-
科研人员从耐盐植物中获得了耐盐基因，利用转基因技术将耐盐基因转入水稻细胞中，进而培育出了耐盐水稻新品系。下图表示构建耐盐基因表达载体的过程。请回答下列问题：
(1)据图分析可知，在构建的耐盐基因表达载体中，图中未标注出的必需元件有耐盐基因启动子，其功能是_________________________________。
(2)据图分析可知，在构建耐盐基因表达载体时，需要用______________对质粒进行切割，从而保证______________________________。
(3)常用农杆菌转化法将耐盐基因导入水稻受体细胞，根据农杆菌的感染特点，将耐盐基因插入Ti质粒的T-DNA上，经过转化作用进入水稻细胞，并将其插入水稻细胞______________上，从而使其遗传特性得以稳定维持和表达。
(4)受体细胞经诱导后形成愈伤组织的过程称为______________，进一步培育成幼苗，这体现了___________________________。检测转基因水稻是否培育成功可使用的最简便的方法是________________________________。
-
科研人员利用现代生物技术培育出双转基因奶牛新品种，以便通过乳腺生物反应器生产人乳铁蛋白肽（抗细菌）和人干扰素（抗病毒）。下图1为重组质粒，图2为培育流程。
（1）构建重组质粒时，若人干扰素基因的序列是已知的，则可以通过_________获得该基因，然后再利用_________技术进行扩增。
（2）据图可知，人干扰素基因与_________基因可同时转录。人乳铁蛋白肽基因能在转基因奶牛的乳腺细胞中表达，人干扰素基因则可在全身细胞表达，这与构建重组质粒时_________的选择不同有关。
（3）通常利用_________（方法）将重组质粒导入③，在导入前需用_________将②进行分散处理培养。
（4）④过程涉及到的现代生物技术有_________、胚胎体外培养等。
（5）在培育转基因奶牛⑦时，下列有关叙述正确的是_________
A. 需从表达人干扰素基因的人体细胞中获取目的基因
B. 获得的重组胚胎需要进行性别鉴定才能进行⑤过程
C. 奶牛⑥为一般品种，需进行同期发情处理并未经配种
D. 通常利用DNA分子杂交技术检测转基因奶牛培育是否成功
-
卡那霉素和头孢霉素都有抗菌作用，此外，卡那霉素还对葡萄细胞有抑制作用。研究人员将Barnase基因（雄性不育基因）转入葡萄细胞，利用卡那霉素和头孢霉素，通过植物克隆方法成功培育出大粒、无核的葡萄新品种。请回答：
（1）构建含Barnase基因、β―葡糖苷酸酶基因和卡那霉素抗性基因的重组质粒，导入农杆菌，在固体培养基中培养形成_______以便鉴定是否混有杂菌，再用_______将农杆菌转移至LB____ 培养基中进行扩大培养。构建重组质粒需要用到的工具酶是_________、___________。
（2）将经过_______ 的幼嫩葡萄叶片切成小块，浸入农杆菌悬浮液中，4分钟后取出（此时已有较多农杆菌附着在叶片小块上）并接种到固体培养基中。培养至第3天时，可以看到在叶片小块周围出现________和大量菌落。这时再用头孢霉素处理叶片小块，其目的是_____
A．抑制葡萄细胞脱分化
B．促进葡萄细胞再分化
C．杀灭农杆菌
D．促进农杆菌生长
（3）将叶片小块放入卡那霉素培养基中培养一段时间后，转移至生芽培养基中，待其长出______ 后，再转移至生根培养基中继续培养形成试管苗。卡那霉素培养基起着______作用，植物克隆的技术基础_______。
（4）在卡那霉素培养基中，由于转化细胞对周围的非转化细胞有保护作用，获得的试管苗中可能存在假的转基因试管苗，因此还需对试管苗的_____基因的表达产物进行生化检测，才能鉴别出真正的转基因试管苗。
（5）最后，对转基因试管苗还需进行逐渐___________湿度的锻炼，使之适应自然环境。
-
卡那霉素和头孢霉素都有抗菌作用，此外，卡那霉素还对葡萄细胞有抑制作用。研究人员将Barnase基因（雄性不育基因）转入葡萄细胞，利用卡那霉素和头孢霉素，通过植物克隆方法成功培育出大粒、无核的葡萄新品种。请回答：
