[生物技术实践]
杀虫脒，又名氯苯脒，是一种有机氮农药，具有高效广谱杀虫杀螨的作用，但长期使用容易导致土壤污染，为探究能降解杀虫脒的细菌进行了以下实验。
（1）微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、________、水、无机盐四类，该实验所用的选择培养基只能以杀虫脒作为唯一氮源，其原因是________________，从功能上讲，该培养基属于_______培养基。
（2）微生物接种的方法很多，最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，这两种方法在功能上的区别是_______________，此外，_____________也是测定微生物数量的常用方法。
（3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力________。
（4）通常情况下，在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌和________。培养基一般不使用干热灭菌的原因是____________________。
高三生物非选择题简单题
[生物技术实践]
杀虫脒，又名氯苯脒，是一种有机氮农药，具有高效广谱杀虫杀螨的作用，但长期使用容易导致土壤污染，为探究能降解杀虫脒的细菌进行了以下实验。
（1）微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、________、水、无机盐四类，该实验所用的选择培养基只能以杀虫脒作为唯一氮源，其原因是________________，从功能上讲，该培养基属于_______培养基。
（2）微生物接种的方法很多，最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，这两种方法在功能上的区别是_______________，此外，_____________也是测定微生物数量的常用方法。
（3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力________。
（4）通常情况下，在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌和________。培养基一般不使用干热灭菌的原因是____________________。
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杀虫脒，又名氯苯脒，是一种有机氮农药，具有高效广谱杀虫杀螨的作用，但长期使用容易导致土壤污染，为探究能降解杀虫脒的细菌进行了以下实验。
（1）微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、________、水、无机盐四类，该实验所用的培养基只能以杀虫脒作为唯一氮源，其原因是________________，从功能上讲，该培养基属于_______培养基。
（2）微生物接种的方法很多，最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，这两种方法在功能上的区别是稀释涂布平板法还能_______________，此外，_____________也是测定微生物数量的常用方法。
（3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力____。
（4）通常情况下，在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌和________。培养基一般不使用干热灭菌的原因是____________________。
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杀虫脒，又名氯苯脒，是一种有机氮农药，具有高效广谱杀虫杀螨的作用，但长期使用容易导致土壤污染，为探究能降解杀虫脒的细菌进行了以下实验。
（1）微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、________、水、无机盐四类，该实验所用的选择培养基只能以杀虫脒作为唯一氮源，其原因是________________，从功能上讲，该培养基属于_______培养基。
（2）微生物接种的方法很多，最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，这两种方法在功能上的区别是_______________，此外，_____________也是测定微生物数量的常用方法。
（3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力________。
（4）通常情况下，在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌和________。培养基一般不使用干热灭菌的原因是____________________。
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杀虫脒，又名氯苯脒，是一种有机氮农药，具有高效广谱杀虫杀螨的作用，但长期使用容易导致土壤污染，为探究能降解杀虫脒的细菌进行了以下实验。
