在遗传病及刑侦破案中常需要对样品DNA进行分析,PCR技术能快速扩增DNA片段,在几个小时内复制出上百万份的DNA拷贝,有效地解决了因为样品中DNA含量太低而难以对样品进行分析研究的问题。据图回答相关问题。
a链5′—G—G……T—C—3′ 5′—G—G—OH(引物Ⅰ)
b链3′—C—C……A—G—5′ (引物Ⅱ)
95 ℃↓
5′—G—G……T—C—3′ 3′—C—C……A—G—5′
55 ℃↓
5′—G—G—OH
5′—G—G……T—C—3′ 3′—C—C……A—G—5′
72 ℃↓
(1)在相应的横线上写出引物Ⅱ,并在复性这一步骤中将引物Ⅱ置于合适的位置。__________________
(2)在相应的横线上写出循环一次后生成的DNA分子。________
(3)若将作为原料的四种脱氧核苷酸用32P标记,请分析循环一次后生成的DNA分子的特点:________,循环n次后生成的DNA分子中不含放射性的单链占总单链的比例为________。
(4)PCR反应过程的前提条件是________,PCR技术利用了DNA的________原理解决了这个问题。
(5)在对样品DNA分析过程中发现,DNA掺杂着一些组蛋白,要去除这些组蛋白可加入的物质是________。
高三生物综合题困难题
在遗传病及刑侦破案中常需要对样品DNA进行分析,PCR技术能快速扩增DNA片段,在几个小时内复制出上百万份的DNA拷贝,有效地解决了因为样品中DNA含量太低而难以对样品进行分析研究的问题。据图回答相关问题。
a链5′—G—G……T—C—3′ 5′—G—G—OH(引物Ⅰ)
b链3′—C—C……A—G—5′ (引物Ⅱ)
95 ℃↓
5′—G—G……T—C—3′ 3′—C—C……A—G—5′
55 ℃↓
5′—G—G—OH
5′—G—G……T—C—3′ 3′—C—C……A—G—5′
72 ℃↓
(1)在相应的横线上写出引物Ⅱ,并在复性这一步骤中将引物Ⅱ置于合适的位置。__________________
(2)在相应的横线上写出循环一次后生成的DNA分子。________
(3)若将作为原料的四种脱氧核苷酸用32P标记,请分析循环一次后生成的DNA分子的特点:________,循环n次后生成的DNA分子中不含放射性的单链占总单链的比例为________。
(4)PCR反应过程的前提条件是________,PCR技术利用了DNA的________原理解决了这个问题。
(5)在对样品DNA分析过程中发现,DNA掺杂着一些组蛋白,要去除这些组蛋白可加入的物质是________。
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在遗传病监测及刑侦破案中常需要对样品DNA进行分析,PCR技术能快速扩增DNA片段,在几个小时内复制上百万份的DNA拷贝,有效地解决了因为样品中DNA含量太低而难以对样品进行分析研究的问题。据图回答相关问题:
(1) 在PCR中先用95 ℃高温处理的目的是________;而这一过程中在细胞内DNA复制时是通过________实现的。
(2) 在PCR技术中所需要的引物实质上是一种________,在相应的横线上写出引物Ⅱ________。
(3) 在相应的横线上写出循环一次后生成的DNA:________(写出①、②中的一种即可)。
(4) 若将1个DNA分子拷贝10次,则需要在缓冲液中至少加入________个引物。
(5) 在对样品DNA进行分析的过程中发现,DNA掺杂着一些组蛋白,要去除这些组蛋白可加入的物质是________。
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在遗传病监测及刑侦破案中常需要对样品DNA进行分析,PCR技术能快速扩增DNA片段,在几个小时内复制上百万份的DNA拷贝,有效地解决了因为样品中DNA含量太低而难以对样品进行分析研究的问题。据图回答相关问题:
(1) 在PCR中先用95 ℃高温处理的目的是________;而这一过程中在细胞内DNA复制时是通过________实现的。
(2) 在PCR技术中所需要的引物实质上是一种________,在相应的横线上写出引物Ⅱ________。
(3) 在相应的横线上写出循环一次后生成的DNA:________(写出①、②中的一种即可)。
(4) 若将1个DNA分子拷贝10次,则需要在缓冲液中至少加入________个引物。
(5) 在对样品DNA进行分析的过程中发现,DNA掺杂着一些组蛋白,要去除这些组蛋白可加入的物质是________。
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多聚酶链式反应(PCR)是一种体外扩增DNA片段的技术。可用于遗传疾病的诊断、刑侦破案、古生物学、基因克隆和DNA序列测定等方面。回答以下问题:
(1)细胞内DNA复制过程中,引物的作用是 ,而且DNA复制的前提是 。
(2)PCR利用了 原理,可通过控制温度来控制双链的解旋与结合。
(3)PCR技术用到的酶是 ,与细胞内DNA复制时发挥相同作用的酶相比区别在于 。
(4)下面表格是DNA体内复制与PCR反应的部分比较结果。通过比较分析,请推导出PCR反应合成DNA子链时能量来源于 。
原料 | ATP | |
DNA体内复制 | 四种脱氧核苷酸 | 需要 |
PCR反应 | 脱氧胞苷三磷酸、脱氧腺苷三磷酸 脱氧胸苷三磷酸、脱氧鸟苷三磷酸 | 不需要 |
(5)假如PCR反应所用的引物含有放射性、模板不具有放射性,且引物不被切除,则经过n次循环,具有放射性的脱氧核苷酸链占总链数的比值为 。
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现有一滴血液样品中约含有6,000 个某特定DNA 片段的拷贝,以聚合酶链式反应(PCR)
进行扩增。经过20 个循环反应后,可得此DNA 分子拷贝为
A.6,000×202 B.6,000×2×20
