自生固氮菌可不与其它植物共生，能独立完成固氮作用，在农业生产中具有广泛的用途。研究人员欲从...

自生固氮菌可不与其它植物共生，能独立完成固氮作用，在农业生产中具有广泛的用途。研究人员从土壤中筛选高效的自生固氮菌株，并对其固氮能力进行了研究。请回答下列问题：

（1）在配制含琼脂的培养基和倒平板的过程中，下列选项不需要的是________（填序号）

①酒精灯 ②接种环 ③高压蒸汽灭菌锅 ④棉塞

（2）要从土壤样品中分离出自生固氮菌，在获得土壤浸出悬液后，可以采用稀释涂布平板法将菌液涂布于________培养基上进行筛选。

（3）在涂布平板时，滴加到培养基表面的菌液量不宜过多的原因是_________________________________。

（4）涂布培养四天后，可通过观察________的形态特征来统计土壤中自身固氮菌的种类。

（5）为了进一步筛选高效固氮菌，研究人员将上述获得的等量的四种固氮菌分别接种到等量的液体培养基中进行振荡培养相同时间后，对固氮菌进行计数并测定培养液中的含氮量，结果如下表：

甲菌    乙菌    丙菌    丁菌

菌量（个/mL）    2.1×105    2.5×105    1.8×105    2.0×105

含氮量（K）    3.32    4.38    5.34    5.32

①培养过程中需不断振荡的目的是__________________________________________________。

②可以采用________方法对固氮菌进行计数，假设计数室长和宽均为1mm，深0.1 mm，每个小方格中平均有7个固氮菌，则10mL培养液中有固氮菌的数量为________个；如果小方格中固氮菌的数量太多，无法数清，则应________。

③由上述结果可知，________菌的固氮效率最高。

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自生固氮菌可不与其它植物共生，能独立完成固氮作用，在农业生产中具有广泛的用途。研究人员从土壤中筛选高效的自生固氮菌株，并对其固氮能力进行了研究。

请回答下列问题：

（1）在配制含琼脂的培养基和倒平板的过程中，下列选项不需要的是________（填序号）

①酒精灯 ②接种环 ③高压蒸汽灭菌锅 ④棉塞

（2）要从土壤样品中分离出自生固氮菌，在获得土壤浸出悬液后，可以采用稀释涂布平板法将菌液涂布于________培养基上进行筛选。

（3）在涂布平板时，滴加到培养基表面的菌液量不宜过多的原因是_______________________。

（4）涂布培养四天后，可通过观察________的形态特征来统计土壤中自身固氮菌的种类。

（5）为了进一步筛选高效固氮菌，研究人员将上述获得的等量的四种固氮菌分别接种到等量的液体培养基中进行振荡培养相同时间后，对固氮菌进行计数并测定培养液中的含氮量，结果如下表：

①培养过程中需不断振荡的目的是________________________。

②可以采用________方法对固氮菌进行计数，假设计数室长和宽均为1 mm，深0.1 mm，每个小方格中平均有7个固氮菌，则10 mL培养液中有固氮菌的数量为________个；如果小方格中固氮菌的数量太多，无法数清，则应________。

③由上述结果可知，________菌的固氮效率最高。

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自生固氮菌可不与其它植物共生，能独立完成固氮作用，在农业生产中具有广泛的用途。研究人员欲从土壤中筛选高效的自生固氮菌株进行研究。请回答下列问题：

（1）在配制含琼脂的培养基和倒平板的过程中，下列选项不需要的是________(填序号）。

①酒精灯　 ②接种环　 ③高压蒸汽灭菌锅　 ④棉塞

（2）要从土壤样品中分离出自生固氮菌，在获得土壤浸出悬液后，可以采用稀释涂布平板法将菌液涂布于________培养基上进行筛选。在下图所示的四种菌落分布图中，不可能是用该方法得到的是_______。

（3）稀释涂布平板法还可用于检验土壤中自生固氮菌的含量，上图中用该方法得到的菌落分布图中，最符合计数要求的是图中的_________。用该方法统计样本菌落数时是否需要设置对照组？__________。为什么？______________________________________。

