-
PCR技术又称聚合酶链式反应，现在已成为分子生物学实验室的一种常规手段，它可以在体外很短的时间内将DNA大量扩增。你认为下列符合在体外进行PCR反应条件的一组是（ ）
① 稳定的缓冲液环境 ② DNA模板 ③ 合成引物 ④ 四种脱氧核苷酸
⑤ DNA聚合酶 ⑥ DNA解旋酶 ⑦ 限制性核酸内切酶 ⑧ 温控设备
A．①②③④⑤⑥ B．①②③④⑤⑥⑦⑧
C．③④⑤⑥⑧ D．①②③④⑤⑧
高三生物选择题中等难度题查看答案及解析
-
(14分)近十年来，PCR技术(聚合酶链式反应)成为分子生物学实验室里的一种常规手段，其原理是利用DNA半保留复制，在试管中进行DNA的人工复制(如图)，在很短的时间内，将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍，使实验室所需要的遗传物质不再受限于活的生物体。
(1)加热使DNA双链打开，这一步是打开________键，称为________。
(2)当温度降低时，引物与模板________端结合，在DNA聚合酶的作用下，引物沿模板延伸，此过程中原料是________，遵循的原则是________。
(3)PCR技术的必要条件，除了模板、原料、ATP、酶以外，至少还需要三个条件，即：液体环境、适宜的________和________，前者由PCR仪自动调控，后者则靠________来维持。
高三生物综合题中等难度题查看答案及解析
-
PCR技术(多聚酶链式反应)成为分子生物学实验室的一种常规手段，其原理是利用DNA半保留复制，在试管中进行DNA的人工复制(如图)，在很短的时间内，将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍，使实验室所需的遗传物质不再受限于活的生物体。下列不正确的是（ ）
A. 加热使DNA双链打开，这一步是打开氢健，在细胞中是在解旋酶的作用下进行的
B. 当温度降低时，引物与模板末端结合，在DNA聚合酶的作用下，引物沿模板延伸，最终合成2个DNA分子，此过程中原料是脱氧核苷酸，遵循的原则是碱基互补配对原则
C. PCR技术的必需条件，除了模板、原料、ATP、酶以外，至少还有液体环境、适宜的温度和pH等三个条件
D. 若将一个用15N标记的DNA分子放入试管中，以14N标记的脱氧核苷酸为原料，连续复制4次之后，则15N标记的DNA分子占全部DNA总数的比例为1/16
高三生物单选题中等难度题查看答案及解析
-
(12分)在进行DNA亲子鉴定时，需大量的DNA。PCR技术(聚合酶链式反应)可以使样品DNA扩增，获得大量DNA克隆分子。该技术的原理是利用DNA的半保留复制，在试管中进行DNA的人工复制(如下图，图中黑色长方形是引物)。在很短的时间内将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍，使实验室所需的遗传物质不再受限于活的生物体。
(1)图中的变性、延伸分别是指________、________。
(2)假设PCR反应中的DNA模板为P，第一轮循环的产物2个子代DNA为N1，第二轮的产物4个子代DNA为N2，N1、N2中分别含有模板DNA单链的DNA分别有____个、____个。若继续循环，该DNA片段共经过30次循环后能形成____个DNA片段。
(3)若下图为第一轮循环产生的产物。请绘出以a链和b链为模板经PCR扩增的产物。
高三生物综合题中等难度题查看答案及解析
-
有关PCR技术的下列叙述，不正确的是
A. 聚合酶链式反应，是用DNA聚合酶在体外扩增DNA片段的技术
B. 在用PCR技术扩增DNA时，DNA的复制过程与细胞内DNA的复制类似
C. PCR反应需在一定的缓冲溶液中进行，只需提供DNA模板以及四种脱氧核苷酸即可
D. PCR一般经历三十多次循环，每次循环均分为变性、复性和延伸三个阶段
高三生物选择题中等难度题查看答案及解析
-
PCR（Polymerase Chain Reaction）即聚合酶链式反应，是一项DNA体外合成放大技术，能快速特异地在体外扩增任何目的DNA。回答下列有关该技术的知识：
（1）下图为PCR原理示意图，据图回答问题。
基因工程中，利用PCR技术来__________，PCR技术依据的原理是DNA的半保留复制，生物体内也能完成DNA的复制，但有所不同，图中A过程称为__________，在生物体内需要__________才能完成。图中B和C过程的完成需要__________等条件。