C.6,000×220 D.6,00020
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现有一滴血液样品中约含有6,000 个某特定DNA 片段的拷贝,以聚合酶链式反应(PCR)进行扩增。经过20 个循环反应后,可得此DNA 分子拷贝为
A.6,000×202 B.6,000×2×20
C.6,000×220 D.6,00020
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利用PCR技术扩增目的基因是目的基因获取的常用方法之一。现有目的基因“X基因”,它是DNA分子上一个有遗传效应的片段,若要用PCR技术特异性地拷贝“X基因”,需在PCR反应中加入两种引物,两种引物及其与模板链的结合位置如图1所示。经4轮循环后产物中有五种不同的DNA分子,如图2所示。
(1)获取目的基因是实施基因工程的第一步,基因工程的核心步骤是________,基因工程的原理是________。目的基因的获取除利用PCR技术扩增外,还可以从基因文库中获取。基因文库包含____和____等类型,前者的基因中含有启动子。。
(2)PCR的原理是____。PCR扩增的过程一般是:95℃下使模板DNA变性、解链→55℃下复性(引物与DNA模板链结合)→72℃下引物链延伸(形成新的脱氧核苷酸链)。变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的____,该过程在细胞内也可利用____酶实现。复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠________完成。在采用常规PCR方法扩增目的基因的过程中,使用的DNA聚合酶不同于一般生物体内的DNA聚合酶,其最主要的特点是
________。
(3)至少需要循环一~轮,图2所示的五种不同的DNA分子在产物中才都会出现。经4轮循环后,图中④、⑤所示的DNA分子数分别占DNA分子总数的比例为________和________。
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(8分)PCR技术是把- DNA片段在体外酶的作用下,合成许许多多相同片段的一种方法,利用它能快速而特异地扩增任何要求的目的基因或DNA分子片段,它的基本过程如下图所示:
图中一表示每次扩增过程中需要的引物(加入足够多)。每个引物含20个脱氧核苷酸,并分别与DNA片段两端碱基互补,其作用是引导合成DNA子链,还作为子链的一部分,不会从模板链上脱落下来。
(1)PCR技术的原理是模拟生物体内的________过程。
(2)PCR扩增过程中需要对DNA片段进行高温处理,其目的是________,此过程在生物体内需酶的参与,作用部位是DNA的________键。
(3)若引物都用3H标记,从理论上计算,所得DNA分子中含有。H标记的占________。
(4)假定DNA片段含200对碱基,进行3次扩增,从理论上计算需要提供________个游离脱氧核苷酸。
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(10分)PCR技术是把一DNA片段在体外酶的作用下,合成许许多多相同片段的一种方法,利用它能快速而特异地扩增任何要求的目的基因或DNA分子片段,它的基本过程如下图所示
图中 表示每次扩增过程中需要的引物(加入足够多)。每个引物含20个核苷酸,并分别与DNA片段两端碱基互补,其作用是引导合成DNA子链,还作为子链的一部分,不会从模板链上脱落下来,
(1)PCR技术的原理是模拟生物体内的________过程。
(2)PCR扩增过程中需要对DNA片段进行高温处理,其目的是________,此过程在生物体内需________酶的参与,作用部位是DNA的________键。
(3)据图分析,扩增过程中需要的引物有________种,其实质是,假如引物都用3H标记,从理论上计算,所得DNA分子中含有3H标记的占________。
(4)假定DNA片段含200对脱氧核苷酸,经3次扩增,从理论上计算还需要提供________个游离脱氧核苷酸。
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【选修1---生物技术与实践】多聚酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术,该技术的原理是利用DNA的半保留复制,在试管中进行DNA的人工复制(如图,图中黑色长方形是引物)。在很短的时间内将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍,使实验室所需的遗传物质不再受限于活的生物体。
(1)DNA的两条链是反向平行的,当引物与DNA母链通过碱基互补配对结合后,DNA聚合酶就能从引物的________(填“3′”或“5′”)端开始延伸DNA链。
(2)PCR利用了DNA的热变性原理解决了打开DNA双链的问题,但又导致了DNA聚合酶失活的新问题。到20世纪80年代,科学家从一种Taq细菌中分离到________的DNA聚合酶,它的发现和应用解决了上述问题。要将Taq细菌从其他普通的微生物中分离出来,可在________条件下培养进行初步筛选,若要进一步纯化Taq细菌,可用_______________的接种方法。
(3)“PCR”与人体内的DNA复制相比有何特殊之处?(至少答出两点)
(4)若进行3次循环,共需加入引物_____种____个。
(5)某样品DNA分子中共含3000个碱基对,碱基数量满足:,若经5次循环,至少需要向试管中加入____个腺嘌呤脱氧核苷酸。(不考虑引物所对应的片段)
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