新型冠状病毒(COVID-19)的核酸检测采用逆转录PCR技术。先将样本RNA逆转录成cDNA,再以DNA为模板进行扩增。请据此回答下列问题:
(1)样本RNA逆转录成DNA的原料是______________________。
(2)逆转录PCR反应中使用的DNA聚合酶是从水生栖热菌Thermus Aquaticus(Taq)中分离提取。该菌分离提取的DNA聚合酶优势在于_____________。
(3)逆转录PCR反应中热变性过程DNA结构的变化是__________________________。
(4)下表是用于COVID-19的cDNA扩增的两种引物序列,请据表回答相关问题:
引物名称 | 引物序列(5′-3′) |
引物1 | TTCGATGTTGAGGGTGCTCAT |
引物2 | TCACACCAGTTGAAAATCCTAATTG |
①引物1对应的模板链序列为________________。
②下图为cDNA的部分序列,请问引物1和引物2分别对应的位置是_________
A.Ⅰ和Ⅱ B.Ⅰ和Ⅲ C.Ⅲ和Ⅳ D.Ⅱ和Ⅲ
(5)PCR技术获取目的基因的优势是________________________________。
(6)能否利用COVID-19的遗传物质作为基因工程的载体?请说明原因_____________________。
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新型冠状病毒(COVID-19)的核酸检测采用逆转录PCR技术。先将样本RNA逆转录成cDNA,再以DNA为模板进行扩增。请据此回答下列问题:
(1)样本RNA逆转录成DNA的原料是______________________。
(2)逆转录PCR反应中使用的DNA聚合酶是从水生栖热菌Thermus Aquaticus(Taq)中分离提取。该菌分离提取的DNA聚合酶优势在于_____________。
(3)逆转录PCR反应中热变性过程DNA结构的变化是__________________________。
(4)下表是用于COVID-19的cDNA扩增的两种引物序列,请据表回答相关问题:
引物名称 | 引物序列(5′-3′) |
引物1 | TTCGATGTTGAGGGTGCTCAT |
引物2 | TCACACCAGTTGAAAATCCTAATTG |
①引物1对应的模板链序列为________________。
②下图为cDNA的部分序列,请问引物1和引物2分别对应的位置是_________
A.Ⅰ和Ⅱ B.Ⅰ和Ⅲ C.Ⅲ和Ⅳ D.Ⅱ和Ⅲ
(5)PCR技术获取目的基因的优势是________________________________。
(6)能否利用COVID-19的遗传物质作为基因工程的载体?请说明原因_____________________。
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新型冠状病毒(2019-nCoV)的核酸检测使用逆转录PCR技术。将待测样本处理后,先将样本RNA逆转录成cDNA,再以cDNA为模板进行扩增。请据此回答下列问题:
(1)样本RNA逆转录成cDNA的原料是_________。
(2)逆转录PCR反应中使用的DNA聚合酶是从水生栖热菌中分离提取,该DNA聚合酶优势在于_________。
(3)下表是用于2019-nCoV的cDNA扩增的两种引物序列。
引物名称 | 引物序列(5'—3') |
引物1 | TTCG |
引物2 | TCAC |
①引物1对应的模板链序列(3'—5')为_________。
②下图为cDNA的部分序列,引物1和引物2对应的位置是_________(选填Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ或Ⅳ)
(4)PCR技术获取目的基因的优势是_________。
(5)目前_________(选填“能”或“不能”)利用2019-nCoV的遗传物质作为基因工程的载体,请说明原因_________。
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目前广泛应用的新型冠状病毒检测方法是实时荧光RT-PCR技术。RT—PCR是将RNA逆转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增反应相结合的技术,具体过程如图所示,下列说法不正确的是( )
A.引物A与引物B应该具有不同的碱基序列
B.过程Ⅱ通过控制温度的变化实现目标序列的循环扩增
C.该反应体系中应加入缓冲液、引物、四种核糖核苷酸、逆转录酶、Taq酶等物质
D.该检测方法的应用依赖于新型冠状病毒特异性序列的确定
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RT- PCR技术是确诊新冠肺炎患者的核酸检测手段(如图),该技术首先将病毒COVID-19的核酸通过逆转录形成DNA,然后以此DNA链为模板进行体外DNA复制,反应体系中加入的荧光基团会使目标DNA发光,从而被仪器检测到。下列叙述错误的是( )
A.病毒COVID- 19的遗传物质中含有尿嘧啶核苷酸
B.检测过程中需要核糖核苷酸和脱氧核苷酸做为原料
C.RT- PCR反应体系中含有逆转录酶和DNA聚合酶
D.相同反应时间内目标DNA含量与病毒含量呈正相关
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通过咽拭子取样进行RT-PCR技术检测是目前临床上诊断新型冠状病毒感染疑似患者的常用方法,用于核酸检测的RT-PCR试剂盒的部分工作原理简图如下。回答下列问题:
(1)RT-PCR是指以病毒的RNA为模板通过_________过程合成cDNA,并对cDNA进行PCR扩增的过程。进行RT-PCR过程中,需要加入的酶有__________。
(2)利用RT-PCR试剂盒对新型冠状病毒进行检测时,除借助上述RT-PCR技术外,还需要有特异性探针。制作该探针的依据是__________,利用该探针对新型冠状病毒进行检测的原理是___________。
