研究人员利用小鼠的单倍体ES细胞(只有一个染色体组)，成功培育出转基因小鼠。其主要技术流程如图所示，请分析回答下列问题：
注：Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ代表四种限制酶。箭头指向的位置为限制酶的切割位置：Ampr是氨芐青霉素抗性基因，Neor是G418抗性基因。
（1）利用PCR技术可以扩增目的基因，PCR反应体系中除含缓冲液、模板DNA、dNTP(包含dATP、dCTP、dGTP、dTTP)、引物以外，还应含有________；引物应选用下图中的________(填图中标号)。
（2）在基因工程操作步骤中，过程①②称为________。已知氨芐青霉素不能有效杀死小鼠细胞，而一定浓度的G418能有效杀死不具有Neor的小鼠细胞。结合上图推测，过程①选用的2种限制酶是________(选填图中的编号)，③处的培养液应添加________(填“氨芐青霉素”或“G418”)
（3）细胞乙与________类似，图中桑椹胚需通过________技术移入代孕小鼠子宫内继续发育，进行该操作前需对受体小鼠进行________处理。
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研究人员利用小鼠的单倍体ES细胞（只有一个染色体组），成功培育出转基因小鼠。其主要技术流程如图所示，请分析回答下列问题：
（1）利用PCR技术可以扩增目的基因，PCR反应体系中除含缓冲液、模板DNA、dNTP（包含dATP、dCTP、dGTP、dTTP）、引物外，还应含有____；引物应选用下图中____（填图中字母）。
（2）在基因工程操作步骤中，过程①②称为 ___。已知氨苄青霉素不能有效杀死小鼠细胞，而一定浓度的G418能有效杀死不具有Neo′的小鼠细胞。结合上图推测， 过程①选用的两种限制酶是 ___（填图中的编号），③处的培养液应添加____（填“氨苄青霉素”或“G418”）。
（3）图中桑椹胚需通过____技术移入代孕小鼠子宫内继续发育，进行该操作前需对受体小鼠进行____处理。
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研究人员利用小鼠的单倍体ES细胞(只有一个染色体组)，成功培育出转基因小鼠。其主要技术流程如图所示，请分析回答下列问题：
注：Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ代表四种限制酶。箭头指向的位置为限制酶的切割位置：Ampr是氨芐青霉素抗性基因，Neor是G418抗性基因。
(1)利用PCR技术可以扩增目的基因，PCR反应体系中除含缓冲液、模板DNA、dNTP(包含dATP、dCTP、dGTP、dTTP)、引物以外，还应含有________；引物应选用下图中的________(填图中标号)。
(2)在基因工程操作步骤中，过程①②称为________。已知氨芐青霉素不能有效杀死小鼠细胞，而一定浓度的G418能有效杀死不具有Neor的小鼠细胞。结合上图推测，过程①选用的2种限制酶是________(选填图中的编号)，③处的培养液应添加________(填“氨芐青霉素”或“G418”)
(3)细胞乙与________类似，图中桑椹胚需通过________技术移入代孕小鼠子宫内继续发育，进行该操作前需对受体小鼠进行________处理。
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研究人员利用小鼠的单倍体ES细胞(只有一个染色体组)，成功培育出转基因小鼠。其主要技术流程如图所示，请分析回答下列问题：
注：Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ代表四种限制酶。箭头指向的位置为限制酶的切割位置：Ampr是氨芐青霉素抗性基因，Neor是G418抗性基因。
（1）利用PCR技术可以扩增目的基因，PCR反应体系中除含缓冲液、模板DNA、dNTP(包含dATP、dCTP、dGTP、dTTP)、引物以外，还应含有________；引物应选用下图中的________(填图中标号)。
（2）在基因工程操作步骤中，过程①②称为________。已知氨芐青霉素不能有效杀死小鼠细胞，而一定浓度的G418能有效杀死不具有Neor的小鼠细胞。结合上图推测，过程①选用的2种限制酶是________(选填图中的编号)，③处的培养液应添加________(填“氨芐青霉素”或“G418”)
（3）细胞乙与________类似，图中桑椹胚需通过________技术移入代孕小鼠子宫内继续发育，进行该操作前需对受体小鼠进行________处理。
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研究人员利用小鼠的单倍体ES细胞（只有一个染色体组），成功培育出转基因小鼠。其主要技术流程如图Ⅰ所示，请分析回答下列问题
