现有一滴血液样品中约含有6,000 个某特定DNA 片段的拷贝,以聚合酶链式反应(PCR)
进行扩增。经过20 个循环反应后,可得此DNA 分子拷贝为
A.6,000×202 B.6,000×2×20
C.6,000×220 D.6,00020
高三生物选择题中等难度题
现有一滴血液样品中约含有6,000 个某特定DNA 片段的拷贝,以聚合酶链式反应(PCR)
进行扩增。经过20 个循环反应后,可得此DNA 分子拷贝为
A.6,000×202 B.6,000×2×20
C.6,000×220 D.6,00020
高三生物选择题中等难度题查看答案及解析
现有一滴血液样品中约含有6,000 个某特定DNA 片段的拷贝,以聚合酶链式反应(PCR)进行扩增。经过20 个循环反应后,可得此DNA 分子拷贝为
A.6,000×202 B.6,000×2×20
C.6,000×220 D.6,00020
高三生物选择题中等难度题查看答案及解析
qRT-PCR又称实时荧光定量PCR,是一种在DNA扩增反应中,以荧光化学物质测定每次聚合酶链式反应(PCR)循环后产物的总量,间接对待测样品中特定DNA序列进行定量分析的方法。qRT-PCR实验步骤:反转录→扩增→检测。qRT-PCR目前主要应用于基因表达水平的检测。请回答下列有关问题:
(1)反转录:在___________酶的作用下,mRNA反转录形成cDNA分子;cDNA与原基因相比,在结构上的不同点有_________________________________。
(2)扩增:用PCR扩增cDNA,首先要制备___________种引物,以便为___________酶提供结合位点,并从引物的___________(填“5′”或“3′”)端开始拼接单个的脱氧核苷酸。
(3)检测:利用荧光标记的化学物质是____________________,随着PCR反应的进行荧光信号强度也等比例增加。
(4)qRT-PCR对基因表达的检测仅限于___________水平,而对于翻译水平的检测常用的方法是___________。
高三生物综合题中等难度题查看答案及解析
利用PCR技术扩增目的基因是目的基因获取的常用方法之一。现有目的基因“X基因”,它是DNA分子上一个有遗传效应的片段,若要用PCR技术特异性地拷贝“X基因”,需在PCR反应中加入两种引物,两种引物及其与模板链的结合位置如图1所示。经4轮循环后产物中有五种不同的DNA分子,如图2所示。
(1)获取目的基因是实施基因工程的第一步,基因工程的核心步骤是________,基因工程的原理是________。目的基因的获取除利用PCR技术扩增外,还可以从基因文库中获取。基因文库包含____和____等类型,前者的基因中含有启动子。。
(2)PCR的原理是____。PCR扩增的过程一般是:95℃下使模板DNA变性、解链→55℃下复性(引物与DNA模板链结合)→72℃下引物链延伸(形成新的脱氧核苷酸链)。变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的____,该过程在细胞内也可利用____酶实现。复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠________完成。在采用常规PCR方法扩增目的基因的过程中,使用的DNA聚合酶不同于一般生物体内的DNA聚合酶,其最主要的特点是
________。
(3)至少需要循环一~轮,图2所示的五种不同的DNA分子在产物中才都会出现。经4轮循环后,图中④、⑤所示的DNA分子数分别占DNA分子总数的比例为________和________。
高三生物综合题中等难度题查看答案及解析
聚合酶链式反应(PCR技术)是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法,由高温变性、低温复性及适温延伸等几步反应组成一个周期,循环进行,使目的DNA得以迅速扩增。下列关于PCR技术叙述不正确的是
A.PCR技术是在实验室中以少量DNA制备大量DNA的技术
B.反应中新合成的DNA又可以作为下一轮反应的模板
C.PCR技术中酶和引物只须加入一次,可以重复利用
D.应用PCR技术与探针杂交技术可以检测基因突变
高三生物选择题中等难度题查看答案及解析
