下表是几种限制酶识别序列及其切割位点,图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点,其中切割位点相同的酶不重复标注。请回答下列问题:
(1)用图中质粒和目的基因构建重组质粒,应选用_________两种限制酶切割,酶切后的载体和目的基因片段,通过_____酶作用后获得重组质粒。
(2)为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌,应在筛选平板培养基中添加_____,平板上长出的菌落,常用 PCR 鉴定,所用的引物组成为图2中_____。
(3)若BamHⅠ酶切的DNA末端与BclⅠ酶切的DNA末端连接,连接部位的6个碱基对序列为 _____,对于该部位,这两种酶_____(填“都能”“都不能”或“只有一种能”)切开。
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下表是几种限制酶识别序列及其切割位点,图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点,其中切割位点相同的酶不重复标注.请回答下列问题:
限制酶 | BamHⅠ | BclⅠ | Sau3AⅠ | HindⅢ |
识别序列及切割位点 |
(1)用图中质粒和目的基因构建重组质粒,应选__________两种限制酶切割,酶切后的载体和目的基因片段,通过DNA连接酶作用后获得重组质粒.为了扩增重组质粒,需将其转入处于_____态的大肠杆菌.
(2)为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌,应在筛选平板培养基中添加___平板上长出的菌落,常用PCR鉴定,所用的引物组成为图2中___.
(3)若BamH I酶切的DNA末端与Bcl I酶切的DNA末端连接,连接部位的6个碱基对序列为 _______,对于该部位,这两种酶 ______(填“都能”、“都不能”或“只有一种能”)切开.
(4)若用Sau3AI切图1质粒最多可能获得______种大小不同的DNA片段.
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下表是几种限制酶识别序列及其切割位点,图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点,其中切割位点相同的酶不重复标注。请回答下列问题:
(1)用图中质粒和目的基因构建重组质粒,应选用_________两种限制酶切割,酶切后的载体和目的基因片段,通过_____酶作用后获得重组质粒。
(2)为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌,应在筛选平板培养基中添加_____,平板上长出的菌落,常用 PCR 鉴定,所用的引物组成为图2中_____。
(3)若BamHⅠ酶切的DNA末端与BclⅠ酶切的DNA末端连接,连接部位的6个碱基对序列为 _____,对于该部位,这两种酶_____(填“都能”“都不能”或“只有一种能”)切开。
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下表是几种限制酶识别序列及其切割位点,图 1、图 2 中标注了相关限制酶的酶切位点,其中切割位点相同的酶不重复标注。请回答下列问题:
(1)用图中质粒和目的基因构建重组质粒,应选用____________________两种限制酶切割,酶切后的载体和目的基因片段,通过______________酶作用后获得重组质粒。为了扩增重组质粒,需将其转入经____________处理过的_____________态的大肠杆菌中。
(2)为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌,应在筛选平板培养基中添加________________________。平板上长出的菌落,常用 PCR 鉴定,所用的引物组成为图2中的_____________。
(3)若BamH I 酶切的 DNA 末端与 Bcl I 酶切的 DNA 末端连接,连接部位的 6 个碱基对序列为______________________,对于该部位,这两种酶__________(填“都能”、 “都不能”或“只有一种能”)切开。
(4)若用 Sau3A I 切图 1 质粒最多可能获得________________种大小不同的 DNA 片段。
(5)图1中启动子的作用是__________________________________________________________。
(6)将目的基因导入棉花细胞,培育抗虫棉的过程涉及到哪些技术:_______________________________
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下表是几种限制酶识别序列及其切割位点,图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点,其中切割位点相同的酶不重复标注。请回答下列问题:
(1)用图中质粒和目的基因构建重组质粒,应选用___________________________两种限制酶切割,酶切后的载体和目的基因片段,通过_____________酶作用后获得重组质粒。为了扩增重组质粒,需将其转入处于_____________态的大肠杆菌。
(2)为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌,应在筛选平板培养基中添加_____________,平板上长出的菌落,常用PCR鉴定,所用的引物组成为图2中_____________________________。
(3)若BamHI酶切的DNA末端与BclI酶切的DNA末端连接,连接部位的6个碱基对序列为___________________________,对于该部位,这两种酶_____________(填“都能”、“都不能”或“只有一种能”)切开。
(4)若用Sau3AI切图1质粒最多可能获得_______________种大小不同的DNA片段。
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(10分).下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点,图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题:
限制酶 | BamHⅠ | HindⅢ | EcoRⅠ | SmaⅠ |
识别序列 及切割位点 | ↓ GGATCC CCTAGG ↑ | ↓ AAGCTT TTCGAA ↑ | ↓ GAATTC CTTAAG ↑ | ↓ CCCGGG GGGCCC ↑ |
(1)一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割前后,分别含有____,____个游离的磷酸基团。
(2)若对图中质粒进行改造,插入的SmaⅠ酶切位点越多,质粒的热稳定性越________。
(3)用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒,不能使用SmaⅠ切割,原因是___________
________________________________________________________________________。
(4)与只使用EcoRⅠ相比较,使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止___________________________________________________________。
