已知图1为质粒、图2为含有目的基因的DNA片段，下表为有关限制酶的识别序列和切割位点。请回答下列问题：
（1）用图中质粒和目的基因构建重组质粒，应选用______两种限制酶切割，切割后的末端为______（填“黏性末端”、“平末端”或“黏性末端和平末端”），故应选用___________酶来连接载体和目的基因。
（2）为筛选出含有目的基因的大肠杆菌，应在培养基中添加___________。
（3）在构建基因表达载体前，需要运用PCR技术对含有目的基因的DNA片段进行扩增。扩增时需要用到___________（填酶的名称）和图2中的引物是___________。
（4）在基因工程药物的生产中，常选用大肠杆菌作受体细胞，其原因是______________________。
高二生物非选择题中等难度题
已知图1为质粒、图2为含有目的基因的DNA片段，下表为有关限制酶的识别序列和切割位点。请回答下列问题：
（1）用图中质粒和目的基因构建重组质粒，应选用______两种限制酶切割，切割后的末端为______（填“黏性末端”、“平末端”或“黏性末端和平末端”），故应选用___________酶来连接载体和目的基因。
（2）为筛选出含有目的基因的大肠杆菌，应在培养基中添加___________。
（3）在构建基因表达载体前，需要运用PCR技术对含有目的基因的DNA片段进行扩增。扩增时需要用到___________（填酶的名称）和图2中的引物是___________。
（4）在基因工程药物的生产中，常选用大肠杆菌作受体细胞，其原因是______________________。
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基因工程重要环节是构建基因表达载体。图1为限制酶EcoRⅠ的识别序列和切割位点，图2表示DNA片段，图3表示目的基因及限制酶切点，图4表示质粒。请回答下列问题：
（1）若图2就是图1中的最左边显示的三个碱基对，则④⑤⑥⑦⑧⑨对应的碱基依次是________。限制酶EcoRⅠ切割外源DNA，切开的位置是图2中编号为______位置的________键。
（2）已知DNA复制子链的延伸方向是5′→3′，图3中的A、B、C、D在不同情况下可以作为引物，在PCR技术中，扩增此目的基因，应该选用________两个作为引物。该DNA分子在PCR仪中经过4次循环后会产生目的基因片段__________个。
（3）图4中，如果用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ对此质粒进行三种方法切割。第一种方法用其中一种酶、第二种方法用其中两种酶、第三种方法用其中三种酶分别切割，依次产生_______、_______、_____三种片段。
（4）用图中质粒和目的基因构建重组质粒，应选用____________________两种限制酶切割，酶切后的载体和目的基因片段，通过______________酶作用后获得重组质粒。为了扩增重组质粒，需将其转入经____________处理过的_____________态的大肠杆菌中。
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请回答下列有关基因工程的问题。下表是基因工程中几种限制酶识别序列及其切割位点。图是转基因香蕉的培育过程，含目的基因的外源DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点。
（1）从转基因香蕉培育图中反映了质粒作为运载体的特点是_______________答出其中两点即可），基因工程中还可以用_____________作为运载体。
（2）图中的质粒和目的基因构建重组质粒，不能使用SmaI酶切割，原因是_____________。
（3）下图是用___________ (限制）酶进行切割得到的目的基因。可以防止含目的基因的外源DNA片段切割后自身环化。
（4）人体细胞内含有抑制癌症发生的某基因，生物技术可对此类基因的变化进行检测。该基因含有800对碱基对(bp)，用BamHⅠ切割得到的400bp，200bp，200bp,．用EcoRⅠ再次切割得到100bp,300bp,150bp，50bp,200bp．而患者体内获取的这段基因，用BamHⅠ切割得到的区段变为400bp，400bp ，用EcoRⅠ再次切割得到100bp,300bp,150bp，250bp．在正常人体内BamHⅠ和EcoRⅠ识别序列分别有 _______个和_______个，患者体内发生了 ________________。
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下表是几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点，其中切割位点相同的酶不重复标注。请回答下列问题：
(1)用图中质粒和目的基因构建重组质粒，应选用_________两种限制酶切割，酶切后的载体和目的基因片段，通过_____酶作用后获得重组质粒。
(2)为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌，应在筛选平板培养基中添加_____，平板上长出的菌落，常用 PCR 鉴定，所用的引物组成为图2中_____。
(3)若BamHⅠ酶切的DNA末端与BclⅠ酶切的DNA末端连接，连接部位的6个碱基对序列为 _____，对于该部位，这两种酶_____(填“都能”“都不能”或“只有一种能”)切开。
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下表是几种限制酶识别序列及其切割位点，图 1、图 2 中标注了相关限制酶的酶切位点，其中切割位点相同的酶不重复标注。请回答下列问题：
(1)用图中质粒和目的基因构建重组质粒，应选用____________________两种限制酶切割，酶切后的载体和目的基因片段，通过______________酶作用后获得重组质粒。为了扩增重组质粒，需将其转入经____________处理过的_____________态的大肠杆菌中。
(2)为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌，应在筛选平板培养基中添加________________________。平板上长出的菌落，常用 PCR 鉴定，所用的引物组成为图2中的_____________。
(3)若BamH I 酶切的 DNA 末端与 Bcl I 酶切的 DNA 末端连接，连接部位的 6 个碱基对序列为______________________，对于该部位，这两种酶__________（填“都能”、 “都不能”或“只有一种能”）切开。