（1）构建含Barnase基因、β―葡糖苷酸酶基因和卡那霉素抗性基因的重组质粒，导入农杆菌，在固体培养基中培养形成 以便鉴定是否混有杂菌，再用 将农杆菌转移至LB 培养基中进行扩大培养。构建重组质粒需要用到的工具酶是 、 。
（2）将经过 的幼嫩葡萄叶片切成小块，浸入农杆菌悬浮液中，4分钟后取出（此时已有较多农杆菌附着在叶片小块上）并接种到固体培养基中。培养至第3天时，可以看到在叶片小块周围出现 和大量菌落。这时再用头孢霉素处理叶片小块，其目的是
| A．抑制葡萄细胞脱分化 | B．促进葡萄细胞再分化 | C．杀灭农杆菌 | D．促进农杆菌生长）。 |
（3）将叶片小块放入卡那霉素培养基中培养一段时间后，转移至生芽培养基中，待其长出 后，再转移至生根培养基中继续培养形成试管苗。卡那霉素培养基起着 作用，植物克隆的技术基础是 。
（4）在卡那霉素培养基中，由于转化细胞对周围的非转化细胞有保护作用，获得的试管苗中可能存在假的转基因试管苗，因此还需对试管苗的 基因的表达产物进行生化检测，才能鉴别出真正的转基因试管苗。
（5）最后，对转基因试管苗还需进行逐渐 湿度的锻炼，使之适应自然环境。
-
卡那霉素和头孢霉素都有抗菌作用，此外，卡那霉素还对葡萄细胞有抑制作用。研究人员将Barnase基因（雄性不育基因）转入葡萄细胞，利用卡那霉素和头孢霉素，通过植物克隆方法成功培育出大粒、无核的葡萄新品种。请回答：
（1）构建含Barnase基因、β―葡糖苷酸酶基因和卡那霉素抗性基因
的重组质粒，导入农杆菌，在固体培养基中培养形成 以便鉴定是否混有杂菌，再用 将农杆菌转移至LB 培养基中进行扩大培养。构建重组质粒需要用到的工具酶是 、 。
（2）将经过 的幼嫩葡萄叶片切成小块，浸入农杆菌悬浮液中，4分钟后取出（此时已有较多农杆菌附着在叶片小块上）并接种到固体培养基中。培养至第3天时，可以看到在叶片小块周围出现 和大量菌落。这时再用头孢霉素处理叶片小块，其目的是 （A．抑制葡萄细胞脱分化 B．促进葡萄细胞再分化 C．杀灭农杆菌 D．促进农杆菌生长）。
（3）将叶片小块放入卡那霉素培养基中培养一段时间后，转移至生芽培养基中，待其长出 后，再转移至生根培养基中继续培养形成试管苗。卡那霉素培养基起着 作用，植物克隆的技术基础是 。
（4）在卡那霉素培养基中，由于转化细胞对周围的非转化细胞有保护作用，获得的试管苗中可能存在假的转基因试管苗，因此还需对试管苗的 基因的表达产物进行生化检测，才能鉴别出真正的转基因试管苗。
（5）最后，对转基因试管苗还需进行逐渐 湿度的锻炼，使之适应自然环境。
-
菊天牛是菊花的最主要的害虫，科研人员将抗虫基因转入菊花培育出抗虫菊花，下图是获得转基因菊花的技术流程。请回答下列问题：
注:卡那酶素抗性基因（kanR)为标记基因，菊花叶片对卡那霉素高度敏感
(1)利用PCR技术扩增抗虫基因时，需用耐高温的___________催化，PCR—般要经历三十次以上的循环，每次循环包括_____________三步。
(2)常用Ca2+处理土壤农杆菌，其目的是______________。重组Ti质粒整合到菊花叶肉细胞的________上。
(3)将愈伤组织转移到添加一定浓度植物激素、营养物质以及_________的固体培养基中，在适宜条件下进行培养，筛选转基因菊花。检验转基因菊花的抗虫性状，常用的方法是______________。
(4)将转基因菊花嫩茎及叶片与人工饲料以适当比例混合后饲喂菊天牛2龄幼虫，实验组饲喂转基因植株，对照组应饲喂等量的正常植株。实验结果显示，实验组的害虫死亡率明显高于对照组，说明__________。
-
我国一科研团队将小麦液泡膜Na+/K+逆向转运蛋白基因（TaNHX2基因）转移到水稻细胞内，获得了转基因耐盐水稻新品种。回答下列有关问题：
（1）若目的基因在水稻细胞中能够表达，理论上构建的基因表达载体应包含下列_____________等结构（多选）。
A. 启动子 B. 终止密码子 C. 标记基因 D. 目的基因
（2）水稻的转化过程为：将水稻幼胚接种到诱导培养基上，经过_____________过程，培养出愈伤组织，然后用_____________法，将目的基因和相关功能片段整合到愈伤组织细胞的染色体DNA上，最后诱导愈伤组织形成水稻植株。
