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研究人员利用小鼠(2N＝40)的单倍体ES细胞(只含一个染色体组)，成功培育出转基因小鼠。其主要技术流程如下图所示：
注：Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ代表四种限制酶，箭头指向的位置为限制酶的切割位置，Ampr是氨苄青霉素抗性基因，Neor是G418抗性基因。
（1）重组质粒上的抗生素抗性基因可作为________，其作用是有利于筛选出含有目的基因的细胞。氨苄青霉素不能有效杀死小鼠细胞，而一定浓度的G418能有效杀死不具有Neor的小鼠细胞，结合上图推测，过程①选用的2种限制酶是________(选填图中的编号)，图中③处的培养液应添加________________(填氨苄青霉素或G418 )。
（2）若图中过程①选用的2种限制酶识别序列和切割位置分别是
和
，则经这两种限制酶切割后所产生的黏性末端是______。此时，图中过程②应选用______(填E·coli DNA连接酶或T4DNA连接酶)。
（3）据图分析，细胞乙内除线粒体DNA外，还有________个DNA分子；细胞乙发育成桑堪胚的过程中细胞分裂方式是____________，将细胞乙培养成桑椹胚的技术称为________技术，该胚胎中每个细胞的体积变化是_______。
（4）下列关于质粒运载体的说法正确的是________。
A．没有限制酶就无法使用质粒运载体
B．质粒运载体只能在与目的基因重组后进入细胞
C．质粒运载体可能是从细菌或者病毒的DNA改造的
D．质粒运载体的复制和表达也遵循中心法则
E．质粒运载体只有把目的基因整合到受体细胞的DNA中才能表达
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研究人员利用小鼠的单倍体ES细胞（只有一个染色体组），成功培育出转基因小鼠。其主要技术流程如图所示，请分析回答下列问题：
（1）利用PCR技术可以扩增目的基因，PCR反应体系中除含缓冲液、模板DNA、dNTP（包含dATP、dCTP、dGTP、dTTP）、引物外，还应含有____；引物应选用下图中____（填图中字母）。
（2）在基因工程操作步骤中，过程①②称为 ___。已知氨苄青霉素不能有效杀死小鼠细胞，而一定浓度的G418能有效杀死不具有Neo′的小鼠细胞。结合上图推测， 过程①选用的两种限制酶是 ___（填图中的编号），③处的培养液应添加____（填“氨苄青霉素”或“G418”）。
（3）图中桑椹胚需通过____技术移入代孕小鼠子宫内继续发育，进行该操作前需对受体小鼠进行____处理。
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研究人员利用小鼠的单倍体ES细胞(只有一个染色体组)，成功培育出转基因小鼠。其主要技术流程如图所示，请分析回答下列问题：
注：Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ代表四种限制酶。箭头指向的位置为限制酶的切割位置：Ampr是氨芐青霉素抗性基因，Neor是G418抗性基因。
(1)利用PCR技术可以扩增目的基因，PCR反应体系中除含缓冲液、模板DNA、dNTP(包含dATP、dCTP、dGTP、dTTP)、引物以外，还应含有________；引物应选用下图中的________(填图中标号)。
(2)在基因工程操作步骤中，过程①②称为________。已知氨芐青霉素不能有效杀死小鼠细胞，而一定浓度的G418能有效杀死不具有Neor的小鼠细胞。结合上图推测，过程①选用的2种限制酶是________(选填图中的编号)，③处的培养液应添加________(填“氨芐青霉素”或“G418”)
(3)细胞乙与________类似，图中桑椹胚需通过________技术移入代孕小鼠子宫内继续发育，进行该操作前需对受体小鼠进行________处理。
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研究人员利用小鼠的单倍体ES细胞(只有一个染色体组)，成功培育出转基因小鼠。其主要技术流程如图所示，请分析回答下列问题：
注：Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ代表四种限制酶。箭头指向的位置为限制酶的切割位置：Ampr是氨芐青霉素抗性基因，Neor是G418抗性基因。
（1）利用PCR技术可以扩增目的基因，PCR反应体系中除含缓冲液、模板DNA、dNTP(包含dATP、dCTP、dGTP、dTTP)、引物以外，还应含有________；引物应选用下图中的________(填图中标号)。
（2）在基因工程操作步骤中，过程①②称为________。已知氨芐青霉素不能有效杀死小鼠细胞，而一定浓度的G418能有效杀死不具有Neor的小鼠细胞。结合上图推测，过程①选用的2种限制酶是________(选填图中的编号)，③处的培养液应添加________(填“氨芐青霉素”或“G418”)
（3）细胞乙与________类似，图中桑椹胚需通过________技术移入代孕小鼠子宫内继续发育，进行该操作前需对受体小鼠进行________处理。
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研究人员利用小鼠的单倍体ES细胞（只有一个染色体组），成功培育出转基因小鼠。其主要技术流程如图Ⅰ所示，请分析回答下列问题
注：Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ代表四种限制酶。箭头指向的位置为限制酶的切割位置：Ampr是氨苄青霉素抗性基因，Neor是G418抗性基因，G418是一种抗生素
