豆科植物细胞壁中含有大量不能被猪消化的甘露聚糖。研究人员通过基因工程等技术培育出转甘露聚糖酶基因（manA）猪，主要流程如下图，图中PSP为猪唾液腺分泌蛋白基因启动子，neo为新霉素抗性基因。请回答下列问题：
（1）步骤①PCR过程中加入引物的原因是Taq酶_______________________。
（2）步骤②中选择将manA基因插入PSP后的目的是___________________________。步骤③常用的方法是________________________。步骤④中使用的猪卵母细胞应处于____________期。用物理或化学方法激活受体细胞的目的是_______________________。
（3）步骤⑤前需要对受体猪群进行同期发情处理，其目的是____________，步骤⑥中，科研人员发现选择4〜6细胞期的胚胎进行移植成功率最高最可能的原因是_______________________。
（4）与饲养普通猪相比，饲养转基因猪的优势是________________________。
高三生物非选择题困难题
豆科植物细胞壁中含有大量不能被猪消化的甘露聚糖。研究人员通过基因工程等技术培育出转甘露聚糖酶基因（manA）猪，主要流程如下图，图中PSP为猪唾液腺分泌蛋白基因启动子，neo为新霉素抗性基因。请回答下列问题：
（1）PCR过程中，温度降低到55℃的目的是_______________________________。
（2）步骤②中选择将manA基因插入PSP后面的目的是___________________。
（3）进行早期胚胎培养时，通常将其置于通入混合气体的培养箱中培养，其中CO2的主要作用是____________________；另外，需定期更换培养液，目的是___________________。
（4）步骤⑥中，通常选择发育到______________阶段的胚胎成功率较高。
（5）与饲养普通猪相比，饲养转基因猪的优势是____________________________。
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豆科植物细胞壁中含有大量不能被猪消化的甘露聚糖。研究人员通过基因工程等技术培育出转甘露聚糖酶基因（manA）猪，主要流程如下图，图中PSP为猪唾液腺分泌蛋白基因启动子，neo为新霉素抗性基因。请回答下列问题：
（1）步骤①PCR过程中加入引物的原因是Taq酶_______________________。
（2）步骤②中选择将manA基因插入PSP后的目的是___________________________。步骤③常用的方法是________________________。步骤④中使用的猪卵母细胞应处于____________期。用物理或化学方法激活受体细胞的目的是_______________________。
（3）步骤⑤前需要对受体猪群进行同期发情处理，其目的是____________，步骤⑥中，科研人员发现选择4〜6细胞期的胚胎进行移植成功率最高最可能的原因是_______________________。
（4）与饲养普通猪相比，饲养转基因猪的优势是________________________。
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豆科植物细胞壁中含有大量不能被猪消化的甘露聚糖。研究人员通过基因工程等技术培育出转甘露聚糖酶基因（manA）猪，主要流程如下图，图中PSP为猪唾液腺分泌蛋白基因启动子，neo为新霉素抗性基因。请回答下列问题：
（1）PCR过程中，温度降低到55℃的目的是_______________________________。
（2）步骤②中选择将manA基因插入PSP后面的目的是___________________。
（3）进行早期胚胎培养时，通常将其置于通入混合气体的培养箱中培养，其中CO2的主要作用是____________________；另外，需定期更换培养液，目的是___________________。
（4）步骤⑥中，通常选择发育到______________阶段的胚胎成功率较高。
（5）与饲养普通猪相比，饲养转基因猪的优势是____________________________。
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植物细胞壁中存在大量不能被猪消化的多聚糖类物质，如半纤维素多聚糖、果胶质（富含有半乳 糖醛酸的多聚糖）等。研究人员通过基因工程、胚胎工程等技术培育出转多聚糖酶基因（manA）猪，主要流程如下 图（neo 为新霉素抗性基因）。
（1）将该重组质粒成功导入受体细胞后，经培养，发现约有 50%的细胞能正常表达目的基因产物，原因 是_____________________________________________________________。通过①过程获得的重组质粒含有 4.9 kb 个碱基对，其中 manA 基因含有 1.8 kb 个碱基对。若用 BamH Ⅰ和 EcoR Ⅰ联合酶切割其中一种重组质粒，只能获得 1.7 kb 和 3.2 kb 两种 DNA 片段，若用上述联合酶切割同等长度的另一种重组质粒，则可获得__________kb 长度两种的 DNA 片段。
（2）图 2 中，猪胎儿成纤维细胞一般选择传代培养 10 代以内的细胞，原因是__________________________________，猪 的卵母细胞一般要培养到__________期。
（3）在④过程的早期胚胎培养时，通常需要定期更换培养液，目的是______________________________________________，一 般培养到__________阶段，可向受体移植。
（4）⑤过程前，通常需对受体母猪注射孕激素，对其进行__________处理。
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植物细胞壁中存在大量不能被猪直接消化的多聚糖类物质，如纤维素、果胶等。科研人员通过基因工程、胚胎工程等技术培育出转多聚糖酶基因(manA)猪，主要流程如下图(注：neo为新霉素抗性基因)。请分析回答下列问题：
（1）运用 PCR 技术扩增 DNA 分子时，需经过变性→复性→_____的重复过程，变性过程需要加热到 90-95℃，目的是_______________。
（2）图中[①]_______________，是基因工程操作程序中的核心步骤。多聚糖酶基因一定要插入到运载体的启动子和终止子之间，目的是_______________，图中过程②常用的方法是_______________。
