(生物技术实践(15分)随着社会的发展，石油产品的使用越来越多，石油烃污染也越来越严重。为...

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(生物技术实践(15分)随着社会的发展，石油产品的使用越来越多，石油烃污染也越来越严重。为了筛选出分解石油烃能力强的微生物，人们不断地进行研究。下图为获取能分离出分解石油烃的微生物的土壤样品后的研究过程，请回答有关问题：
(1)分解石油烃的微生物一般要从土壤中分离，获取相应土壤样品的取样地点最好选在________________。
(2)为了能有效地分离出分解石油烃的微生物，①～④所用培养基中成分的特点是________________，从而有利于________的生长，抑制其他微生物的生长。
(3)④中的培养基从物理特征看属于________培养基，其可以通过向培养基中加入一定量的________来实现。对④中的培养基进行接种常采用的两种方法分别是________________和________________。
(4)在实验室应采用________________法对培养基进行灭菌处理。

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【加试题】回答下列（一）（二）小题。
（一）随着社会的发展，石油产品的使用越来越多，石油烃污染也越来越严重。为了筛选出分解石油烃能力强的微生物，人们不断地进行研究。下图为获取能分离出分解石油烃的微生物的土壤样品后的研究过程，请回答有关问题：
(1)获取土壤样品的取样地点最好选在_________。为了能有效地分离出分解石油烃的微生物,过程①④所用的选择培养基只能以石油烃作为唯一碳源，其原因是_____________。
(2)根据⑤平板上生长的菌落，对④进行接种采用的方法是______________,若发现在⑤中无法区分菌落，可以将图中③取出的菌液_____________。
(3)纯化菌株时，通常使用的划线工具是_________。采用________方法对其进行灭菌。划线的某个平板培养后,第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落,第二划线区域所划的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误是_______________(写出一点即可)。
（二）毛角蛋白Ⅱ型中间丝（KIFⅡ)基因与绒山羊的羊绒质量密切相关。获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的简单流程如图。
(1)获取外源基因用到的工具酶是______________。
(2)在过程②中，用_______酶处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞。把一个单细胞从群体中分离出来单独培养，使之繁衍成一个新的细胞群体的技术，叫细胞克隆。未经克隆化的细胞系具有_______性。由于人们对动物细胞所需营养物质还没有完全搞清楚，因此在培养细胞时需在培养基中加入一定量的
________，在培养过程中应将培养瓶置于___________培养。
(3)若要获得多只相同的转基因山羊，可对图中早期胚胎进行_______后进行胚胎移植。
(4)下列有关转基因山羊培育过程的叙述，错误的是_____________。
A.图中重组细胞的细胞核来自导入目的基因的细胞
B.重组细胞最初分裂时开始进行DNA复制和基因的转录
C.将早期胚胎（如早期囊胚）植入到代孕母羊的输卵管或子宫角部位
D.如果KIFⅡ基因的序列是已知的，则可用化学方法合成或用聚合酶链式反应扩增该基因

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回答下列(一)、(二)小题：
(一)随着社会的发展，石油产品的使用越来越多，石油烃污染也越来越严重。为了筛选出分解石油烃能力强的微生物，人们不断地进行研究。下图为获取能分离出分解石油烃的微生物的土壤样品后的研究过程，请回答有关问题：
(1)获取土壤样品的取样地点最好选在____________________。为了能有效地分离出分解石油烃的微生物，过程①④所用的选择培养基只能以石油烃作为唯一碳源，其原因是________________。
(2)根据⑤平板上生长的菌落，对④进行接种采用的方法是____________法，若发现在⑤中无法区分菌落，可以将图中③取出的菌液________________。
(3)纯化菌株时，通常使用的划线工具是__________。采用____________方法对其进行灭菌。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落，第二划线区域所划的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误是______________________(写出一点即可)。
(二)毛角蛋白Ⅱ型中间丝(KIFⅡ)基因与绒山羊的羊绒质量密切相关。获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的简单流程如图。
(1)获取外源基因用到的工具酶是___________________。
(2)在过程②中，用____________酶处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞。把一个单细胞从群体中分离出来单独培养，使之繁衍成一个新的细胞群体的技术，叫细胞克隆。未经克隆化的细胞系具有________性。由于人们对动物细胞所需营养物质还没有完全搞清楚，因此在培养细胞时需在培养基中加入一定量的______________，在培养过程中应将培养瓶置于___________培养。
(3)若要获得多只相同的转基因山羊，可对图中早期胚胎进行____________后进行胚胎移植。
(4)下列有关转基因山羊培育过程的叙述，错误的是________。
A．图中重组细胞的细胞核来自导入目的基因的细胞
B．重组细胞最初分裂时开始进行DNA复制和基因的转录
C．将早期胚胎(如早期囊胚)植入到代孕母羊的输卵管或子宫角部位
D．如果KIFⅡ基因的序列是已知的，则可用化学方法合成或用聚合酶链反应扩增该基因