(3)除核酸检测外,研究人员还研发了基于病毒蛋白的检测技术,该项技术的关键是生产出能与新冠病毒结合的特异性抗体。生产该种抗体的大致方案如下:
①向小鼠体内注射新冠病毒的抗原蛋白;
②分离免疫小鼠的B淋巴细胞,并与小鼠的骨髓瘤细胞融合,多次筛选、检测,最终获得所需杂交瘤细胞;
③将获得的杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养,获得大量的特异性抗体。
上述生产抗体的方案中使用的技术手段有__________,其中步骤②中获得的杂交瘤细胞具有__________等特点;步骤③中为防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害,应采取的措施是__________。
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对RNA病毒进行核酸检测需要通过PCR技术进行扩增,其周期长、专业技术和设备要求高,很多科研单位开发了能快速进行病毒检测的免疫试剂盒。下图是某科研人员提出的制备检测病毒的单克隆抗体的技术路线。下列说法错误的是( )
A.RNA病毒的核酸检测需要用到逆转录酶
B.给动物注射的抗原A是病毒的RNA
C.图中a表示对杂交瘤细胞的克隆化培养
D.可用聚乙二醇作为细胞融合的促融剂
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中国科学家率先分离并发布的新型冠状病毒(COVD-19)照片,相关研究已发表在顶级医学杂志《柳叶刀》上。研究表明,COVID-19是典型的单链RNA病毒,其RNA可直接用作翻译的模板,引起的疫情在全球爆发。请思考回答相关问题:
(1)有人对病毒和细菌混淆不清,其实与细菌相比,病毒的显著结构特征是_________________。
(2)冠状病毒都是RNA病毒,其变异速率比DNA病毒快,给研究带来一定困难,从遗传物质的结构上分析,其原因是__________________________________。
(3)在我国中西医药物联合治疗新冠肺炎过程中,关键还是靠自身的特异性免疫功能才能康复,消灭病毒、恢复健康是人体免疫系统_________________功能的体现,人体内能特异性识别被COVID-19感染细胞的免疫细胞是_________________。
(4)新冠肺炎的诊断依靠病症、抗体检测、CT和核酸检测。核酸试剂盒用于快速检测时,要用到(荧光)PCR技术和分子杂交技术,“分子杂交”的依据是核酸分子具有_________________性。从疫区归国的某人,免疫功能正常,其多次COVID-19血清抗体检测都呈阴性,严格封闭隔离八天后却发病并确诊为新冠肺炎患者。对于这一事实,最可能的解释是__________________________________。
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我国公布的禁止进境检疫的有害生物烟草环斑病毒(TRSV)是RNA病毒。检疫部门取烟草叶片进行该病毒的诊断和检测,将待测样品利用RTPCR技术(逆转录PCR,具有灵敏度高、特异性强的优势)扩增样品。下图1是RTPCR技术的过程示意图,图2是PCR扩增产物的电泳图。请回答下列问题:
(1) 图1过程①表示利用RNA获得cDNA,该过程需要________酶的参与,过程②需要加入________酶。
(2) 待测样品中RNA的提供者可能是________和________,也可能只是________。
(3) 图1过程①需要加入引物P2,该引物是依据________________的序列设计并生产的。过程②引物P2、P1都需加入,理由是__________________________。
(4) 已知图2中电泳带1是取自未感染的烟叶样品电泳结果,电泳带2是不同大小DNA的标准参照,据图分析可以得出的结论是________,理由是______________________________。
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某新型病毒是一种RNA病毒,医务工作者利用PCR技术进行病毒检测时,所使用的方法中合理的是( )
A.用细菌培养基直接培养被测试者体内获取的病毒样本
B.分析该病毒的RNA序列是设计PCR引物的前提条件
C.PCR扩增过程需使用RNA聚合酶和耐高温DNA聚合酶
D.在恒温条件下进行PCR扩增避免温度变化导致酶失活
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新冠病毒是RNA病毒,对其进行检测的方法有两种:核酸检测和抗原-抗体杂交检测。下图表示新冠病毒核酸检测的部分流程。
(1)以病毒的RNA为模板通过①__________过程合成cDNA,再对cDNA进行PCR扩增,这项技术称为RT-PCR。
(2)进行RT-PCR需要加入的酶是__________和__________。
(3)一次病毒核酸检测历时需16小时,为快速检测可采用抗原-抗体杂交技术,这一技术的关键是要生产出能与新冠病毒结合的特异性抗体。请将下列生产这种抗体的基本思路补充完整:
①向小鼠体内注射__________,目的是获得能产生特异性抗体的效应B细胞;
②提取免疫小鼠的B淋巴细胞与__________融合,经多次__________获得能产生特异性抗体的杂交瘤细胞;
③将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养或注射到__________增殖,从而获得大量的特异性抗体。这种生产抗体的技术称为__________技术。通过这种技术获得的抗体最主要的优点有__________。请举出两例这种抗体在现实中的具体应用:__________。
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