胶原蛋白广泛应用于医学、化妆品、化工原料等领域，科研人员开展利用家蚕生产人胶原蛋白的研究。...

胶原蛋白广泛应用于医学、化妆品、化工原料等领域，科研人员开展利用家蚕生产人胶原蛋白的研究。请回答下列问题：

（1）家蚕核型多角体病毒(BmNPV)专性寄生于鳞翅目昆虫，将人胶原蛋白基因与 ___重组后，构建 ___。体外克隆目的基因的方法是____。

（2）BmNPV的pl0基因是极强的启动子，将目的基因连接在pl0基因的下游，目的是____。目的基因与pl0基因连接时，断裂与连接的化学键都是____。

（3）重组BmNPV感染家蚕幼虫后，在幼虫淋巴液中提取蛋白质，用____的方法检测目的基因是否成功表达。相比于大肠杆菌，选择家蚕作为人胶原蛋白的生物反应器，其优点是 _______ 。

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目前现代生物技术迅速发展井被广泛应用于医疗卫生领域，如生物制药、器官移植、基因治疗等。请回答下列问题：

⑴研究发现，人体缺乏α-抗胰蛋白酶易患肺气肿，科研人员将α-抗胰蛋白酶基因与___________等调控组件重组构建基因表达载体，然后通过___________技术，导入羊的受精卵中，成功培育出了转基因羊，其乳汁中含有人类的α-抗胰蛋白酶，可用于治疗肺气肿。

⑵机体对移植的异体细胞、组织或器官会产生免疫排斥反应，通过对患者的ES细胞进行___________，培育出人遣组织器官，进而解决免疫摔斥问題。ES细胞主要来源于早期胚胎的___________细胞或原始性腺。

⑶P53基因是人体内的一种抑癌基因，将P53基因与腺病毒拼装而成的重组病毒导入人体可用于治疗肿瘤。拼装该重组病毒所需的工具酶有_________。用上述重组病毒治疗肿瘤，二次治疗时，该重组病毒常常无法或很少能进入靶细胞，从而影响治疗效果，原因是________。

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脂肪酶在洗涤剂、食品、造纸、油脂、化妆品、制药、生物柴油等多个工业领域中有广泛应用，人们应用生物技术可以对脂肪酶进行改造和生产。回答下列问题。

(1)科学家将脂肪酶位于蛋白质表面的一个异亮氨酸替换为苏氨酸，使脂肪酶的半衰期提高2倍，大大提高其稳定性，在改造过程中需要对_____________ (填“脂肪酶”、“脂肪酶mRNA”或“脂肪酶基因”)进行定向改造，和传统的基因工程相比，该技术的突出优点是_____________。

(2)制备酵母菌作为工程菌生产脂肪酶时，需构建基因表达载体，并使脂肪酶基因插入到基因表达载体的____________________之间，欲检测目的基因是否在受体细胞中转录，应采用的方法是____________ ，和大肠杆菌相比，利用酵母菌作为工程菌生产的脂肪酶一般可以直接投入使用，其原因是________________________________ 。

(3)脂肪酶还可以借助动物细胞的大规模培养来生产，培养动物细胞时所用的合成培养基，通常还需要加入一些_____________等天然成分，培养细胞时需要加入一定量的CO2，其作用是______________。

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白僵菌和绿僵菌是两种寄生在昆虫体内的真菌，现广泛应用于农林害虫的防治。科研人员利用基因工程术将绿僵菌的毒力蛋白相关基因M导入白僵菌细胞内，发现白僵菌杀虫能力大幅提高。请回答下列问题：
（1）利用PCR技术扩增M基因前，首先需获得绿僵菌的___________再根据___________序列设计2种特异性引物。科研人员还在2种引物上加入了不同的限制酶切位点，主要目的是便于目的基因与运载体连接及___________。在PCR反应体系中除了加入模板DNA，还需要添加__________（答出2点）。

（2）若要使M基因在受体细胞中稳定表达，需要___________，而不能将目的基因直接导入受体细胞。

（3）为检验M基因是否在白僵菌细胞内稳定存在，可提取连续培养3代的白僵菌基因组DNA，与__________进行分子杂交。若要检测M基因是否成功表达，需要提取白僵菌中的__________进行抗原抗体杂交。

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随着能源和环境问题日益严峻，利用纤维素酶降解秸秆生产燃料乙醇，对缓解全球能源危机有着重大意义。科研人员开展筛选、诱变及选育高产纤维素酶菌株的相关研究，过程如下图。请回答：

（1）从物理状态来看CMC平板属于__________培养基，培养基中应以___________为唯一碳源，常用的灭菌方法是___________。

（2）富集培养后的菌种常采用____________法接种于CMC平板，培养一段时间后，可根据___________初步鉴定并挑取产纤维素酶菌株XZ-33。

（3）诱变选育高产纤维素酶的菌株时，通过向培养基中加入刚果红染液筛选出____________与菌落直径比大的菌落（刚果红能与纤维素形成红色复合物，但不与纤维素水解产物结合）。