（1）利用PCR技术可以扩增目的基因，PCR反应体系中除含缓冲液、模板DNA、dNTP(包含dATP、dCTP、dGTP、dTTP)、引物以外，还应含有__________酶；引物应选用图2中的__________（填图中标号）。
（2）已知氨苄青霉素不能有效杀死小鼠细胞，而一定浓度的 G418能有效杀死不具有Neor的小鼠细胞。结合上图推测，过程①选用的2种限制酶是__________（选填图中的编号），③处的培养液应添加__________（填“氨苄青霉素”或“G418”）
（3）图中桑椹胚需通过__________技术移入代孕小鼠子宫内继续发育。
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研究人员利用小鼠的单倍体 ES 细胞（只有一个染色体组），成功培育出转基因小 鼠。其主要技术流程如图所示，请分析回答下列问题：
注：Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ代表四种限制酶。箭头指向的位置为限制酶的切割位点：Ampr 是氨苄青霉素抗性基因，Neor 是 G418 抗性基因。
（1）利用 PCR 技术可以扩增目的基因，PCR 反应体系中除含缓冲液、模板 DNA、dNTP（包含 dATP、dCTP、 dGTP、dTTP）、引物外，还应含有_____；引物应选用下图中的_____（填图中字母）。
（2）在基因工程操作步骤中，过程①②称为_____。已知氨苄青霉素不能有效杀死小鼠细胞， 而一定浓度的 G418 能有效杀死不具有 Neor 的小鼠细胞。结合上图推测，过程①选用的 2 种限制酶是_____（填图中的编号），③处的培养液应添加_____（填“氨苄青霉素”或“G418”）。
（3）图中桑椹胚需通过_____技术移入代孕小鼠子宫内继续发育，进行该操作前需对受体小鼠进行_____处理。
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研究人员利用小鼠的单倍体ES细胞（只有一个染色体组），成功培有出转基因小鼠。其主要技术流程如下图所示，请分析并回答下列问题：
注；Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ代表四种限制酶。箭头指向的位置为限制酶的切割位点；Amp＇是氨苄青霉索抗性基因，Neo＇是G418抗性基因。
（1）利用PCR技术可以扩增目的基因，PCR反应体系中除含缓冲液、模板DNA、dNTP、引物外，还应含有__________；引物应选用下图中____________（填图中字母）。
注：A、B、C、D是引物，箭头是延伸方向。
（2）在基因工程操作步骤中，过程①②称为___________，重组质粒上的抗生素抗性基因可作为___________。已知氨苄青霉素不能有效杀死小鼠细胞，而一定浓度的G418能有效杀死不具有Neor的小鼠细胞。结合上图推测，过程①选用的两种限制酶是__________（填图中的编号），③处的培养液应添加__________（填“氨苄青霉素”或“G418”）。
（3）据图分析，细胞乙发育成桑椹胚的过程中细胞分裂方式是_____________，将细胞乙培养成桑椹胚的技术称为___________技术。
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小鼠（2N=40）是常用的实验动物。研究人员通过下图所示的流程培育出了雄性小鼠A和小鼠B。在不考虑基因突变的情况下，回答下列问题：
（1）可通过___________技术将桑椹胚移入代孕母鼠子宫内，使其继续发育。从生理学基础看，代孕母鼠对移入子宫的胚胎基本不发生___________，这为胚胎在受体内存活提供了可能。
（2）经检测，第一极体的染色体数目正常，则在正常情况下，图中所示的卵母细胞应含有________个核DNA，从8细胞胚中取下的细胞在有丝分裂中期时含有的染色体数目是_____________________。
（3）若提供精子的雄鼠基因型是XbY，提供卵母细胞的雌鼠基因型是XBXb，第一极体和8细胞胚取下的细胞中均检测到有基因B，原因是_________________________________。
（4）利用克隆技术培育小鼠B的过程，需要去除卵母细胞的______________________。
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（10分）科学家从129品系小鼠中成功分离出胚胎干细胞，并注入小鼠的囊胚，形成嵌合体囊胚，育出嵌合体小鼠。利用该技术，可获得表达绿色荧光蛋白（ GFP）转基因昆明（KM）小鼠，操作流程图如下，请回答：
（1）在基因工程的操作中，携带GFP基因 的病毒作为 。
（2）步骤②中，利用荧光显微镜观察到细胞 ，将其取出，进行扩增培养。
（3）步骤③中，胚胎的收集方法称为 。
（4）步骤⑤中，胚胎干细胞可以 形成包括生殖腺在内的各种组织。
（5）图中X小鼠为 小鼠。
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（10分）科学家从129品系小鼠中成功分离出胚胎干细胞，并注入小鼠的囊胚，形成嵌合体囊胚，育出嵌合体小鼠。利用该技术，可获得表达绿色荧光蛋白（ GFP）转基因昆明（KM）小鼠，操作流程图如下，请回答：
（1）在基因工程的操作中，携带GFP基因 的病毒作为 。
（2）步骤②中，利用荧光显微镜观察到细胞 ，将其取出，进行扩增培养。
（3）步骤③中，胚胎的收集方法称为 。
（4）步骤⑤中，胚胎干细胞可以 形成包括生殖腺在内的各种组织。
（5）图中X小鼠为 小鼠。
和
，则经这两种限制酶切割后所产生的黏性末端是______。此时，图中过程②应选用______(填E·coli DNA连接酶或T4DNA连接酶)。