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随着社会的发展，石油产品的使用越来越多，石油烃污染也越来越严重。为了筛选出分解石油烃能力强的微生物，人们不断地进行研究。下图为获取能分离出分解石油烃的微生物的土壤样品后的研究过程，请回答有关问题：
(1)获取土壤样品的取样地点最好选在_________。为了能有效地分离出分解石油烃的微生物,过程①④所用的选择培养基只能以石油烃作为唯一碳源，其原因是_____________。
(2)根据⑤平板上生长的菌落，对④进行接种采用的方法是______________,若发现在⑤中无法区分菌落，可以将图中③取出的菌液_____________。
(3)纯化菌株时，通常使用的划线工具是_________。采用________方法对其进行灭菌。划线的某个平板培养后,第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落,第二划线区域所划的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误是_______________(写出一点即可)。

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石油烃是石油管道泄漏的主要污染物。为了筛选出分解石油烃能力较强的微生物，进行了如下系列操作。请回答问题：
（1）分解石油烃的微生物一般从土壤中分离，获取土壤样品的取样地点最好选在_____________。
（2）图1表示获取土壤样品后的研究过程。
为了能有效地分离出分解石油烃的微生物，①〜③号瓶所用的液体培养基的成分共有的特点是________，从而有利于分解石油烃的微生物的生长。
（3）可采用图2中平板乙所示的____________(方法）检测图1的③号瓶中分解石油烃的微生物数量。在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养一段时间，这样做的目的是_____________；然后，将图1③号瓶中的1mL菌液稀释100倍，在3个平板上用该方法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每毫升该菌液中的活菌数为______________个。
（4）Ⅰ.若实验室采用图3中的操作分离纯化优良菌种，首次接种最合理的排序是_________。
Ⅱ.下列有关操作正确的是______________（填字母）。
A.划线分离时，需要把接种环深入到培养基中进行接种
B.划线时要将最后一区域的划线与第一区域的划线相连
C.超净工作台在使用前，可用紫外线灯杀菌

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[生物——选修1：生物技术实践]（15分）
随着环境污染的加剧和石油危机出现，越来越多的国家使用乙醇作为代替燃料，生产中玉米和麦草的秸秆可以用来生产燃料乙醇，已知秸秆的主要成分是纤维素，回答下列问题：
（1）人们首先利用纤维素分解菌将纤维素分解，纤维素分解菌多分布在富含　　　　　　的土壤中。
（2）从土壤中筛选纤维素分解菌所需要配制的培养基从功能上看属于　　　　　　培养基，该培养基中需要加入纤维素粉作为唯一的　　　　　　。
（3）经过梯度稀释后，要将样品均匀涂布在用于鉴别纤维素分解菌的培养基上，在该培养基中需要加入的染料是　　　　　　　　，当形成菌落以后可以根据菌落周围是否产生　　　　　　　　来筛选纤维素分解菌。当利用涂布器涂布平板之后需要对涂布器进行　　　　　　处理。
（4）产生葡萄糖后需要用到　　　　　　　　（微生物）发酵产生酒精，可以使用　　　　　　　　检测产物是否为酒精，该试剂在酸性条件下可与酒精反应，溶液呈灰绿色。

