【生物——选修3现代生物科技专题】
RT－PCR是将RNA逆转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增反应相结合的技术，具体过程如图所示：
(1)过程Ⅰ需要加入缓冲液、原料、_____________、_______________和引物A等。
(2)过程Ⅱ首先要将反应体系的温度升高到95 ℃，其目的是__________________，该反应体系中所用的Taq酶至少应能耐受_________℃。
(3)过程Ⅱ拟对单链cDNA进行n次循环的扩增，理论上至少需要_________个引物B。
(4)利用RT－PCR技术获取的目的基因_______________ (填“能”或“不能”)在物种之间交流；该技术还可用于对某些微量RNA病毒的检测，可提高检测的灵敏度，原因是_______。
(5)RT－PCR过程中主要借助对_____________________的控制，影响酶的活性，从而使得化学反应有序高效地进行。
高三生物综合题困难题
【生物——选修3现代生物科技专题】
RT－PCR是将RNA逆转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增反应相结合的技术，具体过程如图所示：
(1)过程Ⅰ需要加入缓冲液、原料、_____________、_______________和引物A等。
(2)过程Ⅱ首先要将反应体系的温度升高到95 ℃，其目的是__________________，该反应体系中所用的Taq酶至少应能耐受_________℃。
(3)过程Ⅱ拟对单链cDNA进行n次循环的扩增，理论上至少需要_________个引物B。
(4)利用RT－PCR技术获取的目的基因_______________ (填“能”或“不能”)在物种之间交流；该技术还可用于对某些微量RNA病毒的检测，可提高检测的灵敏度，原因是_______。
(5)RT－PCR过程中主要借助对_____________________的控制，影响酶的活性，从而使得化学反应有序高效地进行。
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目前广泛应用的新型冠状病毒检测方法是实时荧光RT-PCR技术。RT—PCR是将RNA逆转录（RT）和cDNA的聚合酶链式扩增反应相结合的技术，具体过程如图所示，下列说法不正确的是（ ）
A.引物A与引物B应该具有不同的碱基序列
B.过程Ⅱ通过控制温度的变化实现目标序列的循环扩增
C.该反应体系中应加入缓冲液、引物、四种核糖核苷酸、逆转录酶、Taq酶等物质
D.该检测方法的应用依赖于新型冠状病毒特异性序列的确定
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RT－PCR是将RNA逆转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增反应相结合的技术，具体过程如图所示：
(1)过程Ⅰ需要加入缓冲液、原料、_____________、_______________和引物A等。
(2)过程Ⅱ首先要将反应体系的温度升高到95 ℃，其目的是__________________、_______________。
(3)过程Ⅱ拟对单链cDNA进行n次循环的扩增，理论上至少需要_________个引物B。
(4)利用RT－PCR技术获取的目的基因_______________ (填“能”或“不能”)在物种之间交流；该技术还可用于对某些微量RNA病毒的检测，可提高检测的灵敏度，原因是_______。
(5)RT－PCR过程中主要借助对__________的控制，影响酶的活性，从而使得化学反应有序高效地进行。
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[生物——选修3:现代生物科技专题]
某科研小组希望将蚕丝蛋白基因导入大肠杆菌中生产蚕丝蛋白，设计操作过程如下：
①从家蚕细胞中获取蚕丝蛋白基因的mRNA，并得到相应的cDNA；②对cDNA进行PCR扩增；③将cDNA导入大肠杆菌；④……
回答下列问题：
（1）①、②过程所需的酶分别主要有____________和____________。
（2）在进行PCR扩增时需要合成____________种引物，根据基因工程的操作程序，第④步还需进行目的基因的____________，以确定目的基因是否稳定维持和____________其遗传特性。请简述确定目的基因转录出相应mRNA的操作过程:________________________。
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【生物——选修3：现代生物科技专题】奶酪生产中的凝乳酶是一种分泌蛋白。研究人员利用PCR技术扩增了目的基因，并培育了能合成凝乳酶的转基因酵母菌。请结合下图回答：
（1）利用PCR技术扩增目的基因原理与细胞内DNA复制类似（如左图所示）。图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。从理论上推测，第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为________。PCR反应体系的主要成分应包含：扩增缓冲液（含ATP和Mg2+)、水、4种脱氧核糖核苷酸、模板DNA、引物和___________。