(1)微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、_____________、水、无机盐四类，该实验所用的培养基只能以杀虫脒作为唯一氮源，其原因是_____________________，从功能上讲，该培养基属于_______________培养基。
(2)微生物接种的方法很多，最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，这两种方法在功能上的区别是________________，此外，__________________也是测定微生物数量的常用方法。
(3)为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力__________________。
(4)通常情况下，在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌和_________。培养基一般不使用干热灭菌的原因是______________________。
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【广东省中山市2017届高三5月模拟生物试题】【生物-选修1：生物技术实践】毒死蜱(C9H11C13NO3PS)是一种有机磷杀虫剂，长期使用将导致土壤中农药残留严重。某研究小组从长期施药的韭菜温室土壤（偏酸性）里分离出能降解毒死蜱的木霉，并对其降解特性进行初步研究。请回答：
（1）用于分离木霉菌种的培养基属于__________________培养基。配制此培养基时，应加入____________作为唯一碳源。接种前，将培养基在适宜温度下放置适当的时间，观察培养基__________________，以确定培养基是否被污染。
（2）纯化木霉时，统计出0.2 mL的稀释液在稀释倍数为105的平板上的平均菌落数为40个，则每mL样液中的菌落数为__________个。用此法测定木霉数量，实际活菌数量要比统计的菌落数量______，原因是________________________________________________。
（3）探究pH对木霉降解毒死蜱活性的影响
①研究小组向不同pH的培养基中分别加入100 mg/L 毒死蜱，5天后检测毒死蜱的残留量（图1）。由图可推知：在偏酸性的土壤中，__________________________。
②研究小组向不同pH的培养基中分别加入100 mg/L 毒死蜱，再分别接种1 mL木霉悬液，混合均匀，5天后检测毒死蜱的残留量（图2）。在此韭菜温室土壤中，若要提高木霉对毒死蜱的降解活性，可对土壤作何处理？_____________________________。
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【生物-选修1：生物技术实践】毒死蜱(C9H11C13NO3PS)是一种有机磷杀虫剂，长期使用将导致土壤中农药残留严重。某研究小组从长期施药的韭菜温室土壤（偏酸性）里分离出能降解毒死蜱的木霉，并对其降解特性进行初步研究。请回答：
（1）用于分离木霉菌种的培养基属于__________________培养基。配制此培养基时，应加入____________作为唯一碳源。接种前，将培养基在适宜温度下放置适当的时间，观察培养基__________________，以确定培养基是否被污染。
（2）纯化木霉时，统计出0.2 mL的稀释液在稀释倍数为105的平板上的平均菌落数为40个，则每mL样液中的菌落数为__________个。用此法测定木霉数量，实际活菌数量要比统计的菌落数量______，原因是________________________________________________。
（3）探究pH对木霉降解毒死蜱活性的影响
①研究小组向不同pH的培养基中分别加入100 mg/L 毒死蜱，5天后检测毒死蜱的残留量（图1）。由图可推知：在偏酸性的土壤中，__________________________。
②研究小组向不同pH的培养基中分别加入100 mg/L 毒死蜱，再分别接种1 mL木霉悬液，混合均匀，5天后检测毒死蜱的残留量（图2）。在此韭菜温室土壤中，若要提高木霉对毒死蜱的降解活性，可对土壤作何处理？_____________________________。
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（15分）有机磷农药杀虫能力强，在粮食增产、传染病防治等方面作用显著，但污染环境并危害人体健康。在众多的有机磷农药残留物降解技术中，生物降解有高效、彻底、无二次污染的优势，其中，微生物由于具有较复杂多样的代谢途径，是有机磷农药降解的主力军。
⑴在富含有机磷农药残留成分的土壤中，更容易分离到能降解农药的微生物。根据达尔文的理论，这是因为有机磷农药对于此类微生物具有 作用。
⑵微生物具有复杂多样的代谢途径，从根本上说，是由微生物的 所决定的。
⑶微生物主要通过酶促反应，将有机磷农药分解为无毒或者低毒的化合物。研究发现，利用有机磷农药降解酶净化农药比利用微生物菌体更有效。