（3）图中过程③采用的是细胞工程中的_____________技术，在过程④的早期胚胎培养时，通常需要定期更换培养液，目的是_______________。与普通猪相比，该转基因猪的优势是_______________。
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科研人员通过基因工程实现了β-甘露聚糖酶基因在猪肠道野生酵母菌中的表达，使原来不能被猪利用的粗纤维在猪肠道内被分解成了可直接吸收的单糖。下图为构建工程菌的部分过程，其中介导序列能引导载体整合到酵母菌的染色体DNA上。请回答。
（1）①过程中需要的工具酶是___________，②、③过程中需要的工具酶是___________。
（2）同尾酶是指切割DNA分子后能产生相同黏性末端的限制酶，图中4种限制酶中属于同尾酶的是___________。
（3）重组表达载体中的介导序列引导目的基因整合到酵母菌的染色体DNA上，其意义在于___________。
（4）①过程从野生酵母菌染色体DNA中PCR扩增介导序列时，科研人员设计了如下一对引物: 
GACCTCAAATCAGGTAGG 和 TTGCATTGACTTACA
，其中下划线部分序列的设计依据是___________，方框部分序列的设计目的是___________________。
（5）对重组表达载体进行酶切鉴定，假设所用的酶均可将识别位点完全切开。若使用 EcoRⅠ和SaⅠ酶切，可得到____________种DNA片段。若使用EcoRⅠ和BamHⅠ酶切，可得到____________种DNA片段。
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科研人员通过基因工程实现了β-甘露聚糖酶基因在猪肠道野生酵母菌中的表达，使原来不能被猪利用的粗纤维在猪肠道内被分解成可直接吸收的单糖。下图为构建工程菌的部分过程，其中介导序列能引导载体整合到酵母菌的染色体DNA上。请据图回答：
(1)①过程中需要的工具酶是___________，其最适温度的范围一般是___________(a.55~60℃，b.70~75℃，c.90~95℃)。②③过程中的工具酶作用的化学键是___________。
(2)①过程从野生酵母菌染色体DNA中PCR扩增介导序列时，科研人员设计了如下一对引物：
和
，其中下划线部分序列的设计依据是___________，方框部分序列的设计目的是___________。
(3)若 Bamh I酶切的DNA末端与BglⅡ酶切的DNA末端可以被DNA连接酶连接，原因是___________，连接的部位，这两种酶___________(填“都能”、“都不能”或“只有一种能”)切开，原因是___________。
(4)若使用EcoRⅠ和Sal I酶对重组表达载体进行完全酶切并鉴定，可得到___________种DNA片段。
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科研人员通过基因工程实现了β-甘露聚糖酶基因在猪肠道野生酵母菌中的表达，使原来不能被猪利用的粗纤维在猪肠道内被分解成可直接吸收的单糖。下图为构建工程菌的部分过程，其中介导序列能引导载体整合到酵母菌的染色体DNA上。请据图回答：
(1)①过程中需要的工具酶是___________，其最适温度的范围一般是___________(a.55~60℃，b.70~75℃，c.90~95℃)。②③过程中的工具酶作用的化学键是___________。
(2)①过程从野生酵母菌染色体DNA中PCR扩增介导序列时，科研人员设计了如下一对引物：
和
，其中下划线部分序列的设计依据是___________，方框部分序列的设计目的是___________。
(3)若 Bamh I酶切的DNA末端与BglⅡ酶切的DNA末端可以被DNA连接酶连接，原因是___________，连接的部位，这两种酶___________(填“都能”、“都不能”或“只有一种能”)切开，原因是___________。
(4)若使用EcoRⅠ和Sal I酶对重组表达载体进行完全酶切并鉴定，可得到___________种DNA片段。
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科研人员通过基因工程实现了β-甘露聚糖酶基因在猪肠道野生酵母菌中的表达，使原来不能被猪利用的粗纤维在猪肠道内被分解成了可直接吸收的单糖。下图为构建工程菌的部分过程，其中介导序列能引导载体整合到酵母菌的染色体DNA上。请回答。
（1）①过程中需要的工具酶是___________，②、③过程中需要的工具酶是___________。
（2）同尾酶是指切割DNA分子后能产生相同黏性末端的限制酶，图中4种限制酶中属于同尾酶的是___________。
（3）重组表达载体中的介导序列引导目的基因整合到酵母菌的染色体DNA上，其意义在于___________。
（4）①过程从野生酵母菌染色体DNA中PCR扩增介导序列时，科研人员设计了如下一对引物: GACCTCAAATCAGGTAGG 和 TTGCATTGACTTACA，其中下划线部分序列的设计依据是___________，方框部分序列的设计目的是___________________。
（5）对重组表达载体进行酶切鉴定，假设所用的酶均可将识别位点完全切开。若使用 EcoRⅠ和SaⅠ酶切，可得到____________种DNA片段。若使用EcoRⅠ和BamHⅠ酶切，可得到____________种DNA片段。
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烟草是有重要经济价值的双子叶植物，易受TMV（烟草花叶病毒）感染导致大幅度减产。绞股蓝细胞中含有抗TMV基因，能抵抗TMV感染。研究人员利用转基因技术培育出了抗TMV烟草，操作流程如图所示。
(1)①表示遗传信息流动中的_________过程，过程③所需要的工具酶是____________。
(2)目的基因大量扩增可以使用PCR技术，该技术包括变性、退火、延伸三个步骤，变性这一步骤的目的是___________。
(3)过程④最常用的方法是___________，过程⑤用到的细胞工程技术是________。
(4)过程⑥还需要进行基因工程操作步骤中的__________，在个体水平上检验获得的烟草能否抗TMV的方法是______________________。
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