（4）如图是筛选获得菌株UV-Col6过程中60Co-γ辐照剂量与致死率和正突变率（符合生产需要的突变菌数占诱变后活菌数的比例）的关系。实验结果表明，用60Co-y射线诱变处理时合适的辐照剂量为__________KGy。从基因突变的特点分析，正突变率低的原因是_________、________________。

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酶己广泛应用在食品、化工、轻纺和医药等领域。

Ⅰ．有些微生物能合成纤维素酶，通过对这些微生物的研究，人们能够利用纤维素酶处理服装面料等。研究人员用化合物A、硝酸盐、磷酸盐以及微量元素配制的培养基，成功地筛选到能产生纤维素酶的微生物。分析回答问题。

（1）培养基中加入的化合物A是________，为微生物的生长提供____________，这种培养基属于________培养基。

（2）在筛选纤维素分解菌的过程中，通常用________染色法，这种方法能够通过颜色反应直接对纤维素分解菌进行筛选。甲同学在实验时得到了如图所示的结果，则纤维素分解菌位于　 ________内。

Ⅱ．在应用酶的过程中，采用固定化酶和固定化细胞技术，可解决酶很难回收再利用等实际问题。

（3）在进行酵母细胞固定化的过程中，称取干酵母，放入内有蒸馏水的小烧杯中搅拌至混合均匀，并放置1小时左右时间，其目的是________。　　　　　

（4）制作凝胶珠时，需用装有酵母细胞与海藻酸钠溶液混合物的注射器，以________的速度滴加到己配制好的___________溶液中。

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酶己广泛应用在食品、化工、轻纺和医药等领域。

Ⅰ．有些微生物能合成纤维素酶，通过对这些微生物的研究，人们能够利用纤维素酶处理服装面料等。研究人员用化合物A、硝酸盐、磷酸盐以及微量元素配制的培养基，成功地筛选到能产生纤维素酶的微生物。分析回答问题。

（1）培养基中加入的化合物A是________，为微生物的生长提供____________，这种培养基属于________培养基。

（2）在筛选纤维素分解菌的过程中，通常用________染色法，这种方法能够通过颜色反应直接对纤维素分解菌进行筛选。甲同学在实验时得到了如图所示的结果，则纤维素分解菌位于　 ________内。

Ⅱ．在应用酶的过程中，采用固定化酶和固定化细胞技术，可解决酶很难回收再利用等实际问题。

（3）在进行酵母细胞固定化的过程中，称取干酵母，放入内有蒸馏水的小烧杯中搅拌至混合均匀，并放置1小时左右时间，其目的是________。　　　　　

（4）制作凝胶珠时，需用装有酵母细胞与海藻酸钠溶液混合物的注射器，以________的速度滴加到己配制好的___________溶液中。

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果胶酶的应用领域非常广泛，它存在于各种微生物中。为获得土壤中果胶酶高产菌株，科研人员进行了下列分离、筛选、鉴定和酶的工业生产等工作。

（1）实验过程中，科研人员配制了下表所示成分的培养基，该表空白处的两种成分是:A______、B_______。用此配方进行选择培养，目的是__________________________ 。

（2）为在培养基表面形成单个菌落，以接种环为工具，则用______法进行接种。灼烧接种环之后，要等冷却才可继续操作，理由是：_____________。

（3）完善“探究果胶酶的最适用量”的实验方案：向分别盛有1.0、1.5、2.0……4.0mL2%果胶酶溶液的一组试管内同时加入5mL苹果泥，__________________________，适温水浴30分钟后，过滤每支试管的反应液，比较滤出的果汁体积或_____________________。

（4）当果胶酶与苹果泥混合在一起时，酶很难回收，不能再次利用，还可能影响了产品的质量。科研人员认为引进_______________技术，可解决生产中遇到的这些问题了。

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纳米银被广泛应用于纺织、电器等产品中，但其进入水体中会影响水生生物的生命活动。科研人员通过测定密闭容器中溶氧量的变化，研究不同浓度纳米银对小球藻光合作用的影响，结果如下图。

回答下列问题。

（1）单位时间内溶氧量的变化量可表示小球藻的________（填“净光合速率”或“实际光合速率”）。溶氧量增加的原因是________。

（2）根据实验结果能得出的结论是________。

（3）纳米银影响小球藻光合作用的原因可能是影响了有关酶的活性，还可能是________（答出1点即可）。

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油松是我国北方常见树种，高度可达30米，胸径可达1米，在建筑、造船、家具制造等领域有非常广泛的应用。为合理保护、开发林业资源，研究人员对某区域油松林进行了调查，结果如图。请据图分析回答下列问题：

（1）图1是研究人员调查的该地区阴坡与阳坡油松的____________图。据图推断，该地区油松的种群数量将会__________________（填“增加”或“减少”）。

（2）图2是研究人员绘制的油松死亡率曲线。据图分析，油松阴坡比阳坡整体死亡率________（填“高”或“低”），可能与阴坡、阳坡的____________条件差异大有关。

（3）图2中，阳坡油松以15年为周期呈现死亡率高峰，发生这种波动的原因是每当油松种群数量达到一定程度时，____________（填“种内”或“种间”）斗争加剧，引起植株大量死亡。这给我们合理利用油松带来什么启发？ _______________________________________________。

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