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qRT-PCR又称实时荧光定量PCR，是一种在DNA扩增反应中，以荧光化学物质测定每次聚合酶链式反应（PCR）循环后产物的总量，间接对待测样品中特定DNA序列进行定量分析的方法。qRT-PCR实验步骤：反转录→扩增→检测。qRT-PCR目前主要应用于基因表达水平的检测。请回答下列有关问题：
（1）反转录：在___________酶的作用下，mRNA反转录形成cDNA分子；cDNA与原基因相比，在结构上的不同点有_________________________________。
（2）扩增：用PCR扩增cDNA，首先要制备___________种引物，以便为___________酶提供结合位点，并从引物的___________（填“5′”或“3′”）端开始拼接单个的脱氧核苷酸。
（3）检测：利用荧光标记的化学物质是____________________，随着PCR反应的进行荧光信号强度也等比例增加。
（4）qRT-PCR对基因表达的检测仅限于___________水平，而对于翻译水平的检测常用的方法是___________。
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目前广泛应用的新型冠状病毒检测方法是实时荧光RT-PCR技术。RT—PCR是将RNA逆转录（RT）和cDNA的聚合酶链式扩增反应相结合的技术，具体过程如图所示，下列说法不正确的是（ ）
A.引物A与引物B应该具有不同的碱基序列
B.过程Ⅱ通过控制温度的变化实现目标序列的循环扩增
C.该反应体系中应加入缓冲液、引物、四种核糖核苷酸、逆转录酶、Taq酶等物质
D.该检测方法的应用依赖于新型冠状病毒特异性序列的确定
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PCR技术又称聚合酶链式反应，现在已成为分子生物学实验室的一种常规手段，它可以在体外很短的时间内将DNA大量扩增。你认为下列符合在体外进行PCR反应条件的一组是（ ）
① 稳定的缓冲液环境 ② DNA模板 ③ 合成引物 ④ 四种脱氧核苷酸
⑤ DNA聚合酶 ⑥ DNA解旋酶 ⑦ 限制性核酸内切酶 ⑧ 温控设备
A．①②③④⑤⑥ B．①②③④⑤⑥⑦⑧
C．③④⑤⑥⑧ D．①②③④⑤⑧
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聚合酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。PCR过程一般经历下述30多次循环：95℃下使模板DNA变性、解链→55 ℃下复性(引物与DNA模板链结合)→72 ℃下引物链延伸(形成新的脱氧核苷酸链)。下列有关PCR过程的叙述中不正确的是
A．95℃高温破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键
B．复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成
C．延伸过程中需要热稳定DNA聚合酶和四种dNTP
D．引物为一小段RNA
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聚合酶链式反应(PCR技术)是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法，由高温变性、低温复性及适温延伸等几步反应组成一个周期，循环进行，使目的DNA得以迅速扩增。下列关于PCR技术叙述不正确的是
A．PCR技术是在实验室中以少量DNA制备大量DNA的技术
B．反应中新合成的DNA又可以作为下一轮反应的模板
C．PCR技术中酶和引物只须加入一次，可以重复利用
D．应用PCR技术与探针杂交技术可以检测基因突变
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现有一滴血液样品中约含有6,000 个某特定DNA 片段的拷贝，以聚合酶链式反应（PCR）
进行扩增。经过20 个循环反应后，可得此DNA 分子拷贝为
A．6,000×202 B．6,000×2×20
C．6,000×220 D．6,00020
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现有一滴血液样品中约含有6,000 个某特定DNA 片段的拷贝，以聚合酶链式反应（PCR）进行扩增。经过20 个循环反应后，可得此DNA 分子拷贝为
A．6,000×202 B．6,000×2×20
C．6,000×220 D．6,00020
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利用PCR技术将某小段DNA分子扩增n代，需
A．测定DNA分子两端的核苷酸序列，以便设计引物对
B．2n－1对引物参与子代DNA分子的合成
C．向反应体系中加入解旋酶、DNA聚合酶等
D．保持反应体系温度恒定，确保扩增的正常进行
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有关PCR技术的下列叙述，不正确的是
A. 聚合酶链式反应，是用DNA聚合酶在体外扩增DNA片段的技术
B. 在用PCR技术扩增DNA时，DNA的复制过程与细胞内DNA的复制类似
C. PCR反应需在一定的缓冲溶液中进行，只需提供DNA模板以及四种脱氧核苷酸即可
D. PCR一般经历三十多次循环，每次循环均分为变性、复性和延伸三个阶段
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PCR（Polymerase Chain Reaction）即聚合酶链式反应，是一项DNA体外合成放大技术，能快速特异地在体外扩增任何目的DNA。回答下列有关该技术的知识：
（1）下图为PCR原理示意图，据图回答问题。
基因工程中，利用PCR技术来__________，PCR技术依据的原理是DNA的半保留复制，生物体内也能完成DNA的复制，但有所不同，图中A过程称为__________，在生物体内需要__________才能完成。图中B和C过程的完成需要__________等条件。
（2）现有目的基因“X基因”，它是DNA分子上一个有遗传效应的片段，若要用PCR技术特异性地拷贝“X基因”，需在PCR反应中加入两种引物，两种引物及其与模板链的结合位置如图1所示。经4轮循环后产物中有五种不同的DNA分子，如图2所示。
至少需要循环__________轮，图2所示的五种不同的DNA分子在产物中才都会出现。经4轮循环后，图中④所示的DNA分子数分别占DNA分子总数的比例为__________，从理论上推测，第四轮循环产物中不含有引物1的DNA片段所占的比例为__________。
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