新型冠状病毒（2019-nCoV）的核酸检测使用逆转录PCR技术。将待测样本处理后，先将样...

新型冠状病毒（2019-nCoV）的核酸检测使用逆转录PCR技术。将待测样本处理后，先将样本RNA逆转录成cDNA，再以cDNA为模板进行扩增。请据此回答下列问题：

（1）样本RNA逆转录成cDNA的原料是_________。

（2）逆转录PCR反应中使用的DNA聚合酶是从水生栖热菌中分离提取，该DNA聚合酶优势在于_________。

（3）下表是用于2019-nCoV的cDNA扩增的两种引物序列。

①引物1对应的模板链序列（3'—5'）为_________。

②下图为cDNA的部分序列，引物1和引物2对应的位置是_________（选填Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ或Ⅳ）

（4）PCR技术获取目的基因的优势是_________。

（5）目前_________（选填“能”或“不能”）利用2019-nCoV的遗传物质作为基因工程的载体，请说明原因_________。

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新型冠状病毒（COVID-19）的核酸检测采用逆转录PCR技术。先将样本RNA逆转录成cDNA，再以DNA为模板进行扩增。请据此回答下列问题：

（1）样本RNA逆转录成DNA的原料是______________________。

（2）逆转录PCR反应中使用的DNA聚合酶是从水生栖热菌Thermus Aquaticus（Taq）中分离提取。该菌分离提取的DNA聚合酶优势在于_____________。

（3）逆转录PCR反应中热变性过程DNA结构的变化是__________________________。

（4）下表是用于COVID-19的cDNA扩增的两种引物序列，请据表回答相关问题：

①引物1对应的模板链序列为________________。

②下图为cDNA的部分序列，请问引物1和引物2分别对应的位置是_________

A．Ⅰ和Ⅱ　　　　　 B．Ⅰ和Ⅲ　　　　　 C．Ⅲ和Ⅳ　　　　　 D．Ⅱ和Ⅲ

（5）PCR技术获取目的基因的优势是________________________________。

（6）能否利用COVID-19的遗传物质作为基因工程的载体?请说明原因_____________________。

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目前广泛应用的新型冠状病毒检测方法是实时荧光RT-PCR技术。RT—PCR是将RNA逆转录（RT）和cDNA的聚合酶链式扩增反应相结合的技术，具体过程如图所示，下列说法不正确的是（　　 ）

A.引物A与引物B应该具有不同的碱基序列

B.过程Ⅱ通过控制温度的变化实现目标序列的循环扩增

C.该反应体系中应加入缓冲液、引物、四种核糖核苷酸、逆转录酶、Taq酶等物质

D.该检测方法的应用依赖于新型冠状病毒特异性序列的确定

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近期，武汉等全国多地爆发新型冠状病毒感染肺炎疫情，引起人们高度关注，该病由名为“2019-nCoV”的RNA病毒引起，具有很强的传染性。RNA病毒可以分两种，RNA复制病毒和逆转录病毒，其增殖过程如下图所示。实验小组为了探究该RNA病毒是上述哪种类型的病毒，设计了模拟实验，请回答下列问题。

（1）RNA复制病毒在产生子代RNA时需在宿主细胞内以____________为原料，至少复制____________次，才能得到子代RNA分子。该病毒的遗传信息流动方向为____________。

（2）病毒增殖过程中，与RNA复制病毒相比，逆转录病毒除需要____________酶外，其不同的碱基配对方式为________。

（3）补充完善实验思路，并预测结果。

①取两支试管分别编号为甲、乙，加入的物质如上表所示，其中，X溶液为_______。

②保温一段时间后，将试管中的各物质分离后检测合成的核酸是否有放射性。

③若检测结果为甲试管合成的核酸无放射性，乙试管合成的核酸有放射性，则说明该病毒为________。

（4）某同学按照如上设计进行实验后发现，最终甲、乙两支试管内均无法检测到子代病毒，其原因是________。

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通过咽拭子取样进行RT-PCR技术检测是目前临床上诊断新型冠状病毒感染疑似患者的常用方法，用于核酸检测的RT-PCR试剂盒的部分工作原理简图如下。回答下列问题：

（1）RT-PCR是指以病毒的RNA为模板通过_________过程合成cDNA，并对cDNA进行PCR扩增的过程。进行RT-PCR过程中，需要加入的酶有__________。

（2）利用RT-PCR试剂盒对新型冠状病毒进行检测时，除借助上述RT-PCR技术外，还需要有特异性探针。制作该探针的依据是__________，利用该探针对新型冠状病毒进行检测的原理是___________。

（3）除核酸检测外，研究人员还研发了基于病毒蛋白的检测技术，该项技术的关键是生产出能与新冠病毒结合的特异性抗体。生产该种抗体的大致方案如下：

①向小鼠体内注射新冠病毒的抗原蛋白；

②分离免疫小鼠的B淋巴细胞，并与小鼠的骨髓瘤细胞融合，多次筛选、检测，最终获得所需杂交瘤细胞；

③将获得的杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养，获得大量的特异性抗体。

上述生产抗体的方案中使用的技术手段有__________，其中步骤②中获得的杂交瘤细胞具有__________等特点；步骤③中为防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害，应采取的措施是__________。

