时，应采用__________ 加热的方法。加热时需安装冷凝回流装置，其目的是防止______________。
（4）鉴定萃取物中是否含有胡萝卜素时，通常采用________________法，该方法也可用于分离色素，其原理是______________________。
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三孢布拉氏霉菌由于β-胡萝卜素含量高、易于培养等特点而广泛应用于工业化β-胡萝卜素的生产。请回答下列问题：
（1）用稀释涂布平板法可以纯化三孢布拉氏霉菌，进行梯度稀释时一般是将1mL菌液移入盛有______mL无菌水的试管中，进行活菌计数时，统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，原因是______。
（2）用平板划线法分离该细菌。在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是______。
（3）现有“乙醇”、“石油醚”、“乙醚”三种溶剂，应选用其中的______作为胡萝卜素的萃取剂，不选择其他两种的原因是______；萃取的效率主要取决于萃取剂的______和______。
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三孢布拉氏霉菌具有β－胡萝卜素含量高.易于培养等特点而广泛用于工业化β－胡萝卜素的生产。
下图l是在发酵罐内三孢布拉氏霉菌菌体生物量及β－胡萝卜素产量随时间变化曲线图。图2是样品层析结果及与β一胡萝卜素标准样的比对。请回答下列问题：
（1）用稀释涂布平板法筛选和纯化三孢布拉氏霉菌，配制稀释倍数为101~106的系列稀释液时，需用移液管将1mL菌液移入盛有__mL蒸馏水的试管中。对同一浓度的稀释液，分别用血球计数板计数和稀释涂布平板法计数，若不存在实验误操作，则后者的数量少于前者，其原因是_______。若要所得估计值更接近实际值，除应严格操作.多次重复外，还应该保持待测样品稀释的________________。
（2）不同的材料选用的提取方法不同。用萃取法提取胡萝卜素，但从橘皮中提取精油应采用___法；为了提高出油率，压榨前采用的方法是_________。
（3）图2为萃取的胡萝卜素样品通过纸层析进行鉴定的结果。从图中分析可知，色带__为β－胡萝卜素。出现样品2的结果，可能原因有：①在萃取过程中__（A. 萃取温度高，时间长／B. 干燥温度高，时间长）；②在鉴定过程中__（A. 未经浓缩蒸馏／B. 点样太快，样点小）。
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【生物——选修i：生物技术实践】β—胡萝卜素广泛存在于植物、藻类和真菌中，人体内不能合成β-胡萝卜素，必须从外界摄取。工业上大量获得e—胡萝卜素主要通过三孢布拉氏霉菌发酵生产。请回答：
（1）根据胡萝卜素分子中 的数目可将胡萝卜素分为α、β、γ三种。一分子β—胡萝卜素在人体内可被氧化成两分子的 ，因此，β-胡萝卜素可以用来治疗夜盲症等疾病。
（2）培养三孢布拉氏霉菌时，培养基中的基本营养物质包括碳源、氮源、水和无机盐四大类。为了获得高产菌株的单个菌落，接种时可用接种环在固体培养基上进行 操作，为了使聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，进行该操作时应该特别注意两点，一是每一次划线前要灼烧接种环（并待其冷却），二是 。
（3）让高产菌株大量繁殖的过程叫菌种培养，大量产生胡萝卜素的过程叫发酵培养。这两个过程中，的培养基中碳/氮比例更高，原因是 。
（4）胡萝卜素的提取，也可采用优良的胡萝卜进行组织培养。研究发现，生长素和细胞分裂素的协同调控在植物组织培养中非常重要。按照不同的顺序使用这两类激素，会得到不同的结果。若要有利于细胞分裂但细胞不分化，使用的顺序是 ;若同时使用这两类激素，则愈伤组织的分化频率会提高。
（5）萃取胡萝卜素时一般选择石油醚作萃取剂，原因是该有机溶剂能够充分溶解胡萝卜素、具有较高的 并且不与水混溶。
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三孢布拉式霉菌是一种可产生胡萝卜素的真菌，常用于胡萝卜素的工业化生产。请回答：
（1）胡萝卜素是常用的食品色素，广泛地用作食品、饮料、饲料的添加剂，除此以外，它还可以用于治疗______。（写出一点即可）
（2）配制三孢布拉式霉菌的培养基时，需将pH调至______（填“酸性”或“中性”或“微碱性”）
（3）将发酵后的三孢布拉式霉菌处理后研磨成粉末，加入______（填“石油醚”或“乙醇”或“丙酮”）萃取选择该萃取剂的依据是：具有较髙的沸点·能够充分溶解胡萝卜素，并且______。（4）将提取的胡萝卜素粗品通过______法进行鉴定，据上图结果可判断出样品2中含有胡萝卜素，判断依据是____________。
（5）研究者利用聚丙烯酰胺凝胶电泳对三孢布拉氏霉菌的蛋白质进行分离，为了消除蛋白质分子原有电荷量对迁移率的影响，可在凝胶中加入______，原理是______，因而掩盖了不同种蛋白质间的电荷差别，使电泳迁移率完全取决于蛋白质分子的大小。
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三孢布拉式霉菌是一种可产生胡萝卜素的真菌，常用于胡萝卜素的工业化生产。请回答：
（1）胡萝卜素是常用的食品色素，广泛地用作食品、饮料、饲料的添加剂，除此以外，它还可以用于治疗______。（写出一点即可）
（2）配制三孢布拉式霉菌的培养基时，需将pH调至______（填“酸性”或“中性”或“微碱性”）
（3）将发酵后的三孢布拉式霉菌处理后研磨成粉末，加入______（填“石油醚”或“乙醇”或“丙酮”）萃取选择该萃取剂的依据是：具有较髙的沸点·能够充分溶解胡萝卜素，并且______。（4）将提取的胡萝卜素粗品通过______法进行鉴定，据上图结果可判断出样品2中含有胡萝卜素，判断依据是____________。
（5）研究者利用聚丙烯酰胺凝胶电泳对三孢布拉氏霉菌的蛋白质进行分离，为了消除蛋白质分子原有电荷量对迁移率的影响，可在凝胶中加入______，原理是______，因而掩盖了不同种蛋白质间的电荷差别，使电泳迁移率完全取决于蛋白质分子的大小。
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选修1 生物技术实践
三孢布拉氏霉菌具有β胡萝卜素含量高、易于培养等特点而广泛用于工业化β胡萝卜素的生产．请回答下列问题．
（1）用稀释涂布平板法可以纯化三孢布拉氏霉菌，进行梯度稀释时一般是将1mL菌液移入盛有 mL无菌水的试管中．常用 法进行活菌计数，其原理是培养基表面的一个菌落来源于 ．但统计的菌落数往往 （填“多于”或“少于”）稀释液中的活菌数．
（2）不同的材料选用的提取方法不同，根据胡萝卜素具有 的特点，常用 法提取胡萝卜素，其效率主要取决 ．
（3）如图为提取的胡萝卜素样品通过纸层析进行鉴定的结果，从图中分析可知，色带 为β胡萝卜素．出现样品2的结果，可能原因是在操作过程中① （A．萃取温度高，时间长 B．干燥温度高，时间长）；② （A．未经浓缩蒸馏 B．点样太快，样点小）．
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