（2）为了食品安全，右图所示的表达载体需用___________酶切除抗性基因的部分片段，再用___________酶使表达载体重新连接起来。选用缺失URA3基因的酵母菌作为受体细胞（必须在含有尿嘧啶的培养基中才能存活），为了筛选出成功导入表达载体的酵母菌，所使用的培养基___________（填“需要”或“不需要”）添加尿嘧啶。
（3）工业生产过程中，选用大肠杆菌作为受体细胞不能正常表达出凝乳酶，而选用酵母菌则能，原因是酵母菌含有______________________。
（4）测定凝乳酶基因转录的mRNA序列，测得从起始密码子到终止密码子之间的序列为1201个碱基，经判断这段序列的测定是错误的，为什么？_______________________。
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（生物—选修3 现代生物科技专题）
下图为科学家培育能生产人血清白蛋白乳腺生物反应器的过程，据图回答下列问题：
（1）利用PCR技术扩增目的基因，前提是______________，以便据此合成________。一个DNA分子三轮复制以后，含有两种引物的DNA分子有____个。
（2）得到的转基因母牛通过有性生殖产生的雌性后代不一定能产生人血清白蛋白，为了保证其遗传性状不变，科学家可通过_______技术保证其优良性状，该技术的成功证明了_______。该技术的最后一个环节是_______，其优势是_____________________。若想提高同卵双胎或多胎的概率，可利用_______技术。
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假设某逆转录RNA病毒它决定某性状的一段RNA共含有碱基100个，其中A占19%、C占26%、G占32%。如果这个RNA片断首先通过逆转录形成了双链DNA片段，再以聚合酶链式反应(PCR)进行扩增3个循环反应。则整个过程中需要游离的腺嘌呤脱氧核苷酸多少个？
A．336 B．294 C．275 D．161
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[生物一选修3：现代生物科技专题]
请根据现代生物工程技术回答下列问题：
（1）基因工程技术中对已获得的目的基因，常采用PCR技术大量扩增。该技术的基本过程是：目的基因DNA受热变性后解链为单链，_________与单链相应互补序列结合，然后在DNA聚合酶的作用下进行___________，如此重复循环多次。
（2）限制酶Smal能识别如下图，并在图中箭头位置切断DNA。
用限制酶Smal切割获取的目的基因需用___________酶构建基因表达载体。
（3）培育转基因小鼠除利用基因工程技术之外还需用到___________、___________等技术。
（4）制备单克隆抗体通常选用细胞融合技术，使______________细胞与___________细胞融合，融合成功的细胞经过筛选就是所需要的___________细胞。
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[生物——选修3：现代生物科技专题]下图为某种转基因抗病棉花培育过程图，请据图回答下列问题：
(1) PCR技术利用的基本原理是 ___。利用该技术扩增目标DNA片段（子链的延伸方向从5'→3'），应选择图巾的引物____（填字母）与模板DNA结合。
(2)在构建基因表达载体时，常用两种不同的限制酶切割目的基因和质粒，获得不同的黏性末端，其主要目的是防止____和反向连接。
(3)将重组质粒导入植物细胞中常用的方法是____。我国科学家将重组质粒导入棉花受体细胞所用的方法是____。
(4)重组细胞经过G、H过程成功地培育出了转基因抗病毒马铃薯植株，此过程涉及植物组织培养技术，该技术广泛应用于___ 、植物体细胞杂交育种等育种过程。
(5)研究表明，转基因植物可以通过花粉将外源基因扩散到其他植物，从而对生态环境造成潜在的危害。因此，科学家设法将目的基因整合到受体细胞的叶绿体基因组中，这样做的目的是防止目的基因 __________________ 。
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[生物——选修3：现代生物科技专题]下图为某种转基因抗病棉花培育过程图，请据图回答下列问题：
(1) PCR技术利用的基本原理是 ___。利用该技术扩增目标DNA片段（子链的延伸方向从5'→3'），应选择图巾的引物____（填字母）与模板DNA结合。
(2)在构建基因表达载体时，常用两种不同的限制酶切割目的基因和质粒，获得不同的黏性末端，其主要目的是防止____和反向连接。
(3)将重组质粒导入植物细胞中常用的方法是____。我国科学家将重组质粒导入棉花受体细胞所用的方法是____。
(4)重组细胞经过G、H过程成功地培育出了转基因抗病毒马铃薯植株，此过程涉及植物组织培养技术，该技术广泛应用于___ 、植物体细胞杂交育种等育种过程。
(5)研究表明，转基因植物可以通过花粉将外源基因扩散到其他植物，从而对生态环境造成潜在的危害。因此，科学家设法将目的基因整合到受体细胞的叶绿体基因组中，这样做的目的是防止目的基因 __________________ 。
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