【生物——生物技术实践】从自然界获得纯种的酿酒酵母，基本程序是：配制培养基—接种—培养—观...

【生物——生物技术实践】

从自然界获得纯种的酿酒酵母，基本程序是：配制培养基—接种—培养—观察记录—纯化培养。请回答下列有关的问题：

（1）酵母菌的培养最好使用下列哪种培养基？（   ）

A．牛肉膏蛋白胨培养基        B．麦芽汁琼脂培养基

C．伊红-美蓝培养基            D．MS培养基

（2）采用平板划线法接种时，开始接种时要灼烧接种环，目的是________。要把接种后的培养基和一个未接种的培养基同时放入恒温箱培养，设置“未接种的培养基”做对照的目的是 ________。

（3）将得到的纯种酿酒酵母接种到葡萄汁中，经过发酵可以得到________。

（4）将酵母菌破碎并提取得到酵母菌的蛋白质，利用聚丙烯胺凝胶电泳技术将得到的蛋白质进行分离，在电泳过程中，影响蛋白质迁移速度的因素包括蛋白质分子的________、________以及分子的形状等。

（5）把从酵母细胞中提取的淀粉酶固定在尼龙布上制成固定化酶，采用的方法是________，与传统酶应用技术相比，此技术最显著的优点是________。

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（8分）[生物一生物技术实践]

从自然界获得纯种酿酒酵母菌的基本程序是：配制培养基—接种—培养—观察记录—纯化培养。请回答下列有关问题：

（1）酵母菌的培养最好使用下列哪种培养基？________。

A．牛肉膏蛋白胨培养基     B．麦芽汁琼脂培养基

C．蛋白胨酵母膏培养基     D．MS培养基

（2）采用平板划线法接种时，开始接种时要灼烧接种环，目的是________

________。要把接种后的培养基和一个未接种的培养基同时放入恒温箱培养，设置：“未接种的培养基”做对照的目的是________

________。

（3）将得到的纯种酿酒酵母接种到葡萄汁中，经过发酵可以得到________。

（4）将酵母菌破碎并提取得到酵母菌的蛋白质，利用聚丙烯胺凝胶电泳技术将得到的蛋白质进行分离，在电泳过程中，影响蛋白质迁移速度的因素包括蛋白质分子的________、________。

（5）把从酵母细胞中提取的淀粉酶固定在尼龙布上制成固定化酶，采用的方法是________

________，与传统酶应用技术相比，此技术最显著的优点是

________。

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（18分）从自然界获得纯种的酿酒酵母，基本程序是：配制培养基—接种—培养—观察记录—纯化培养。请回答下列有关的问题：

（1）酵母菌的培养最好使用下列哪种培养基？（　　 ）

A．牛肉膏蛋白胨培养基　　　　　 B．麦芽汁琼脂培养基

C．无土载培培养基　　　　　　　　 D．MS培养基

（2）采用平板划线法接种时，开始接种时要灼烧接种环，目的是　　　　　　　　　　　　 。要把接种后的培养基和一个未接种的培养基同时放入恒温箱培养，设置“未接种的培养基”的目的是 　　　　　　　　 。

（3）将得到的纯种酿酒酵母接种到葡萄汁中发酵，如何获得酒精含量更高的果酒？　　

　　　　　　　　　　　　　　 。

（4）把从酵母细胞中提取的淀粉酶固定在尼龙布上制成固定化酶，与传统酶应用技术相比，此技术最显著的优点是　　　　　　　　　　　　　　　　 。

（5）某实验小组欲按上述方法从土壤中筛选出能分泌淀粉酶的芽孢杆菌，应将菌液涂布接种于以　　　　　 为唯一碳源的固体培养基上，30℃条件下培养。为避免污染，需将培养皿呈　　　　　　 状态放置；筛选时应将适量的碘液滴加在平板中的菌落周围，如果菌落周围的现象是出现透明圈，则说明此种菌能够　　　　　　 。从平板中挑取实验效果明显的目的菌株，采用　　　　　 法接种于新的培养基平板，可对菌株进行进一步的纯化。　

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【选修1：生物技术实践】

下图为苹果醋的工业生产流程，以及实验室分离、纯化发酵菌的方法步骤。请回答以下问题：

纯化发酵菌的方法步骤：配制培养基→培养基灭菌→接种→培养→挑选符合要求的菌落。

（1）上图中①过程与②过程需要接种的发酵菌分别是________________________________。

（2）微生物培养基的营养成分包括____________、水、无机盐和生长因子。

（3）某同学用新鲜苹果醋为实验材料分离纯化其中的发酵菌，为了保证能获得单菌落，要先对苹果醋____________________________________。

（4）某同学计划统计食醋中该发酵菌的总数，他选用10-4、10－5、10－6稀释液进行涂布，每种稀释液都设置了3个培养皿。从对照实验的角度看，还应设置的一组对照组是_____________，设置对照组的目的是_________________。

（5）上图所示曲线中，能正确表示上述发酵过程中培养液pH变化曲线是_________（选填“①”、

“②”、“③”、“④”）。

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下图为苹果醋的工业生产流程，以及实验室分离、纯化发酵菌的方法步骤。请回答以下问题：

