目前广泛应用的新型冠状病毒检测方法是实时荧光RT-PCR技术。RT—PCR是将RNA逆转录（RT）和cDNA的聚合酶链式扩增反应相结合的技术，具体过程如图所示，下列说法不正确的是（ ）
A.引物A与引物B应该具有不同的碱基序列
B.过程Ⅱ通过控制温度的变化实现目标序列的循环扩增
C.该反应体系中应加入缓冲液、引物、四种核糖核苷酸、逆转录酶、Taq酶等物质
D.该检测方法的应用依赖于新型冠状病毒特异性序列的确定
高三生物单选题中等难度题
目前广泛应用的新型冠状病毒检测方法是实时荧光RT-PCR技术。RT—PCR是将RNA逆转录（RT）和cDNA的聚合酶链式扩增反应相结合的技术，具体过程如图所示，下列说法不正确的是（ ）
A.引物A与引物B应该具有不同的碱基序列
B.过程Ⅱ通过控制温度的变化实现目标序列的循环扩增
C.该反应体系中应加入缓冲液、引物、四种核糖核苷酸、逆转录酶、Taq酶等物质
D.该检测方法的应用依赖于新型冠状病毒特异性序列的确定
高三生物单选题中等难度题
目前广泛应用的新型冠状病毒检测方法是实时荧光RT-PCR技术。RT—PCR是将RNA逆转录（RT）和cDNA的聚合酶链式扩增反应相结合的技术，具体过程如图所示，下列说法不正确的是（ ）
A.引物A与引物B应该具有不同的碱基序列
B.过程Ⅱ通过控制温度的变化实现目标序列的循环扩增
C.该反应体系中应加入缓冲液、引物、四种核糖核苷酸、逆转录酶、Taq酶等物质
D.该检测方法的应用依赖于新型冠状病毒特异性序列的确定
高三生物单选题中等难度题查看答案及解析
通过咽拭子取样进行RT-PCR技术检测是目前临床上诊断新型冠状病毒感染疑似患者的常用方法，用于核酸检测的RT-PCR试剂盒的部分工作原理简图如下。回答下列问题：
（1）RT-PCR是指以病毒的RNA为模板通过_________过程合成cDNA，并对cDNA进行PCR扩增的过程。进行RT-PCR过程中，需要加入的酶有__________。
（2）利用RT-PCR试剂盒对新型冠状病毒进行检测时，除借助上述RT-PCR技术外，还需要有特异性探针。制作该探针的依据是__________，利用该探针对新型冠状病毒进行检测的原理是___________。
（3）除核酸检测外，研究人员还研发了基于病毒蛋白的检测技术，该项技术的关键是生产出能与新冠病毒结合的特异性抗体。生产该种抗体的大致方案如下：
①向小鼠体内注射新冠病毒的抗原蛋白；
②分离免疫小鼠的B淋巴细胞，并与小鼠的骨髓瘤细胞融合，多次筛选、检测，最终获得所需杂交瘤细胞；
③将获得的杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养，获得大量的特异性抗体。
上述生产抗体的方案中使用的技术手段有__________，其中步骤②中获得的杂交瘤细胞具有__________等特点；步骤③中为防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害，应采取的措施是__________。
高三生物综合题中等难度题查看答案及解析
【生物——选修3现代生物科技专题】
RT－PCR是将RNA逆转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增反应相结合的技术，具体过程如图所示：
(1)过程Ⅰ需要加入缓冲液、原料、_____________、_______________和引物A等。
(2)过程Ⅱ首先要将反应体系的温度升高到95 ℃，其目的是__________________，该反应体系中所用的Taq酶至少应能耐受_________℃。
(3)过程Ⅱ拟对单链cDNA进行n次循环的扩增，理论上至少需要_________个引物B。
(4)利用RT－PCR技术获取的目的基因_______________ (填“能”或“不能”)在物种之间交流；该技术还可用于对某些微量RNA病毒的检测，可提高检测的灵敏度，原因是_______。
(5)RT－PCR过程中主要借助对_____________________的控制，影响酶的活性，从而使得化学反应有序高效地进行。
高三生物综合题困难题查看答案及解析
RT－PCR是将RNA逆转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增反应相结合的技术，具体过程如图所示：
(1)过程Ⅰ需要加入缓冲液、原料、_____________、_______________和引物A等。
(2)过程Ⅱ首先要将反应体系的温度升高到95 ℃，其目的是__________________、_______________。
(3)过程Ⅱ拟对单链cDNA进行n次循环的扩增，理论上至少需要_________个引物B。
(4)利用RT－PCR技术获取的目的基因_______________ (填“能”或“不能”)在物种之间交流；该技术还可用于对某些微量RNA病毒的检测，可提高检测的灵敏度，原因是_______。
