下表是几种限制酶识别序列及其切割位点，图 1、图 2 中标注了相关限制酶的酶切位点，其中切...

下表是几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点，其中切割位点相同的酶不重复标注．请回答下列问题：

（1）用图中质粒和目的基因构建重组质粒，应选__________两种限制酶切割，酶切后的载体和目的基因片段，通过DNA连接酶作用后获得重组质粒．为了扩增重组质粒，需将其转入处于_____态的大肠杆菌．

（2）为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌，应在筛选平板培养基中添加___平板上长出的菌落，常用PCR鉴定，所用的引物组成为图2中___．

（3）若BamH I酶切的DNA末端与Bcl I酶切的DNA末端连接，连接部位的6个碱基对序列为 _______，对于该部位，这两种酶 ______（填“都能”、“都不能”或“只有一种能”）切开．

（4）若用Sau3AI切图1质粒最多可能获得______种大小不同的DNA片段．

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下表是几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点，其中切割位点相同的酶不重复标注。请回答下列问题：

(1)用图中质粒和目的基因构建重组质粒，应选用_________两种限制酶切割，酶切后的载体和目的基因片段，通过_____酶作用后获得重组质粒。

(2)为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌，应在筛选平板培养基中添加_____，平板上长出的菌落，常用 PCR 鉴定，所用的引物组成为图2中_____。

(3)若BamHⅠ酶切的DNA末端与BclⅠ酶切的DNA末端连接，连接部位的6个碱基对序列为 _____，对于该部位，这两种酶_____(填“都能”“都不能”或“只有一种能”)切开。

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下表是几种限制酶识别序列及其切割位点，图 1、图 2 中标注了相关限制酶的酶切位点，其中切割位点相同的酶不重复标注。请回答下列问题：

(1)用图中质粒和目的基因构建重组质粒，应选用____________________两种限制酶切割，酶切后的载体和目的基因片段，通过______________酶作用后获得重组质粒。为了扩增重组质粒，需将其转入经____________处理过的_____________态的大肠杆菌中。

(2)为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌，应在筛选平板培养基中添加________________________。平板上长出的菌落，常用 PCR 鉴定，所用的引物组成为图2中的_____________。

(3)若BamH I 酶切的 DNA 末端与 Bcl I 酶切的 DNA 末端连接，连接部位的 6 个碱基对序列为______________________，对于该部位，这两种酶__________（填“都能”、 “都不能”或“只有一种能”）切开。

(4)若用 Sau3A I 切图 1 质粒最多可能获得________________种大小不同的 DNA 片段。

(5)图1中启动子的作用是__________________________________________________________。

(6)将目的基因导入棉花细胞，培育抗虫棉的过程涉及到哪些技术：_______________________________

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下表是几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点，其中切割位点相同的酶不重复标注。请回答下列问题：

（1）用图中质粒和目的基因构建重组质粒，应选用___________________________两种限制酶切割，酶切后的载体和目的基因片段，通过_____________酶作用后获得重组质粒。为了扩增重组质粒，需将其转入处于_____________态的大肠杆菌。

（2）为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌，应在筛选平板培养基中添加_____________，平板上长出的菌落，常用PCR鉴定，所用的引物组成为图2中_____________________________。

（3）若BamHI酶切的DNA末端与BclI酶切的DNA末端连接，连接部位的6个碱基对序列为___________________________，对于该部位，这两种酶_____________（填“都能”、“都不能”或“只有一种能”）切开。

（4）若用Sau3AI切图1质粒最多可能获得_______________种大小不同的DNA片段。

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（10分）．下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：

(1)一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割前后，分别含有____，____个游离的磷酸基团。

(2)若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越________。

(3)用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用SmaⅠ切割，原因是___________

________________________________________________________________________。

(4)与只使用EcoRⅠ相比较，使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止___________________________________________________________。

(5)为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入________酶。

(6)为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体，然后在_________________________的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测。

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下表中列出几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点，请回答下列问题

(1)一个图Ⅰ所示的质粒分子经SmaⅠ切割后，含有________个游离的磷酸基因

(2)若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越________

(3)用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用Sma Ⅰ切割，原因是________.

(4)与只使用EcoRⅠ相比较，使用BmaHⅠ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止。

(5)为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入________酶

(6)重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了________。

(7)为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体，然后在________的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测

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下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：

（1）一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割后，含有_______个游离的磷酸基团。

（2）根据限制酶识别和切割的位点，应选择_________________酶对质粒和含目的基因的外源DNA进行切割。用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能用BamH Ⅰ切割，原因是____________________________________________。

（3）通过PCR技术扩增目的基因时，加入的引物有A、B两种，引物A、B序列设计的依据是_______________________，若该目的基因扩增4代，则需要消耗引物A____________个。

（4）为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入DNA连接酶，若只考虑DNA切段两两连接，则混合物中将形成_______种环状DNA。重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了__________________________________。

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图1表示DNA的平面结构示意图，图2表示某种限制酶的识别序列和作用位点，下列相关说法正确的是

A.图1中a所示部位即图2中箭头所示部位

B.图2所示的DNA片段被限制酶切割后获得的末端形式与图1下端相同

C.E▪co1iDNA连接酶可以将两个图1所示结构连接成为一个DNA片段

D.基因工程的载体必须具有图2所示的碱基序列

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下面是3种限制性核酸内切酶对DNA分子的识别序列和剪切位点图（箭头表示切点，切出的断面为黏性末端）。相关叙述错误的是

A. 不同的限制酶有不同的识别序列和切割位点，体现了酶的专一性

B. 限制酶2和3识别的序列都包含6个碱基对

C. 限制性酶1和酶3剪出的粘性末端相同

D. 能够识别和切割RNA分子内一小段核苷酸序列的酶只有限制酶2

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下面是3种限制性核酸内切酶对DNA分子的识别序列和剪切位点图（箭头表示切点，切出的断面为黏性末端）。相关叙述错误的是

A. 不同的限制酶有不同的识别序列和切割位点，体现了酶的专一性

B. 限制酶2和3识别的序列都包含6个碱基对

C. 限制性酶1和酶3剪出的粘性末端相同

D. 能够识别和切割RNA分子内一小段核苷酸序列的酶只有限制酶2

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