（4）分别取0.1mL、已稀释103倍的土壤浸出液，分别涂布到3个琼脂固体培养基的表面进行培养，培养基记录到自生固氮菌的菌落平均数为130。则每g土样中自生固氮菌为__________。该方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，原因是____________。

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自生固氮细菌能独立完成固氮作用，在农业生产中具有广泛的用途。研究人员从土壤中筛选高效的自生固氮细菌菌株，并对其固氮能力进行了研究。请回答下列问题：

（1）要从土壤样品中分离出自生固氮细菌，在获得土壤浸出液后，将浸出液加入到_________(选择、鉴定）培养基中培养，目的是___________，然后再吸取适量的培养液，采用稀释涂布平板法涂布于_________(选择、鉴定）培养基上继续培养。

（2）为了进一步筛选高效固氮细菌，研究人员将上述获得的等量的四种固氮细菌分别接种到等量的液体培养基中进行振荡培养相同时间后，对固氮菌进行计数并定量测定培养液中的含氮量，结果如表：

由上述结果可知，_________菌的固氮效率最高，原因是___________________。

（3）固氮基因重组到水稻、小麦等经济作物细胞中，让植物本身直接固氮，这样可以免施或少施氮肥。这样就要先提取出固氮细菌的DNA，某研究小组甲同学设计了一个提取DNA的方案：破碎细菌细胞，将初步过滤的细菌细胞匀浆加入到2mol/LNaCl溶液中，过滤，则DNA留在___________(填“沉淀”或“滤液”）中。经过一系列操作后，析出的DNA可用_____________试剂进行鉴定。

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自生固氮菌能独立完成固氮作用，在农业生产中具有广泛的用途，研究人员欲从土壤中筛选出自生固氮菌株。请回答下列问题：

（1）某些细菌能分解尿素是因为其含有 ________，某些细菌能分解纤维素是因为其含有____________，那么能完成固氮作用的微生物应含有____________，要从土壤样品中分离出自生固氮菌，可在土壤浸出悬液后，采用稀释涂布平板法将菌液涂布于缺少___________的培养基上进行筛选。

（2）纯化自生固氮菌的培养接种方法主要有稀释涂布平板法和__________________ 法两种，其中_______________ 法还用来统计样品中活菌的数目。

（3）实验结束后，使用过的培养基应该进行___________处理后再扔掉，其中高压蒸汽灭菌的条件是______________，维持15～30 min。

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自生固氮菌能独立完成固氮作用，在农业生产中具有广泛的用途，研究人员欲从土壤中筛选出自身固氮菌菌株。请回答下列问题：

（1）培养微生物的培养基中，一般都含有水、________________、氮源和无机盐。对培养基进行灭菌的常用方法是________________，要从土壤样品中分离出自身固氮菌，在获得土壤浸出悬液后，可以采用稀释涂布平板法将菌液涂布于缺________________的培养基上进行筛选。

（2）在涂布平板时，滴加到培养基表面的菌液量不易过多的原因是________________，涂布培养四天后，可通过观察________________的形态特征来统计土壤中自生固氮菌的种类。

（3）纯化自身固氮菌培养的接种方法主要有稀释涂布平板法和________________法两种。

（4）实验结束后，使用过的培养基应该进行________________处理后，才能扔掉。

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我省是农业大省，向土壤中添加农作物秸秆，通过微生物作用加以分解，可有效改良土壤。安徽农业大学某研究小组欲筛选农作物秸秆纤维素分解菌及自生固氮菌(能够独立进行固氮的细菌)，组成复合微生物添加剂用以改善我省土质。下表为本实验两种相关培养基配方，请回答：

（1）两种培养基中，能用于筛选自生固氮菌的是___________，理由是___________。另一种培养基中需加入___________，筛选纤维素分解菌。

（2）筛选出纤维素分解菌(命名为X)后，需进行农作物秸秆降解能力测定，农作物秸秆主要为X提供___________。

（3）分离纯化得到自生固氮菌(命名为N)并对其进行发酵培养，要测定发酵液中该菌的数目，可在显微镜下用___________直接计数，该方法的测量值比活菌的实际数目________。