注：Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ代表四种限制酶。箭头指向的位置为限制酶的切割位置：Ampr是氨苄青霉素抗性基因，Neor是G418抗性基因，G418是一种抗生素
（1）利用PCR技术可以扩增目的基因，PCR反应体系中除含缓冲液、模板DNA、dNTP(包含dATP、dCTP、dGTP、dTTP)、引物以外，还应含有__________酶；引物应选用图2中的__________（填图中标号）。
（2）已知氨苄青霉素不能有效杀死小鼠细胞，而一定浓度的 G418能有效杀死不具有Neor的小鼠细胞。结合上图推测，过程①选用的2种限制酶是__________（选填图中的编号），③处的培养液应添加__________（填“氨苄青霉素”或“G418”）
（3）图中桑椹胚需通过__________技术移入代孕小鼠子宫内继续发育。
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研究人员利用小鼠的单倍体 ES 细胞（只有一个染色体组），成功培育出转基因小 鼠。其主要技术流程如图所示，请分析回答下列问题：
注：Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ代表四种限制酶。箭头指向的位置为限制酶的切割位点：Ampr 是氨苄青霉素抗性基因，Neor 是 G418 抗性基因。
（1）利用 PCR 技术可以扩增目的基因，PCR 反应体系中除含缓冲液、模板 DNA、dNTP（包含 dATP、dCTP、 dGTP、dTTP）、引物外，还应含有_____；引物应选用下图中的_____（填图中字母）。
（2）在基因工程操作步骤中，过程①②称为_____。已知氨苄青霉素不能有效杀死小鼠细胞， 而一定浓度的 G418 能有效杀死不具有 Neor 的小鼠细胞。结合上图推测，过程①选用的 2 种限制酶是_____（填图中的编号），③处的培养液应添加_____（填“氨苄青霉素”或“G418”）。
（3）图中桑椹胚需通过_____技术移入代孕小鼠子宫内继续发育，进行该操作前需对受体小鼠进行_____处理。
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研究人员利用小鼠的单倍体ES细胞（只有一个染色体组），成功培有出转基因小鼠。其主要技术流程如下图所示，请分析并回答下列问题：
注；Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ代表四种限制酶。箭头指向的位置为限制酶的切割位点；Amp＇是氨苄青霉索抗性基因，Neo＇是G418抗性基因。
（1）利用PCR技术可以扩增目的基因，PCR反应体系中除含缓冲液、模板DNA、dNTP、引物外，还应含有__________；引物应选用下图中____________（填图中字母）。
注：A、B、C、D是引物，箭头是延伸方向。
（2）在基因工程操作步骤中，过程①②称为___________，重组质粒上的抗生素抗性基因可作为___________。已知氨苄青霉素不能有效杀死小鼠细胞，而一定浓度的G418能有效杀死不具有Neor的小鼠细胞。结合上图推测，过程①选用的两种限制酶是__________（填图中的编号），③处的培养液应添加__________（填“氨苄青霉素”或“G418”）。
（3）据图分析，细胞乙发育成桑椹胚的过程中细胞分裂方式是_____________，将细胞乙培养成桑椹胚的技术称为___________技术。
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研究人员利用小鼠(2N＝40)的单倍体ES细胞(只含一个染色体组)，成功培育出转基因小鼠。其主要技术流程如下图所示：
注：Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ代表四种限制酶，箭头指向的位置为限制酶的切割位置，Ampr是氨苄青霉素抗性基因，Neor是G418抗性基因。
（1）重组质粒上的抗生素抗性基因可作为________，其作用是有利于筛选出含有目的基因的细胞。氨苄青霉素不能有效杀死小鼠细胞，而一定浓度的G418能有效杀死不具有Neor的小鼠细胞，结合上图推测，过程①选用的2种限制酶是________(选填图中的编号)，图中③处的培养液应添加________________(填氨苄青霉素或G418 )。
（2）若图中过程①选用的2种限制酶识别序列和切割位置分别是
和
，则经这两种限制酶切割后所产生的黏性末端是______。此时，图中过程②应选用______(填E·coli DNA连接酶或T4DNA连接酶)。