纯化发酵菌的方法步骤:配制培养基→培养基灭菌→接种→培养→挑选符合要求的菌落。

（1）在微生物的实验室培养中，获得纯净培养物的关键是___________，因此需对培养基和培养皿进行灭菌，空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使破坏DNA的结构，也能使蛋白质___________。

（2）上图中①过程与②过程需要接种的发酵菌分别是_____________________。

（3）某同学计划统计食醋中该发酵菌的总数，他选用10-4、10-5、10-6稀释液进行涂布，每种稀释液都设置了3个培养皿。从对照实验的角度看，还应设置的一组对照组是___________________，设置对照组的目的是______________________。

（4）对同一浓度的发酵菌稀释液，分别用血球计数板计数和稀释涂布平板法计数，若不存在实验误操作， 则前者的数量___________（填“多于”、“等于”或“小于”）后者，其原因是____________________。

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下图为苹果醋的工业生产流程，以及实验室分离、纯化发酵菌的方法步骤。请回答以下问题：

纯化发酵菌的方法步骤:配制培养基→培养基灭菌→接种→培养→挑选符合要求的菌落。

（1）在微生物的实验室培养中，获得纯净培养物的关键是___________，因此需对培养基和培养皿进行灭菌，空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使破坏DNA的结构，也能使蛋白质___________。

（2）上图中①过程与②过程需要接种的发酵菌分别是_____________________。

（3）某同学计划统计食醋中该发酵菌的总数，他选用10-4、10-5、10-6稀释液进行涂布，每种稀释液都设罝了3个培养皿。从对照实验的角度看，还应设置的一组对照组是___________________，设置对照组的目的是______________________。

（4）对同一浓度的发酵菌稀释液，分别用血球计数板计数和稀释涂布平板法计数，若不存在实验误操作， 则前者的数量___________（填“多于”、“等于”或“小于”）后者，其原因是____________________。

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有关微生物的培养与应用，下列说法正确的是（　　 ）

A.通常使用液体培养基分离获得细菌单菌落

B.大肠杆菌的纯化培养过程包括培养基的配制和纯化大肠杆菌两个阶段

C.接种前需对培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手等进行严格灭菌处理

D.某一稀释度的3个平板的菌落数依次为M1、M2、M3，以M2作为该样品菌落估计值

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[生物——选修1:生物技术实践]（15分）回答下列有关微生物及其培养的相关问题

常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖来进行酒精发酵,而自然界中某些酵母菌能分解木糖产生酒精,但是对酒精的耐受能力差。科学家利用基因工程培育了能利用这两种糖进行发酵且对酒精耐受能力强的酿酒酵母。请分析回答:

（1）微生物实验用的培养皿常用的两种灭菌方法是　　　　　 ；为了减少灭菌后器皿被污染,灭菌前应该将器皿　　　　　　　 。下图是灭菌锅及其局部剖面示意图,图中甲、乙指示的结构依次是 　　　　　　　　 。

（2）制备酵母菌培养基要进行平板操作,待平板冷凝后,要将培养皿倒置,其主要原因　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

（3）取从自然界中采集的葡萄,然后在超净台上将葡萄置于0.1%氯化汞水溶液中进行表面消毒5min,再用无菌水将葡萄皮上的微生物冲洗到无菌的三角瓶中,然后进行纯化培养。研究者在经过接种后得到了一个经培养后菌落分布如下图乙所示的平板,推测接种时可能的操作失误是　　　　　　 。为了确定培养基是否被污染,需要进行的操作是:　　　　　　　　　　　 。

（4）下表为某学生在筛选培养能利用木糖发酵的酵母菌时所配置的培养基配方,请指出其中的明显不足之处　　　　　　　　　　　　　　　 。

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[生物——选修1:生物技术实践]人参的有效成分主要是人参皂苷。可以由下图所示途径获得人参皂苷。

请回答下列相关问题：

（1）配制诱导愈伤组织的固体培养基，分装后要进行________。接种前，要对人参根进行______________。

（2）外植体常用一种添加了植物激素的_________培养基进行培养，几天后发现有少数培养基被有光泽的黏液状菌落污染，引起污染的微生物是___________(细菌或真菌）。

（3）在单细胞悬浮培养液中蔗糖的作用是____________。

（4）干燥过程应控制好温度和_________，以防止人参皂苷分解。

（5）人参皂苷易溶于水溶性有机溶剂，①宜选用__________方法，操作时应采用____________加热。

（6）纸层析法可用于鉴定所提取的人参皂苷。鉴定过程中需用__________作为标样。

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[生物——选修1：生物技术实践]

请运用酵母菌的分离与纯化、果酒制作与应用的知识，回答下列问题：

（1）在酵母菌的分离与纯化过程中，需将培养基的pH调至______。对培养基进行灭菌常采用的方法是________。

（2）在选择培养并获得酵母菌单菌落的过程中，可采用_______法将含酵母菌的样液接种于固体培养基表面，对获得的菌种可采用_______的方法长期保存。

（3）在无氧条件下，酵母菌将丙酮酸分解成_________，在发酵结束前，接种在果汁中的酵母菌种群数量呈现_____增长。

（4）醋酸菌在______充足条件下可将果酒中的乙醇变为_____，再变为醋酸。

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