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科研人员通过基因工程实现了β-甘露聚糖酶基因在猪肠道野生酵母菌中的表达，使原来不能被猪利用的粗纤维在猪肠道内被分解成了可直接吸收的单糖。下图为构建工程菌的部分过程，其中介导序列能引导载体整合到酵母菌的染色体DNA上。请回答。
（1）①过程中需要的工具酶是___________，②、③过程中需要的工具酶是___________。
（2）同尾酶是指切割DNA分子后能产生相同黏性末端的限制酶，图中4种限制酶中属于同尾酶的是___________。
（3）重组表达载体中的介导序列引导目的基因整合到酵母菌的染色体DNA上，其意义在于___________。
（4）①过程从野生酵母菌染色体DNA中PCR扩增介导序列时，科研人员设计了如下一对引物: 
GACCTCAAATCAGGTAGG 和 TTGCATTGACTTACA
，其中下划线部分序列的设计依据是___________，方框部分序列的设计目的是___________________。
（5）对重组表达载体进行酶切鉴定，假设所用的酶均可将识别位点完全切开。若使用 EcoRⅠ和SaⅠ酶切，可得到____________种DNA片段。若使用EcoRⅠ和BamHⅠ酶切，可得到____________种DNA片段。
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科研人员通过基因工程实现了β-甘露聚糖酶基因在猪肠道野生酵母菌中的表达，使原来不能被猪利用的粗纤维在猪肠道内被分解成可直接吸收的单糖。下图为构建工程菌的部分过程，其中介导序列能引导载体整合到酵母菌的染色体DNA上。请据图回答：
(1)①过程中需要的工具酶是___________，其最适温度的范围一般是___________(a.55~60℃，b.70~75℃，c.90~95℃)。②③过程中的工具酶作用的化学键是___________。
(2)①过程从野生酵母菌染色体DNA中PCR扩增介导序列时，科研人员设计了如下一对引物：
和
，其中下划线部分序列的设计依据是___________，方框部分序列的设计目的是___________。
(3)若 Bamh I酶切的DNA末端与BglⅡ酶切的DNA末端可以被DNA连接酶连接，原因是___________，连接的部位，这两种酶___________(填“都能”、“都不能”或“只有一种能”)切开，原因是___________。
(4)若使用EcoRⅠ和Sal I酶对重组表达载体进行完全酶切并鉴定，可得到___________种DNA片段。
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科研人员通过基因工程实现了β-甘露聚糖酶基因在猪肠道野生酵母菌中的表达，使原来不能被猪利用的粗纤维在猪肠道内被分解成可直接吸收的单糖。下图为构建工程菌的部分过程，其中介导序列能引导载体整合到酵母菌的染色体DNA上。请据图回答：
(1)①过程中需要的工具酶是___________，其最适温度的范围一般是___________(a.55~60℃，b.70~75℃，c.90~95℃)。②③过程中的工具酶作用的化学键是___________。
(2)①过程从野生酵母菌染色体DNA中PCR扩增介导序列时，科研人员设计了如下一对引物：
和
，其中下划线部分序列的设计依据是___________，方框部分序列的设计目的是___________。
(3)若 Bamh I酶切的DNA末端与BglⅡ酶切的DNA末端可以被DNA连接酶连接，原因是___________，连接的部位，这两种酶___________(填“都能”、“都不能”或“只有一种能”)切开，原因是___________。
(4)若使用EcoRⅠ和Sal I酶对重组表达载体进行完全酶切并鉴定，可得到___________种DNA片段。
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科研人员通过基因工程实现了β-甘露聚糖酶基因在猪肠道野生酵母菌中的表达，使原来不能被猪利用的粗纤维在猪肠道内被分解成了可直接吸收的单糖。下图为构建工程菌的部分过程，其中介导序列能引导载体整合到酵母菌的染色体DNA上。请回答。
（1）①过程中需要的工具酶是___________，②、③过程中需要的工具酶是___________。
（2）同尾酶是指切割DNA分子后能产生相同黏性末端的限制酶，图中4种限制酶中属于同尾酶的是___________。
（3）重组表达载体中的介导序列引导目的基因整合到酵母菌的染色体DNA上，其意义在于___________。
（4）①过程从野生酵母菌染色体DNA中PCR扩增介导序列时，科研人员设计了如下一对引物: GACCTCAAATCAGGTAGG 和 TTGCATTGACTTACA，其中下划线部分序列的设计依据是___________，方框部分序列的设计目的是___________________。
（5）对重组表达载体进行酶切鉴定，假设所用的酶均可将识别位点完全切开。若使用 EcoRⅠ和SaⅠ酶切，可得到____________种DNA片段。若使用EcoRⅠ和BamHⅠ酶切，可得到____________种DNA片段。
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豆科植物细胞壁中含有大量不能被猪消化的甘露聚糖。研究人员通过基因工程等技术培育出转甘露聚糖酶基因（manA）猪，主要流程如下图，图中PSP为猪唾液腺分泌蛋白基因启动子，neo为新霉素抗性基因。请回答下列问题：
（1）PCR过程中，温度降低到55℃的目的是_______________________________。
（2）步骤②中选择将manA基因插入PSP后面的目的是___________________。
（3）进行早期胚胎培养时，通常将其置于通入混合气体的培养箱中培养，其中CO2的主要作用是____________________；另外，需定期更换培养液，目的是___________________。