①微生物群体中，最初的降解酶基因是由于 而产生的。从微生物中提取到一种降解酶后，需要确定在何种环境中该酶的活性高，检测酶活性高低的指标可以是 。
②从天然菌株中提取降解酶的含量低，成本高，难以大量应用，科学家通过基因工程解决了这一难题。他们在获得降解酶基因后，通过 技术对该基因进行大量扩增，再利用 酶、 酶和运载体等作为基本工具，通过一定的手段构建目的基因表达载体，并将其导入大肠杆菌体内，从而实现了高效表达。
③天然的降解酶对有机磷农药的降解率比较低，不能达到预期效果，科学家对降解酶特定部位的氨基酸序列进行重新设计、改造，显著提高了其降解能力，这项工程技术称为 。
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有机磷农药杀虫能力强，在粮食增产、传染病防治等方面作用显著，但污染环境并危害人体健康。在众多的有机磷农药残留物降解技术中，生物降解有高效、彻底、无二次污染的优势，其中，微生物由于具有较复杂多样的代谢途径，是有机磷农药降解的主力军。
（1）在富含有机磷农药残留成分的土壤中，更容易分离到能降解农药的微生物。根据达尔文的理论，这是因为有机磷农药对于此类微生物具有________作用。
（2）微生物具有复杂多样的代谢途径，从根本上说，是由微生物的________所决定的。
（3）微生物主要通过酶促反应，将有机磷农药分解为无毒或者低毒的化合物。研究发现，利用有机磷农药降解酶净化农药比利用微生物菌体更有效。
①微生物群体中，最初的降解酶基因是由于________而产生的。从微生物中提取到一种降解酶后，需要确定在何种环境中该酶的活性高，检测酶活性高低的指标可以是
________。
②从天然菌株中提取降解酶的含量低，成本高，难以大量应用，科学家通过基因工程解决了这一难题。他们在获得降解酶基因后，通过________技术对该基因进行大量扩增，再利用________酶、________酶和运载体等作为基本工具，通过一定的手段构建________，并将其导入大肠杆菌体内，从而实现了高效表达。
③天然的降解酶对有机磷农药的降解率比较低，不能达到预期效果，科学家对降解酶特定部位的氨基酸序列进行重新设计、改造，显著提高了其降解能力，这项技术称为________。
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有机磷化合物在农业生产中作为杀虫剂被广泛使用，长期以来因使用其量大、范围广，容易造成水体污染等诸多环境问题。
(1)为了筛选甲胺磷的降解细菌，将农药厂的甲胺磷污染土壤悬液涂布在______________________的固体培养基上进行培养，可以对降解菌进行定向的________。
(2)在分离得到的菌株A中检测到的ophc2蛋白，可以催化甲胺磷的降解，这种蛋白质是在细胞的________上合成的。若要定量分析ophc2蛋白的催化能力，应测定单位时间内______________。
(3)为了测定菌株A的降解效率，应配置0 mg/L、10 mg/L、30 mg/L、50 mg/L、70 mg/L的甲胺磷溶液，测定不同浓度甲胺磷溶液的吸光值，画出标准曲线，得到吸光值与甲胺磷浓度的关系：y＝0.02x－0.01，如图7－15－6所示。
图7－15－6
将含有100 mg/L甲胺磷的菌株A培养液分别在不同温度下培养5天后，测定吸光值，结果如下表所示，已知降解率＝(初始甲胺磷浓度－降解后甲胺磷浓度)/初始甲胺磷浓度，则取得的最大降解率为________(忽略细菌对吸光值的影响和培养液体积变化)，若甲胺磷自身化学分解，则计算的降解率数值会________(填“偏大”“不变”或“偏小”)。
| 温度/℃ | 15 | 20 | 25 | 30 | 35 | 40 |
| 吸光值(菌株A) | 1.71 | 1.53 | 1.15 | 0.49 | 1.32 | 1.89 |
(4)继续分析细菌的16S rDNA可以鉴定种类，提取得到菌株A的DNA后，通过____________扩增得到大量的16S rDNA，进而对细菌分类。
(5)导入ophc2基因的烟草可获得降解有机磷的能力，烟草花粉的遗传物质存在于细胞核和线粒体中，为了避免转基因烟草的花粉对野生型烟草造成基因污染，可将ophc2基因导入烟草细胞的________中。
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毒死蜱（C9H11C13NO3PS）是一种有机磷杀虫剂，长期使用将导致土壤中农药残留严重。某研究小组从长期施药的韭菜温室土壤（偏酸性）里分离出能降解毒死蜱的木霉，并对其降解特性进行初步研究。请回答：
（1）用于分离木霉菌种的培养基属于___培养基。配制此培养基时，应加入___作为唯一碳源。
（2）制备培养基的操作顺序是_____________________（用下列字母和箭头排序）
a．倒平板 b．计算 c．熔化 d．称量 e．灭菌
（3）接种前，将培养基在适宜温度下放置适当的时间，观察培养基______，以确定培养基是否被污染。
（4）为了统计木霉活菌的数目，应采用的方法是________，首先需将水样进行适当稀释，例如取水样 1 mL加入无菌水99mL 制备稀释倍数为102的稀释液，并照此依次制备更高倍数的稀释液。整个过程中，都要在________操作。
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