（8分）科学家发现家蝇体内存在着一种抗菌活性蛋白。这种蛋白具有极强的抗菌能力，受到研究者重...

（15分）[生物技术实践] 科学家发现家蝇体内存在一种抗菌活性蛋白，这种蛋白质具有极强的抗菌能力，受到研究者重视。

（1）分离该抗菌蛋白可用电泳法，其原理是根据蛋白质分子的________、大小及形状不同，在电场中的________不同而实现分离。

（2）可用金黄色葡萄球菌来检验该蛋白的抗菌特性。抗菌实验中所用培养基中的牛肉膏和蛋白胨主要为细菌生长提供________和。

（3）分别在加入和未加入该抗菌蛋白的培养基中接种等量菌液。培养一定时间后，比较两种培养基中菌落的________，确定该蛋白质的抗菌效果。

（4）细菌培养常用的接种方法有________和________。实验结束后，对使用过的培养基应进行________处理。

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（8分）科学家发现家蝇体内存在着一种抗菌活性蛋白。这种蛋白具有极强的抗菌能力，受到研究者重视。

（1）分离该抗菌蛋白可用电泳法，其原理是根据蛋白质分子的、大小及形状不同，在电场中的________不同而实现分离。

（2）可用金黄色葡萄球菌来检验该蛋白的体外抗菌特性。抗菌实验所用培养基中的牛肉膏和蛋白胨主要为细菌生长提供________和________。

（3）分别在加入和未加入该抗菌蛋白的培养基中接种等量菌液。培养一定时间后，比较两种培养基中菌落的________，确定该蛋白质的抗菌效果。

（4）细菌培养常用的接种方法有________和________。实验结束后，对使用过的培养基应进行________处理。

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科学家发现家蝇体内存在一种抗肿瘤蛋白（且具有抗菌能力），受到研究者重视。临床使用发现此蛋白质对肿瘤确实有良好的疗效，可以通过基因工程技术导入大肠杆菌内进行大量生产。其过程大体如图所示：

（1）在基因工程中，获取目的基因的方法有___________________（至少写出两种）。

（2）图中a过程叫_______________，它是基因操作的核心步骤，该过程中切质粒和目的基因的限制酶可以不同，但是产生的粘性末端要满足____________条件。

（3）将抗肿瘤基因导入大肠杆菌，并在大肠杆菌细胞内成功表达产生了抗肿瘤蛋白，由于大肠杆菌具有__________________特点，因此在短时间内就能获得大量的抗肿瘤蛋白。

（4）细胞工程可以作为辅助手段，通过获得特定的单克隆抗体并与抗肿瘤蛋白结合制成“生物导弹”，以实现“靶向杀癌”。下面是单克隆抗体制备过程示意图，请据图回答：

① 图中A过程从小鼠的脾脏中取得的“小鼠细胞”是___________细胞，要获得能产生抗肿瘤蛋白抗体的杂交瘤细胞至少要经过__________次筛选。从小鼠体内提取分离该细胞之前，给小鼠注射的特定的物质是____________________。

② 为检测杂交瘤细胞是否成功的合成了单克隆抗体，可以采用____________的方法。

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科学家发现家蝇体内存在一种抗肿瘤蛋白（且具有抗菌能力），受到研究者重视。临床使用发现此蛋白质对肿瘤确良好的疗效，可以通过基因工程技术导入大肠杆菌内进行大量生产。其过程大体如图所示：

（1）在基因工程中，获取目的基因的方法有（至少写出两种）。

（2）图中a过程叫________，它是基因操作的核心步骤。

（3）将抗肿瘤基因导入大肠杆菌，并在大肠杆菌细胞内成功表达产生了抗肿瘤蛋白，由于________，因此在短时间内就能获得大量的抗肿瘤蛋白。

（4）细胞工程可以作为辅助手段，通过获得特定的单克隆抗体并 与抗肿瘤蛋白结合制成“生物导弹”，以实现“靶向杀癌”。下面是单克隆抗体制备过程示意图，请据图回答：

① 图中A过程从小鼠的脾脏中取得的“小鼠细胞”是　　　细胞，要获得能产生抗肿瘤蛋白抗体的杂交瘤细胞至少要经过________次筛选。从小鼠体内提取分离该细胞之前，给小鼠注射的特定的物质是　 　________　　。

② 实验室无法单独培养能获得单克隆抗体的细胞。通过细胞工程获得的杂交瘤细胞由于具备________的优点，使单抗技术获得成功。

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科学家发现家蝇体内存在一种抗肿瘤蛋白（且具有抗菌能力），受到研究者重视。临床使用发现此蛋白质对肿瘤确良好的疗效，可以通过基因工程技术导入大肠杆菌内进行大量生产。其过程大体如图所示：