（4）步骤⑥中，通常选择发育到______________阶段的胚胎成功率较高。
（5）与饲养普通猪相比，饲养转基因猪的优势是____________________________。
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豆科植物细胞壁中含有大量不能被猪消化的甘露聚糖。研究人员通过基因工程等技术培育出转甘露聚糖酶基因（manA）猪，主要流程如下图，图中PSP为猪唾液腺分泌蛋白基因启动子，neo为新霉素抗性基因。请回答下列问题：
（1）步骤①PCR过程中加入引物的原因是Taq酶_______________________。
（2）步骤②中选择将manA基因插入PSP后的目的是___________________________。步骤③常用的方法是________________________。步骤④中使用的猪卵母细胞应处于____________期。用物理或化学方法激活受体细胞的目的是_______________________。
（3）步骤⑤前需要对受体猪群进行同期发情处理，其目的是____________，步骤⑥中，科研人员发现选择4〜6细胞期的胚胎进行移植成功率最高最可能的原因是_______________________。
（4）与饲养普通猪相比，饲养转基因猪的优势是________________________。
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豆科植物细胞壁中含有大量不能被猪消化的甘露聚糖。研究人员通过基因工程等技术培育出转甘露聚糖酶基因（manA）猪，主要流程如下图，图中PSP为猪唾液腺分泌蛋白基因启动子，neo为新霉素抗性基因。请回答下列问题：
（1）PCR过程中，温度降低到55℃的目的是_______________________________。
（2）步骤②中选择将manA基因插入PSP后面的目的是___________________。
（3）进行早期胚胎培养时，通常将其置于通入混合气体的培养箱中培养，其中CO2的主要作用是____________________；另外，需定期更换培养液，目的是___________________。
（4）步骤⑥中，通常选择发育到______________阶段的胚胎成功率较高。
（5）与饲养普通猪相比，饲养转基因猪的优势是____________________________。
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普通棉花中含β-甘露糖苷酶基因（GhMnaA2），能在纤维细胞中特异性表达，产生的β-甘露糖苷酶催化半纤维素降解，棉纤维长度变短。为了培育新的棉花品种，科研人员构建了反义GhMnaA2基因表达载体，利用农杆菌转化法导入棉花细胞，成功获得转基因棉花品种，具体过程如下。请分析回答：
（1）①和②过程中所用的限制性内切酶分是 、 。
（2）基因表达载体除了图示组成外，至少有 等（至少答两个）。
（3）③过程中用酶切法可鉴定正、反义表达载体。用SmaⅠ酶和NotⅠ酶完全切割正义基因表达载体获得0．05kb、3．25kb、5．95kb、9．45kb四种长度的DNA片段，则用NotⅠ酶切反义基因表达载体获得DNA片段的长度应是 和 。
（4）④过程中利用农杆菌介导转化棉花细胞的过程中，整合到棉花细胞染色体DNA的区段是 ，转化后的细胞再通过 形成植物体。
（5）导入细胞内的反义GhMnaA2转录的mRNA能与细胞内的GhMnaA2转录的mRNA互补配对，从而 （促进或抑制）基因的表达，其意义是 。
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普通棉花中含β—甘露糖苷酶基因（GhMnaA2）,能在纤维细胞中特异性表达，产生的β—甘露糖苷酶催化半纤维素降解，棉纤维长度变短。为了培育新的棉花品种，科研人员构建了反义GhMnaA2基因表达载体，利用农杆菌转化法导入棉花细胞，成功获得转基因棉花品种，具体过程如图，请分析回答：
（1）①和②过程中所用的限制性核酸内切酶分别是____________、___________。
（2）③过程中用酶切法可鉴定正、反义表达载体。用SmaⅠ酶和NotⅠ酶完全切割正义基因表达载体获得0.05kb、3.25kb、5.95kb、9.45kb四种长度的DNA片段，则用NotⅠ酶切反义基因表达载体获得DNA片段的长度应是__________和_____________。
（3）导入细胞内的反义GhMnaA2转录的mRNA能与细胞内的GhMnaA2转录的mRNA互补配对，从而抑制基因的表达，其意义是：_____________________________。
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普通棉花中含β-甘露糖苷酶基因（GhMnaA2），能在纤维细胞中特异性表达，产生的β-甘露糖苷酶催化半纤维素降解，棉纤维长度变短。为了培育新的棉花品种，科研人员构建了反义GhMnaA2基因表达载体，利用农杆菌转化法导入棉花细胞，成功获得转基因棉花品种，具体过程如下。请分析回答：
（1）①和②过程中所用的限制性内切酶分是 、 。
（2）基因表达载体除了图示组成外，至少有 等（至少答两个）。
（3）③过程中用酶切法可鉴定正、反义表达载体。用SmaⅠ酶和NotⅠ酶完全切割正义基因表达载体获得0．05kb、3．25kb、5．95kb、9．45kb四种长度的DNA片段，则用NotⅠ酶切反义基因表达载体获得DNA片段的长度应是 和 。
（4）④过程中利用农杆菌介导转化棉花细胞的过程中，整合到棉花细胞染色体DNA的区段是 ，转化后的细胞再通过 形成植物体。
（5）导入细胞内的反义GhMnaA2转录的mRNA能与细胞内的GhMnaA2转录的mRNA互补配对，从而 （促进或抑制）基因的表达，其意义是 。
GACCTCAAATCAGGTAGG 和 TTGCATTGACTTACA
，其中下划线部分序列的设计依据是___________，方框部分序列的设计目的是___________________。