(5)为了获取重组质粒,将切割后的质粒与目的基因片段混合,并加入________酶。
(6)为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因,将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体,然后在_________________________的培养基中培养,以完成目的基因表达的初步检测。
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下表中列出几种限制酶识别序列及其切割位点,图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点,请回答下列问题
限制酶 | BamHⅠ | Hind Ⅲ | EcoRⅠ | SmaⅠ |
识别序列及 切割位点 | G↓GATC C C CTAG↑G | A↓AGCT T T TCGA↑A | G↓AATT C C TTAA↑G | CCC↓GGG GGG↑CCC |
(1)一个图Ⅰ所示的质粒分子经SmaⅠ切割后,含有________个游离的磷酸基因
(2)若对图中质粒进行改造,插入的SmaⅠ酶切位点越多,质粒的热稳定性越________
(3)用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒,不能使用Sma Ⅰ切割,原因是________.
(4)与只使用EcoRⅠ相比较,使用BmaHⅠ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止。
(5)为了获取重组质粒,将切割后的质粒与目的基因片段混合,并加入________酶
(6)重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了________。
(7)为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因,将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体,然后在________的培养基中培养,以完成目的基因表达的初步检测
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下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点,图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题:
限制酶 | EcoR Ⅰ | BamH Ⅰ | Sau3AI | SmaⅠ |
识别序列及切割位点 |
(1)一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割后,含有_______个游离的磷酸基团。
(2)根据限制酶识别和切割的位点,应选择_________________酶对质粒和含目的基因的外源DNA进行切割。用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒,不能用BamH Ⅰ切割,原因是____________________________________________。
(3)通过PCR技术扩增目的基因时,加入的引物有A、B两种,引物A、B序列设计的依据是_______________________,若该目的基因扩增4代,则需要消耗引物A____________个。
(4)为了获取重组质粒,将切割后的质粒与目的基因片段混合,并加入DNA连接酶,若只考虑DNA切段两两连接,则混合物中将形成_______种环状DNA。重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了__________________________________。
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下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点,图l、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题:
(1)一个图1所示的质粒分子用限制酶Sma Ⅰ切割时,需断开 个磷酸二酯键。
(2)若对图中质粒进行改造,插入的SmaⅠ酶切位点越多,质粒的热稳定性越 。
(3)为了获取重组质粒,将切割后的质粒与目的基因片段混合,并加入 酶。
(4)重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了 。
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(8分)下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点,图l、图2中箭头表示相关限制酶的切位点。请回答下列问题:
(1)一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割前后,分别含有 和 个游离的磷酸基团。
(2)若对图中质粒进行改造,插入的SmaⅠ酶切位点越多,质粒的热稳定性越 。
(3)用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒,不能使用Sma Ⅰ切割,原因是 。
(4)与只使用EcoR I相比较,使用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止 。
(5)为了获取重组质粒,将切割后的质粒与目的基因片段混合,并加入 酶。
(6)重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了 。
(7)为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因,将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体,然后在 的培养基中培养,以完成目的基因表达的初步检测。
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下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点,图l、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题:
(1)一个图1所示的质粒分子经Sma Ⅰ切割前、后,分别含有 、 个游离的磷酸基团。
(2)若对图中质粒进行改造,插入的SmaⅠ酶切位点越多,质粒的热稳定性越 。
(3)用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒,不能使用SmaⅠ切割,原因是 。
(4)与只使用EcoR I相比较,使用BamHⅠ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止 。
(5)为了获取重组质粒,将切割后的质粒与目的基因片段混合,并加入 酶,若两两相连,则连接产物中有哪几种情况? 。
(6)重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了 。
(7)为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因,将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体,然后在 的培养基中培养,以完成目的基因表达的初步检测。
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