（1） 在基因工程中，获取目的基因的方法有（至少写出两种）。

（2）图中a过程叫________，它是基因操作的核心步骤。

（3）将抗肿瘤基因导入大肠杆菌，并在大肠杆菌细胞内成功表达产生了抗肿瘤蛋白，由于________，因此在短时间内就能获得大量的抗肿瘤蛋白。

（4）细胞工程可以作为辅助手段，通过获得特定的单克隆抗体并与抗肿瘤蛋白结合制成“生物导弹”，以实现“靶向杀癌”。下面是单克隆抗体制备过程示意图，请据图回答：

① 图中A过程从小鼠的脾脏中取得的“小鼠细胞”是　　　细胞，要获得能产生抗肿瘤蛋白抗体的杂交瘤细胞至少要经过________次筛选。从小鼠体内提取分离该细胞之前，给小鼠注射的特定的物质是　 　________　　。

② 实验室无法单独培养能获得单克隆抗体的细胞。通过细胞工程获得的杂交瘤细胞由于具备________的优点，使单抗技术获得成功。

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【生物——选修模块1：生物技术实践】（15分）

家蝇体内存在一种具有极强抗菌能力的抗菌蛋白，请回答下列有关分离和提取抗菌蛋白的问题：

（1）分离该抗菌蛋白可用________法，其原理是根据蛋白质分子的带电性质差异、大小及形状不同，________不同而实现分离。

（2）蛋白质的提取和分离一般分为四步：样品处理、________、________、和________。

（3）可用金黄色葡萄球菌来检验该蛋白质的体外抗菌特性。抗菌实验所用培养基中的牛乳膏和蛋白胨主要为细菌生长提供________和________。

（4）分别在加入和未加入该抗菌蛋白的培养基中接种等量菌液，培养一定时间后，比较两种培养基中菌落的___________，确定该蛋白质的抗菌效果。

（5）抗菌培养常用的接种方法有___________和_____________。实验结束后，对使用过的培养基应进行________处理。

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科学家发现家蝇体内存在一种抗菌活性蛋白。分别在加入和未加入该抗菌蛋白的培养基中接种等量金黄色葡萄球菌，培养一定时间后，比较两种培养基中菌落的数量，可确定该蛋白质的抗菌效果。

（1）抗菌实 验所用培养基中的牛肉膏和蛋白胨主要为细菌生长提供______________。灭菌与调节pH的先后顺序是_______________________。抗菌蛋白需在灭菌_____（填“前”或“后”）加入。

（2）对新配制的培养基灭菌时所用的设备是________________________。实验前需对超净工作台进行__________处理。

（3）该实验接种金黄色葡萄球菌的方法是_____________________ 。

（4）实验中的自变量和因变量分别是_________________________。

（5）有人认为抗菌蛋白本身具有极强的抗菌能力，因此，该实验操作不需要在无菌条件下进行。请你谈谈自己的观点，并简要说明理由________________________________。

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科学家发现家蝇体内有一种抗肿瘤蛋白，这种蛋白质具有极强的抗菌能力。若临床使用发现此蛋白质对肿瘤确有良好的疗效，可以通过基因工程技术导入大肠杆菌内进行大量生产。其过程如下图所示，下列相关说法错误的是(   )

A．一般常用鸟枪法提取该种基因做为目的基因

B．获得重组质粒时，需用同种限制酶处理目的基因和质粒

C．用CaCl₂处理大肠杆菌有利于目的基因导入受体细胞

D．在大肠杆菌细胞内获得了抗肿瘤蛋白表明目的基因完成了表达

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科学家发现家蝇体内有一种杭肿瘤蛋白，这种蛋白质具有极强的抗菌能力。若临床使用    发现此蛋自质对肿瘤确有良好的疗效，可以通过基因工程技术导入大肠杆菌内进行量生产。其过程如下图所示，下列相关说法错误的是

A一般常用鸟枪法提取该种基因做为目的基因

B.获得重组质粒时，需用同种限制酶处理目的基因和质粒

C.用CaCl2处理大肠杆菌有利于目的基因导入受体细胞

D.在大肠杆菌细胞内获得了抗肿瘤蛋白表明目的基因完成了表达

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近日，神经学家发现一个免疫蛋白——p2微球蛋白，除了具有免疫作用外，在患有阿兹海默病以及其他认知障碍疾病的病人体内也浓度较高。对这种蛋白的研究受到了研究者重视。

(1)从血液中提取和分离p2微球蛋白，可以在进行了样品处理和粗分离的基础上，用凝胶色谱法进行进一步的纯化。进入色谱柱的相对分子质量不同的蛋白质按分子量不同先后洗脱下来，其中分子量大的蛋白质_________（填“先”或“后”）洗脱出来。

(2)若用电泳法分离纯化p2微球蛋白，其原理是利用了分离样品中各种分子____________的差异以及分子本身的大小、形状的不同，在电场的迁移速度不同而实现分离。

(3)有研究者为获得大量p2微球蛋白，提出通过培养转基因细菌来获得。对此细菌进行培养，所用培养基中的牛肉膏和蛋白胨主要为细菌生长提供_____________；对培养基的灭菌主要采用_____________的方法。若培养基需要调节pH，则应在灭菌之_____________（填“前”或“后”）调节。

(4)为了获得由单个细菌繁殖而来的菌落，最好的接种方法是__________，此方法涉及到倒平板操作，倒平板时应该待温度冷却至____________℃左右时进行。实验结束时，每个平板上菌落数控制在_____________之间以便计数。

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