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A．随着全球环境污染严重，石油资源逐步减少，近年来乙醇等“绿色能源”的开发备受关注。科技工作者研制出利用秸秆生产燃料酒精的技术，大致流程如下图所示。
（1）若要从土壤中分离出能分解植物秸秆的微生物，培养基中的碳源是____________,对该培养基可采取________________的方法进行灭菌。
（2）某同学对分离得到的微生物培养液进行数量测定,在稀释倍数为105对应的培养基中测定平板上菌落数的平均值为23．4，则每毫升样品中的细菌数是（涂布平板时稀释液的体积为0．2mL）_________________。
（3）用上述方法测定目的菌的密度，实际活菌数量要比测得的菌落数量多，原因是________________。
（4）上述流程图中，糖液发酵产生酒精需要的菌种是_________________，酒精是在目的菌的________（结构）中产生的。
B．马铃薯块莲含有大量的淀粉，富含多种维生素和无机盐，我国已将马铃薯作为主粮产品进行产业化开发。下图是转基因抗盐马铃薯的培育过程，请分析回答问题：
（1）为获取抗盐基因,可以从碱蓬细胞研磨液中提取抗盐基因的___________来合成cDNA。
（2）上图构建基因表达载体时，最好选用___________酶切割含目的基因的外源DNA和质粒，不能使用Sma I切割的原因是_______________。构建好的重组质粒在抗盐基因前要加上特殊的启动子，启动子是一段有特殊结构的___________片段。
（3）将基因表达载体导入农杆菌中的Ti质粒上的T—DNA上的原因是__________。通过农杆菌的转化作用，使抗盐基因插入到马铃薯细胞中的染色体DNA上，从而使抗盐基因的遗传特性得以__________。
（4）上图转基因抗盐马铃薯培育过程中，属于脱分化阶段的是_____________（填序号）。从个体水平上检验转基因抗盐马铃薯是否培育成功的方法是____________。

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随着全球环境污染严重，石油资源逐步减少，近年来乙醇等“绿色能源”的开发备受关注。科技工作者研制出利用秸秆生产燃料酒精的技术，大致流程如图所示。
（1）若要从土壤中分离出能分解植物秸秆的微生物，培养基中的碳源是________________，对该培养基可采取__________的方法进行灭菌。　　
（2）某同学对分离得到的微生物培养液进行数量测定，在稀释倍数为105对应的培养基中测定平板上菌落数的平均值为23.4，则每毫升样品中的细菌数是（涂布平板时稀释液的体积为0.2mL）________。　　
（3）用上述方法测定目的菌的密度，实际活菌数量要比测得的菌落数量多，原因是__________。
（4）上述流程图中，糖液发酵产生酒精需要的菌种是________，酒精是在目的菌的______（结构）中产生的。酒精发酵和醋酸发酵的不同点有_________。

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【生物——选修1　　生物技术实践】
随着环境污染的加剧和石油危机出现，越来越多的国家使用乙醇作为代替燃料，生产中玉米和麦草的秸秆可以用来生产燃料乙醇，已知秸秆的主要成分是纤维素，回答下列问题：
（1）人们首先利用纤维素分解菌将纤维素分解，纤维素分解菌多分布在__________的土壤中，该微生物产生的纤维素酶是一种复合酶，一般包括三种成分，_______________，__________________和__________________。前两种酶能使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。
（2）从土壤中筛选纤维素分解菌需要配制__________________培养基，该培养基中需要加入纤维素粉作为唯一的__________________。
（3）经过梯度稀释后，要将样品均匀涂布在用于鉴别纤维素分解菌的培养基上，在该培养基中需要加入的特殊染料是______，当形成菌落以后可以根据菌落周围是否产生_________来筛选纤维素分解菌。当利用涂布器涂布平板之后需要对涂布器进行__________处理。（添“消毒”或者“灭菌”）
（4）产生葡萄糖后需要用到____________（微生物种类）发酵产生酒精，还可以使用_________检测产物是否为酒精，该试剂在酸性条件下可与酒精反应，溶液呈灰绿色。

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运用所学知识回答下列与生物技术实践相关的问题。
（1）某科普实验小组欲从石油污染的水域中筛选出能高效降解石油的微生物。请回答：
①从水体中分享纯化菌种时，若要获得纯净的菌株，常采用平板划线的方法进行接种，此过程所用的接种工具是＿＿＿，操作时采用＿＿＿灭菌的方法。
②在筛选过程中，应将稀释接种于以石油为唯一碳源的固体培养基上，在微生物培养前，需对培养基进行＿＿＿，该培养基从功能上看属于＿＿＿＿
（2）进行月季花药离体培养时，选择合适发育时期的花粉能提高诱导成功率，确定花粉发育时期最常用的染色方法是＿＿＿＿＿。花药经脱分化产生胚状体还是愈伤组织主要取决于培养基中＿＿＿＿
（3）葡萄皮、籽中含有原花青素、葡萄皮红素和大量葡萄风味物质等，这些物质易溶于乙醇、乙酸乙酯中，因此常采用＿＿＿＿法来分离提取，还可以用＿＿＿＿和蒸馏等提取什物芳香油的方法。

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