内皮素(ET)是一种多肽,主要通过与靶细胞膜上的ET受体(ETA)结合而发挥生物学效应。科研人员通过构建表达载体,实现ETA基因在大肠杆菌细胞中的高效表达,其过程如下图所示,
图中SNAP基因是一种荧光蛋白基因,限制酶ApaⅠ的识别序列为,限制酶XhoⅠ的识别序列为。请据图分析回答:
(1)进行过程①时,需要加入缓冲液、引物、dNTP和___________酶等。完成过程①②③的目的是
___________。
(2)过程③和⑤中,限制酶XhoⅠ切割DNA,使___________键断开,形成的黏性末端是___________。
(3)构建的重组表达载体,目的基因上游的启动子是___________的部位,进而可驱动基因的转录。除图中已标出的结构外,基因表达载体还应具有的结构是___________。
(4)过程⑥要用CaCl2预先处理大肠杆菌,使其成为容易吸收外界DNA的___________细胞。
(5)将SNAP基因与ETA基因结合构成融合基因,其目的是有利于检测___________。
高三生物综合题困难题
内皮素(ET)是一种含21个氨基酸的多肽。内皮素主要通过与靶细胞膜上的内皮素受体结合而发挥生物学效应。ETA是内皮素的主要受体,科研人员试图通过构建表达载体,实现ETA基因在细胞中高效表达,为后期ETA的体外研究奠定基础。其过程如下(图中SNAP基因是一种荧光蛋白基因,限制酶ApaⅠ的识别序列为C↓CCGGG,限制酶XhoⅠ的识别序列为C↓TCGAG)。请分析回答:
(1)完成过程①需要的酶是____________;
(2)过程③中,限制酶XhoⅠ切割DNA,使__________键断开,形成的黏性末端是__________________。用两种限制酶切割,获得不同的黏性末端,其主要目的是____________________。
(3)过程④中需要 酶,去构建重组质粒。过程⑥中,要用__________预先处理大肠杆菌,使其处于容易吸收外界的DNA。
(4)利用SNAP基因与ETA基因结合构成融合基因,目的是_____________。
(5)人皮肤黑色素细胞上有内皮素的特异受体,内皮素与黑色素细胞膜上的受体结合后,会刺激黑色素细胞的分化、增殖并激活酪氨酸酶的活性,从而使黑色素急剧增加。美容时可以利用注射ETA达到美白祛斑效果,试解释原因:______抑制了内皮素对黑色素细胞的增殖和黑色素的形成。
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内皮素(ET)是一种多肽,主要通过与靶细胞膜上的ET受体(ETA)结合而发挥生物学效应。科研人员通过构建表达载体,实现ETA基因在大肠杆菌细胞中的高效表达,其过程如下图所示,
图中SNAP基因是一种荧光蛋白基因,限制酶ApaⅠ的识别序列为,限制酶XhoⅠ的识别序列为。请据图分析回答:
(1)进行过程①时,需要加入缓冲液、引物、dNTP和___________酶等。完成过程①②③的目的是
___________。
(2)过程③和⑤中,限制酶XhoⅠ切割DNA,使___________键断开,形成的黏性末端是___________。
(3)构建的重组表达载体,目的基因上游的启动子是___________的部位,进而可驱动基因的转录。除图中已标出的结构外,基因表达载体还应具有的结构是___________。
(4)过程⑥要用CaCl2预先处理大肠杆菌,使其成为容易吸收外界DNA的___________细胞。
(5)将SNAP基因与ETA基因结合构成融合基因,其目的是有利于检测___________。
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肉皮素(ET)是一种多肽,主要通过与靶细胞膜上的ET受体(ETA)结合而发挥生物学效应。科研人员通过构建表达载体,实现ETA基因在大肠杆菌细胞中的高效表达,其过程如下图所示,图中SNAP基因是一种荧光蛋白基因,限制酶ApaI的识别序列为,限制酶XhoI的识别序列为。请据图分析回答:
(1)进行过程①时,需要加入缓冲液、引物、dNTP和 酶等。完成过程①②③的目的是 __________。