（4）无菌操作下在相关培养基上均匀涂布N(或X)，晾干后在其表面接种X(或N)，适宜条件下培养一段时间后，若X(或N)周围___________(填“有”或“无”)抑菌圈(细菌生长受到抑制形成的透明圈)出现，则两种微生物适合联合施用，原因是________________。

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近年来，化肥对农业生产的负面影响及对环境的污染日益引起人们的关注。由于固氮菌能固定大气中的氮气，提高土壤的氮含量，从而分离得到自生固氮菌（不与植物形成共生体）用以对土壤进行接种已成为一个新的研究方向。下表是微生物培养时常用的两种培养基，回答下列问题

（1）分离固氮菌选用_________（填甲或乙）培养基。从土壤深度看，选_________（填表层或深层）的土壤容易得到自生固氮菌的菌种，获得的土样用_________溶解后备用。

（2）接种前，将灭过菌的培养基放在37℃的恒温箱中培养24h，目的是_________。

（3）用接种环蘸取少许稀泥浆，在培养基表面轻点15-20处，此操作过程中需对接种环进行_______次灼烧灭菌。接好种的培养皿要在_________处写明实验内容、接种人和日期。培养3-4天后可在接种的稀泥浆周围看到黏膜液状培养物，这是含有自生固氮菌的标志。

（4）某特定染液能使自生固氮菌着色，挑取黏液，用该染液染色后制成涂片，制成的涂片在_________（填低倍或高倍）显微镜下观察固氮菌的形态特征。筛选到的菌落需进一步分离纯化，纯化自生固氮菌的培养接种方法最常用的两种是__________________

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近年来，化肥对农业生产的负面影响及对环境的污染日益引起人们的关注。由于固氮菌能固定大气中的氮气，提高土壤的氮含量，因而分离得到自生固氮菌（不与植物形成共生体）用以对土壤进行接种已成为一个新的研究方向。下表是微生物培养时常用的两种培养基，回答下列问题：

（1）分离固氮菌选用___(填“甲”或“乙”）培养基。从土壤深度看，选填____ ( “表层”或“深层”）的土壤容易得到自生固氮菌的菌种，获得的土样用______溶解后备用。

（2）接种前，将灭过菌的培养基放在37℃的恒温箱中培养24h，目的是______。

（3）用接种环蘸取少许稀泥浆，在培养基表面轻点15～20处，此操作过程中需对接种环进行______次灼烧灭菌。接好种的培养皿要在______处写明实验内容、接种人和日期。培养3～4天后可在接种的稀泥浆周围看到黏膜液状培养物，这是含有自生固氮菌的标志。

（4）某特定染液能使自生固氮菌着色，挑取黏液，用该染液染色后制成涂片，制成的涂片在______（填“低倍”或“高倍”）显微镜下观察固氮菌的形态特征。筛选到的菌落需进一步分离纯化，纯化自生固氮菌的培养接种方法最常用的两种是______。

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我省属黄土高原半干旱地区，向土壤中添加玉米秸秆，通过微生物作用加以分解，可有效改良土壤。中北大学某研究小组欲筛选玉米秸秆纤维素分解菌及自生固氮菌(能够独立进行固氮的细菌)，组成复合微生物添加剂用以改善我省土质。下表为本实验两种相关培养基配方，请回答：

(1)两种培养基中，能用于筛选自生固氮菌的是___________，理由是___________。另一种培养基中需加入___________，筛选纤维素分解菌。

(2)筛选出纤维素分解菌(命名为X)后，需进行玉米秸秆降解能力测定，玉米秸秆主要为X提供___________。

(3)分离纯化得到自生固氮菌(命名为N)并对其进行发酵培养，要测定发酵液中该菌的数目，可在显微镜下用___________直接计数，该方法的测量值比活菌的实际数目___________。

(4)无菌操作在相关培养基上均匀涂布N(或X)，晾干后在其表面接种X(或N)，适宜条件下培养一段时间后，若X(或N)周围___________(填“有”或“无”)抑菌圈(细菌生长受到抑制形成的透明圈)出现，则两种微生物适合联合施用，原因是___________。

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