（3）据图分析，细胞乙内除线粒体DNA外，还有________个DNA分子；细胞乙发育成桑堪胚的过程中细胞分裂方式是____________，将细胞乙培养成桑椹胚的技术称为________技术，该胚胎中每个细胞的体积变化是_______。
（4）下列关于质粒运载体的说法正确的是________。
A．没有限制酶就无法使用质粒运载体
B．质粒运载体只能在与目的基因重组后进入细胞
C．质粒运载体可能是从细菌或者病毒的DNA改造的
D．质粒运载体的复制和表达也遵循中心法则
E．质粒运载体只有把目的基因整合到受体细胞的DNA中才能表达
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哺乳动物单倍体胚胎干细胞技术是遗传学研究的新手段，该项技术为研究隐性基因功能提供了理想的细胞模型。如图表示研究人员利用小鼠获取单倍体胚胎干细胞的方法。请分析回答：
（1）方法一中，研究人员需对实验小鼠注射__________，使其__________，从而获得更多的卵母细胞。用SrCl2溶液处理激活卵母细胞，在体外选用特制的培养液培养至__________期，从内细胞团中分离、筛选出胚胎干细胞。采用这种方法获得的单倍体胚胎干细胞称为孤雌单倍体胚胎干细胞。
（2）采用方法二可获得孤雄单倍体胚胎干细胞。受精阶段，防止多精入卵的第一道屏障是__________。研究人员用特定方法去除细胞M中的__________原核，再对处理后的细胞进行进一步的培养、分离和筛选。
（3）研究发现，小鼠单倍体胚胎干细胞存在自发二倍体化的现象。可以通过测定并分析细胞内DNA分子的含量，或利用显微镜观察细胞中的染色体数目进行确定，最好选择处于__________（写出分裂类型及时期）的细胞进行观察。
（4）通过饲养家畜、池塘养鱼、桑叶养蚕，提高农民经济收入，使保护环境和发展经济相互协调，主要体现了生态工程的__________原理。
（5）现代生物技术在造福人类的同时，也可能引起一系列的安全和伦理问题，下列说法错误的是_______。
A.对于转基因生物，公众在食物安全、生物安全和环境安全方面产生了争论
B.生物武器包括致病菌、病毒、生化毒剂以及经过基因重组的致病菌等
C.我国已经对转基因食品和转基因农产品强制实施了产品标识制度
D.我国对于“克隆人”这一技术总体来说是禁止生殖性克隆和治疗性克隆
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科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗。其主要技术流程如图，请回答下列问题：
（1）在获取上皮细胞悬浮液的时候，通常要用胰蛋白酶而不用胃蛋白酶处理组织，原因是___________________________________________________________________。
（2）步骤①应先对卵母细胞进行______处理。由图可知，步骤②要分离出ES细胞，需将重组胚胎培养到_____________期。
（3）步骤③选择ES细胞作为受体细胞而不是上皮细胞，是因为ES细胞___________。该过程需要先利用_______技术扩增干扰素基因，其前提是要有一段已知干扰素基因的核苷酸序列以便合成_____________。
（4）步骤④将ES细胞诱导分化成造血干细胞而不是其他细胞，其原因是_______________。
（5）为检测干扰素基因是否在小鼠体内成功表达，可以采用抗原——抗体杂交技术，其原理是____________________________________________。
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Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗，其技术流程如图（图中数字序号表示的是相关过程）。请回答下列有关问题：
（1）过程②利用的技术是______________，过程③中涉及到了基因工程技术，其中作为受体细胞的是____________。
（2）过程③中获取的目的基因是_______________，可以根据该基因的___________________设计引物，利用PCR技术扩增目的基因片段。按此方法和图示技术流程，完成基Rag2基因缺失小鼠的基因治疗涉及的酶有____________和耐高温的DNA聚合酶(Taq酶)等。
（3）图中造血干细胞中的遗传物质至少有___________个来源。为检测Rag2基因的表达情况，可提取治疗后小鼠骨髓细胞的蛋白质，用____________进行杂交实验。图中所述克隆技术属于___________克隆。
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