在遗传病及刑侦破案中常需要对样品DNA进行分析,PCR技术能快速扩增DNA片段,在几个小时内复制出上百万份的DNA拷贝,有效地解决了因为样品中DNA含量太低而难以对样品进行分析研究的问题。据图回答相关问题。
a链5′—G—G……T—C—3′ 5′—G—G—OH(引物Ⅰ)
b链3′—C—C……A—G—5′ (引物Ⅱ)
95 ℃↓
5′—G—G……T—C—3′ 3′—C—C……A—G—5′
55 ℃↓
5′—G—G—OH
5′—G—G……T—C—3′ 3′—C—C……A—G—5′
72 ℃↓
(1)在相应的横线上写出引物Ⅱ,并在复性这一步骤中将引物Ⅱ置于合适的位置。__________________
(2)在相应的横线上写出循环一次后生成的DNA分子。________
(3)若将作为原料的四种脱氧核苷酸用32P标记,请分析循环一次后生成的DNA分子的特点:________,循环n次后生成的DNA分子中不含放射性的单链占总单链的比例为________。
(4)PCR反应过程的前提条件是________,PCR技术利用了DNA的________原理解决了这个问题。
(5)在对样品DNA分析过程中发现,DNA掺杂着一些组蛋白,要去除这些组蛋白可加入的物质是________。
高三生物综合题困难题查看答案及解析
在遗传病监测及刑侦破案中常需要对样品DNA进行分析,PCR技术能快速扩增DNA片段,在几个小时内复制上百万份的DNA拷贝,有效地解决了因为样品中DNA含量太低而难以对样品进行分析研究的问题。据图回答相关问题:
(1) 在PCR中先用95 ℃高温处理的目的是________;而这一过程中在细胞内DNA复制时是通过________实现的。
(2) 在PCR技术中所需要的引物实质上是一种________,在相应的横线上写出引物Ⅱ________。
(3) 在相应的横线上写出循环一次后生成的DNA:________(写出①、②中的一种即可)。
(4) 若将1个DNA分子拷贝10次,则需要在缓冲液中至少加入________个引物。
(5) 在对样品DNA进行分析的过程中发现,DNA掺杂着一些组蛋白,要去除这些组蛋白可加入的物质是________。
高三生物非选择题困难题查看答案及解析
在遗传病监测及刑侦破案中常需要对样品DNA进行分析,PCR技术能快速扩增DNA片段,在几个小时内复制上百万份的DNA拷贝,有效地解决了因为样品中DNA含量太低而难以对样品进行分析研究的问题。据图回答相关问题:
(1) 在PCR中先用95 ℃高温处理的目的是________;而这一过程中在细胞内DNA复制时是通过________实现的。
(2) 在PCR技术中所需要的引物实质上是一种________,在相应的横线上写出引物Ⅱ________。
(3) 在相应的横线上写出循环一次后生成的DNA:________(写出①、②中的一种即可)。
(4) 若将1个DNA分子拷贝10次,则需要在缓冲液中至少加入________个引物。
(5) 在对样品DNA进行分析的过程中发现,DNA掺杂着一些组蛋白,要去除这些组蛋白可加入的物质是________。
高三生物非选择题困难题查看答案及解析
聚合酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。PCR过程一般经历下述30多次循环:95℃下使模板DNA变性、解链→55 ℃下复性(引物与DNA模板链结合)→72 ℃下引物链延伸(形成新的脱氧核苷酸链)。下列有关PCR过程的叙述中不正确的是
A.95℃高温破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键
B.复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成
C.延伸过程中需要热稳定DNA聚合酶和四种dNTP
D.引物为一小段RNA
高三生物选择题中等难度题查看答案及解析
假设某逆转录RNA病毒它决定某性状的一段RNA共含有碱基100个,其中A占19%、C占26%、G占32%。如果这个RNA片断首先通过逆转录形成了双链DNA片段,再以聚合酶链式反应(PCR)进行扩增3个循环反应。则整个过程中需要游离的腺嘌呤脱氧核苷酸多少个?
A.336 B.294 C.275 D.161
高三生物选择题中等难度题查看答案及解析