(4)若用 Sau3A I 切图 1 质粒最多可能获得________________种大小不同的 DNA 片段。
(5)图1中启动子的作用是__________________________________________________________。
(6)将目的基因导入棉花细胞，培育抗虫棉的过程涉及到哪些技术：_______________________________
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下表是几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点，其中切割位点相同的酶不重复标注。请回答下列问题：
（1）用图中质粒和目的基因构建重组质粒，应选用___________________________两种限制酶切割，酶切后的载体和目的基因片段，通过_____________酶作用后获得重组质粒。为了扩增重组质粒，需将其转入处于_____________态的大肠杆菌。
（2）为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌，应在筛选平板培养基中添加_____________，平板上长出的菌落，常用PCR鉴定，所用的引物组成为图2中_____________________________。
（3）若BamHI酶切的DNA末端与BclI酶切的DNA末端连接，连接部位的6个碱基对序列为___________________________，对于该部位，这两种酶_____________（填“都能”、“都不能”或“只有一种能”）切开。
（4）若用Sau3AI切图1质粒最多可能获得_______________种大小不同的DNA片段。
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下图甲表示限制酶EcoR I的识别序列和切割位点，图乙表示DNA片段，图丙表示质粒及限制酶的切割位点。下列分析正确的是（ ）
A.目的基因被EcoR I切割后将产生序列为—TTAA的平末端
B.限制酶作用于图乙中的①，DNA连接酶作用于②和③
C.用HindⅢ和Pst I两种限制酶切割质粒，不会影响含目的基因的受体细胞的筛选
D.用PstI和EcoR I两种限制酶切割质粒，有利于目的基因与质粒正确连接
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如图是含某目的基因的DNA片段，据图回答下列问题：
（1）若用EcoRⅠ限制酶获取其中的目的基因，其识别核苷酸序列及切割位点是___________。该DNA片段经切割后共形成_______个_____________（填“平”或“黏性”）末端。
（2）若图示DNA片段中EcoRⅠ限制酶识别序列的一个碱基突然改变，则可能发生的情况是_______________________________________。
（3）使用________________连接目的基因和载体，连接的是图中________(填字母)部位的___________________（化学键）。
（4）为了避免目的基因和质粒在酶切后产生的末端发生任意连接，需用两种限制酶XbaI和SacI(两种酶切出的粘性末端不同)同时切割含目的基因的DNA片段和质粒。若用Ti质粒作为目的基因的载体，应选用下图中何种Ti质粒？ _______________
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下表中列出几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题。
（1）一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割前后，分别含有 个游离的磷酸基团。
（2）若对图中质粒进行改造，插入SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越 。用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用SmaⅠ，原因是 。
（3）与使用EcoRⅠ相比较，使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止 。
（4）为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入 酶。重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了 。
（5）为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体，然后在 的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测。
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（8分）下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图l、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：
（1）一个图1所示的质粒分子经EcoRⅠ切割后，含有 个游离的磷酸基团。
（2）若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越_____，原因是 。
（3）用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用Srna Ⅰ切割，原因是 。
（4）与只使用EcoR I相比较，使用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止 。
（5）为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入 酶。重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了 。
（6）为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体，然后在 的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测。
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