（2）现有目的基因“X基因”，它是DNA分子上一个有遗传效应的片段，若要用PCR技术特异性地拷贝“X基因”，需在PCR反应中加入两种引物，两种引物及其与模板链的结合位置如图1所示。经4轮循环后产物中有五种不同的DNA分子，如图2所示。
至少需要循环__________轮，图2所示的五种不同的DNA分子在产物中才都会出现。经4轮循环后，图中④所示的DNA分子数分别占DNA分子总数的比例为__________，从理论上推测，第四轮循环产物中不含有引物1的DNA片段所占的比例为__________。
高三生物非选择题困难题查看答案及解析
-
聚合酶链式反应(PCR技术)是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法，由高温变性、低温复性及适温延伸等几步反应组成一个周期，循环进行，使目的DNA得以迅速扩增。下列关于PCR技术叙述不正确的是
A．PCR技术是在实验室中以少量DNA制备大量DNA的技术
B．反应中新合成的DNA又可以作为下一轮反应的模板
C．PCR技术中酶和引物只须加入一次，可以重复利用
D．应用PCR技术与探针杂交技术可以检测基因突变
高三生物选择题中等难度题查看答案及解析
-
聚合酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。PCR过程一般经历下述30多次循环：95℃下使模板DNA变性、解链→55 ℃下复性(引物与DNA模板链结合)→72 ℃下引物链延伸(形成新的脱氧核苷酸链)。下列有关PCR过程的叙述中不正确的是
A．95℃高温破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键
B．复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成
C．延伸过程中需要热稳定DNA聚合酶和四种dNTP
D．引物为一小段RNA
高三生物选择题中等难度题查看答案及解析
-
基因工程又称基因拼接技术和DNA重组技术，是以分子遗传学为理论基础，以分子生物学和微生物学的现代方法为手段。如图是基因工程示意图，请据图回答下列问题：
（1）利用PCR技术对目的基因进行扩增时，需加入____________酶。该技术依据的原理是____________，在操作步骤中需要加热至90～95℃使____________，然后降温至55～60℃，使________________________。
（2）进行①过程时，需用________________________酶切开载体以插入目的基因。若要使目的基因在受体细胞中表达，需要导入基因表达载体，而不是直接导入目的基因，其原因是：________________________________________________（答出两点即可）。
（3）若图中宿主细胞为大肠杆菌，一般情况下②过程采用____________处理大肠杆菌，使其成为感受态细胞 。
（4）真核生物基因（目的基因）在大肠杆菌细胞内表达时，表达出的蛋白质可能会被降解。为防止蛋白质被降解，在实验中应选用________________________缺陷型的大肠杆菌作为受体细胞，并在蛋白质纯化的过程中应添加蛋白酶的抑制剂。
高三生物综合题中等难度题查看答案及解析
-
qRT-PCR又称实时荧光定量PCR，是一种在DNA扩增反应中，以荧光化学物质测定每次聚合酶链式反应（PCR）循环后产物的总量，间接对待测样品中特定DNA序列进行定量分析的方法。qRT-PCR实验步骤：反转录→扩增→检测。qRT-PCR目前主要应用于基因表达水平的检测。请回答下列有关问题：
（1）反转录：在___________酶的作用下，mRNA反转录形成cDNA分子；cDNA与原基因相比，在结构上的不同点有_________________________________。
（2）扩增：用PCR扩增cDNA，首先要制备___________种引物，以便为___________酶提供结合位点，并从引物的___________（填“5′”或“3′”）端开始拼接单个的脱氧核苷酸。
（3）检测：利用荧光标记的化学物质是____________________，随着PCR反应的进行荧光信号强度也等比例增加。
（4）qRT-PCR对基因表达的检测仅限于___________水平，而对于翻译水平的检测常用的方法是___________。
高三生物综合题中等难度题查看答案及解析