（3）为验证外源基因整合到水稻基因组后是否转录，可从转基因植株的细胞中提取_____________并反转录成cDNA，再以反转录产物为模板，利用TaNHX2基因特异引物，通过PCR方法进行基因扩增。
①若小麦液泡膜Na+/K+逆向转运蛋白基因含m个碱基对，则其表达产物的氨基酸数目至多为________个。
②利用PCR技术每循环一次，目的基因的量可以增加________倍。
（4）将生长至4叶期的转基因幼苗转入高浓度的NaCl溶液中培养，进行耐盐试验，用非转基因幼苗作为对照。培养30天后观察现象，若_________________________则说明转基因植株获得了耐盐特性。
-
乳铁蛋白是一种糖蛋白，其具有广谱抗菌、抗病毒感染的作用。科研人员将人乳铁蛋白基因通过载体转入山羊ES细胞，最终成功培育出能产生人乳铁蛋白的转基因山羊。回答下列问题：
（1）利用PCR技术从cDNA文库中获取乳铁蛋白基因（基因序列未知），需根据乳铁蛋白氨基酸序列设计引物，引物的序列可以有多种，原因是__________________。在PCR体系中需加入其中的_________（填“全部”、“任意1种”或“其中2种”）引物。
（2）山羊ES细胞可从囊胚的____________分离获得。从功能上看，该细胞具有____________。
（3）将人乳铁蛋白基因导入山羊ES细胞常用____________法。转化成功的ES细胞，体外培养过程中，通入CO2气体的目的是________________________。
（4）经鉴定，某转基因山羊产生的配子中有一半带有外源基因，请写出利用该山羊培育纯合转基因山羊的思路______________________________________________________。
-
铁元素是人体细胞生命活动不可缺少的微量元素。我们日常吃的大米中铁含量极低，科研人员通过基因工程等技术，培育出了铁含量比普通大米高60%的转基因水稻，改良了稻米的营养品质。下图为培育转基因水稻过程示意图，请分析回答：
（1）获取目的基因是实施基因工程的第一步。铁结合蛋白基因来自菜豆，且基因的脱氧核苷酸序列已知，可以用__________法获得此目的基因或用___________扩增目的基因。
（2）____________的构建是实施基因工程的第二步，也是基因工程的核心。
（3）构建重组Ti质粒时，通常要用___________分别切割_________________________。将重组Ti质粒转入农杆菌时，可以用__________处理农杆菌，使重组Ti质粒易于导入。
（4）将含有重组Ti质粒的农杆菌与水稻愈伤组织共同培养时，通过培养基2的筛选培养，可以获得_____；培养基3与培养基2的区别是________________。检测培育转基因水稻的目的是否达到，需要检测转基因水稻___________________。
-
大米中铁含量极低，科研人员通过基因工程等技术，培育出了铁含量比普通大米高60%的转基因水稻，改良了稻米的营养品质。下图14为培育转基因水稻过程示意图。
1.图中①表示基因工程中的步骤是_________，该步骤需要的工具酶有_________。
2.为了筛检成功导入重组质粒的农杆菌，1号培养基需要加入_______________。诱导组织细胞失去分化的培养基是________。
A．1号培养基 B．2号培养基 C．3号培养基 D．4号培养基
3.让农杆菌侵入愈伤组织而非水稻胚与幼苗。其主要原因有 。
A.胚与幼苗中导入重组质粒的细胞较难发育成完整转基因植株
B.愈伤组织细胞膜因为损伤较多而有利于接受重组质粒
C.3号培养基的作用主要是促进愈伤组织的细胞接受重组质粒
D.转基因水稻植株须由转基因细胞分裂与分化而形成
4.图中⑤至⑥的过程，属于_________________技术。
下图为质粒、含目的基因的DNA及其有关限制酶的作用位点。
5.为提高实验的效能，应采用限制酶_______处理Ti质粒和含目的基因的DNA。
的重组质粒，导入农杆菌，在固体培养基中培养形成