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新型冠状病毒肺炎是由一种新型冠状病毒（2019-nCoV，简称新冠病毒）引起的。根据相关材料回答下列问题：

材料一：由于疫情发展迅速，新冠病毒核酸检测可以快速有效的对病人及疑似患者的诊断提供直接证据。新冠病毒核酸检测采用荧光定量PCR仪，通过检测荧光信号的累积（以Ct值表示）来确定样本中是否有病毒核酸。新冠病毒的遗传物质为RNA，科学家先将病毒RNA逆转录，再将得到的cDNA进行扩增得到了大量DNA片段。

（1）过程①中，需要使用________酶。

（2）过程③中，需要设计________种引物，且设计时要避免引物之间形成________，而造成引物自连。

（3）采集新冠肺炎疑似患者的咽部细胞样本提取核酸进行上述过程，若经逆转录获得了1 个cDNA，则在过程③中经10次循环后，得到的DNA数量为________个。每一个扩增出来的DNA序列，都可与预先加入的一段荧光标记探针结合，产生荧光信号，扩增出来的靶基因越多，观察到的Ct值就越________。

材料二：应对不断蔓延的新冠肺炎，目前最好的方式仍然是接种疫苗。新冠病毒表面布满像皇冠一样的刺突蛋白（由S基因控制合成）。针对新冠病毒的疫苗可以通过模仿这些刺突蛋白，从而触发人体免疫系统的响应。下图表示疫苗的三种制作原理。

（4）如果利用基因工程研制新冠病毒疫苗，应选择________作为目的基因，以便用于后续操作。过程②表示构建________，其组成除了目的基因外，还必须有________。过程③需要用________处理细胞。

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2019年年底，武汉人群中出现不明原因肺炎，经检测这种肺炎是由一种新型冠状病毒2019—nCoV（单链RNA复制病毒）引起｡回答相关问题：

（1）病毒进入人体内前首先要突破第一和第二道防线，两道防线称之为非特异性免疫，其特点是______________________｡

（2）病毒进入宿主细胞后会引起由效应T细胞参与的细胞免疫，其中效应T细胞的作用是______________________｡

（3）新冠肺炎患者往往会出现发热症状，原因是患者的______________________导致｡

（4）提取患新冠肺炎痊愈者的血清，再加入新冠病毒后会出现沉淀，产生这种现象的原因是______________________｡

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用体外实验方法可以合成核酸｡已知新冠病毒2019—nCoV是一种新型RNA病毒，能够攻击人体的肺细胞，若要在体外利用同位素标记法来探究该类病毒是否存在逆转录现象，则所需的材料组合是（　　 ）

①同位素标记的胸腺嘧啶脱氧核苷酸　　　　　　　 ②同位素标记的尿嘧啶核糖核苷酸

③2019—nCoV的RNA　　　　　　 ④除去了DNA和RNA的肺细胞裂解液

⑤相应的逆转录酶

A.①③④⑤ B.②③④⑤ C.①③⑤ D.②③④

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某新型病毒是一种RNA病毒，医务工作者利用PCR技术进行病毒检测时，所使用的方法中合理的是（　　 ）

A.用细菌培养基直接培养被测试者体内获取的病毒样本

B.分析该病毒的RNA序列是设计PCR引物的前提条件

C.PCR扩增过程需使用RNA聚合酶和耐高温DNA聚合酶

D.在恒温条件下进行PCR扩增避免温度变化导致酶失活

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2019年底，武汉出现不明原因肺炎，经检测发现这场肺炎是由一种新型冠状病毒引起，即2019新型冠状病毒（2019-nCoV）。人感染了这种新型冠状病毒后常见病征有发热、咳嗽、气促和呼吸困难等。据此请回答：

（1）从稳态的角度来讲，当人们感染新型冠状病毒后会引起机体的代谢____________，导致身体出现多种不良症状，由此可见，内环境稳态是________________________。

（2）感染新型冠状病毒后的人会出现发热，体温持续在37．8℃左右，这种症状的出现是由于病毒直接或间接影响了体温调节中枢____________（填器官）的功能，导致病人体内____________等激素的含量会增多，机体的产热____________（填“＞、=或＜”）其散热。

（3）疫区的人们采取了以下措施，其中属于切断传播途径的是____________。

①隔离病人　　　　　　　　 ②使用一次性口罩、手套和防护服

③接种疫苗　　　　　　　　 ④用紫外线、福尔马林等对室内外环境进行消毒

（4）重症患者会出现肺炎、严重急性呼吸综合征、肾衰竭，甚至死亡。经检测发现这些症状的产生与机体感染新型冠状病毒后引起机体免疫系统大量产生多种细胞因子（免疫物质）进而伤害宿主有密切关系。说明这种失调现象属于____________。

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