(5)RT－PCR过程中主要借助对__________的控制，影响酶的活性，从而使得化学反应有序高效地进行。
高三生物非选择题困难题查看答案及解析
新型冠状病毒（2019-nCoV）的核酸检测使用逆转录PCR技术。将待测样本处理后，先将样本RNA逆转录成cDNA，再以cDNA为模板进行扩增。请据此回答下列问题：
（1）样本RNA逆转录成cDNA的原料是_________。
（2）逆转录PCR反应中使用的DNA聚合酶是从水生栖热菌中分离提取，该DNA聚合酶优势在于_________。
（3）下表是用于2019-nCoV的cDNA扩增的两种引物序列。
| 引物名称 | 引物序列(5'—3') |
| 引物1 | TTCG |
| 引物2 | TCAC |
①引物1对应的模板链序列（3'—5'）为_________。
②下图为cDNA的部分序列，引物1和引物2对应的位置是_________（选填Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ或Ⅳ）
（4）PCR技术获取目的基因的优势是_________。
（5）目前_________（选填“能”或“不能”）利用2019-nCoV的遗传物质作为基因工程的载体，请说明原因_________。
高三生物综合题中等难度题查看答案及解析
新型冠状病毒（COVID-19）的核酸检测采用逆转录PCR技术。先将样本RNA逆转录成cDNA，再以DNA为模板进行扩增。请据此回答下列问题：
（1）样本RNA逆转录成DNA的原料是______________________。
（2）逆转录PCR反应中使用的DNA聚合酶是从水生栖热菌Thermus Aquaticus（Taq）中分离提取。该菌分离提取的DNA聚合酶优势在于_____________。
（3）逆转录PCR反应中热变性过程DNA结构的变化是__________________________。
（4）下表是用于COVID-19的cDNA扩增的两种引物序列，请据表回答相关问题：
| 引物名称 | 引物序列（5′-3′） |
| 引物1 | TTCGATGTTGAGGGTGCTCAT |
| 引物2 | TCACACCAGTTGAAAATCCTAATTG |
①引物1对应的模板链序列为________________。
②下图为cDNA的部分序列，请问引物1和引物2分别对应的位置是_________
A．Ⅰ和Ⅱ B．Ⅰ和Ⅲ C．Ⅲ和Ⅳ D．Ⅱ和Ⅲ
（5）PCR技术获取目的基因的优势是________________________________。
（6）能否利用COVID-19的遗传物质作为基因工程的载体?请说明原因_____________________。
高三生物综合题中等难度题查看答案及解析
qRT-PCR又称实时荧光定量PCR，是一种在DNA扩增反应中，以荧光化学物质测定每次聚合酶链式反应（PCR）循环后产物的总量，间接对待测样品中特定DNA序列进行定量分析的方法。qRT-PCR实验步骤：反转录→扩增→检测。qRT-PCR目前主要应用于基因表达水平的检测。请回答下列有关问题：
（1）反转录：在___________酶的作用下，mRNA反转录形成cDNA分子；cDNA与原基因相比，在结构上的不同点有_________________________________。
（2）扩增：用PCR扩增cDNA，首先要制备___________种引物，以便为___________酶提供结合位点，并从引物的___________（填“5′”或“3′”）端开始拼接单个的脱氧核苷酸。
（3）检测：利用荧光标记的化学物质是____________________，随着PCR反应的进行荧光信号强度也等比例增加。
（4）qRT-PCR对基因表达的检测仅限于___________水平，而对于翻译水平的检测常用的方法是___________。
高三生物综合题中等难度题查看答案及解析
假设某逆转录RNA病毒它决定某性状的一段RNA共含有碱基100个，其中A占19%、C占26%、G占32%。如果这个RNA片断首先通过逆转录形成了双链DNA片段，再以聚合酶链式反应(PCR)进行扩增3个循环反应。则整个过程中需要游离的腺嘌呤脱氧核苷酸多少个？
A．336 B．294 C．275 D．161
高三生物选择题中等难度题查看答案及解析
下图是快速RT-PCR过程示意图，①和②为逆转录酶催化的逆转录过程，③是PCR过程。据图分析下列说法错误的是（ ）
A.逆转录酶具有DNA聚合酶能力
B.③PCR过程只需要引物b
C.RT-PCR可检测基因表达水平
D.RT-PCR可检测新冠病毒等RNA病毒
高三生物单选题简单题查看答案及解析
下图是快速RT-PCR过程示意图，①和②为逆转录酶催化的逆转录过程，③是PCR过程。据图分析下列说法错误的是（ ）
A.逆转录酶具有DNA聚合酶能力
B.③PCR过程只需要引物b
C.RT-PCR可检测基因表达水平
D.RT-PCR可检测新冠病毒等RNA病毒
高三生物单选题简单题查看答案及解析