(2)过程③和⑤中,限制酶XhoI切割DNA,使 键断开,形成的黏性末端是_________。
(3)构建的重组表达载体,目的基因上游的启动子是 的部位,进而可驱动基因的转录。除图中已标出的结构外,基因表达载体还应具有的结构是 。
(4)过程⑥要CaCl2预先处理大肠杆菌,使其成为容易吸收外界DNA的 细胞。
(5)将SNAP基因表达的产物是一种荧光蛋白,将与ETA基因结合构成融合基因,其目的是有利于检测 。
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内皮素(ET)是一种含21个氨基酸的多肽,与高血压、糖尿病、癌症等有着密切联系。研究发现内皮素功能异常与内皮素主要受体ETA有关,科研人员通过构建表达载体,实现了ETA基因在细胞中高效表达。其过程如下(图中SNAP基因是一种荧光蛋白基因,限制酶ApaⅠ的识别序列为CCC'GGG,限制酶XhoI的识别序列为C'TCGAG)。据图回答下列问题:
(1)图中ETA基因能够在大肠杆菌细胞内表达的原因是____________。
(2)过程①中需要用________酶处理,过程③中,用两种限制酶切割,获得不同的黏性末端,其主要目的是____________。
(3)图中的基因表达载体至少还缺少________,鉴定ETA基因是否导入受体细胞需要用放射性同位素或荧光分子标记的__________作探针。
(4)已知荧光显微镜可以通过检测荧光的强度来判断SNAP基因是否表达及表达量。因此,利用SNAP基因与ETA基因结合构成融合基因,目的是___________。
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内皮素(ET)是一种含21个氨基酸的多肽,与高血压、糖尿病、癌症等有着密切联系。研究发现内皮素功能异常与内皮素主要受体ETA有关,科研人员通过构建表达载体,实现了ETA基因在细胞中高效表达。其过程如下(图中SNAP基因是一种荧光蛋白基因,限制酶ApaⅠ的识别序列为CCC'GGG,限制酶XhoI的识别序列为C'TCGAG)。据图回答下列问题:
(1)图中ETA基因能够在大肠杆菌细胞内表达的原因是 。
(2)过程①中需要用 酶处理,过程③中,限制酶Xho I切割DNA形成的黏性末端是 。用两种限制酶切割,获得不同的黏性末端,其主要目的是 。
(3)图中的基因表达载体至少还缺少 ,鉴定ETA基因是否导入受体细胞需要用放射性同位素或荧光分子标记的 作探针。
(4)已知荧光显微镜可以通过检测荧光的强度来判断SNAP基因是否表达及表达量。因此,利用SNAP基因与ETA基因结合构成融合基因,目的是 .
(5)人皮肤黑色素细胞上有内皮素的特异受体,内皮素与黑色素细胞膜上的受体结合后,会刺激黒色素细胞的增殖、分化并激活酪氨酸酶的活性,从而使黑色素增加。美容时可以利用注射ETA达到美白祛斑效果,原因是 ,从而抑制了黑色素细胞的增殖和黑色素的形成。
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内皮素(ET)是一种含21个氨基酸的多肽,具有强烈的血管收缩和促进平滑肌细胞增殖等作用,其功能异常与高血压、糖尿病、癌症等有着密切联系.内皮素(ET)主要通过与靶细胞膜上的ET受体(ETA)结合而发挥生物学效应.科研人员通过构建表达载体,实现ETA基因在大肠杆菌细胞中的高效表达,其过程如下图所示,图中SNAP基因是一种荧光蛋白基因,限制酶ApaI的识别序列为,限制酶XhoI的识别序列为 .请据图分析回答:
(1)进行过程①时,需要加入缓冲液、引物、脱氧核苷酸和 酶等.完成过程①②③的目的是 .
(2)过程③和⑤中,限制酶XhoI切割DNA,使 键断开,形成的黏性末端是 .用两种限制酶切割•获得不同的黏性末端,其主要目的是 _.
(3)构建的重组表达载体,目的基因上游的启动子是 的部位,进而可驱动基因的转录.除图中已标出的结构外,基因表达载体还应具有的结构是 .
(4)过程⑥要CaCl2预先处理大肠杆菌,使其成为容易吸收外界DNA的 细胞.
(5)将SNAP基因与ETA基因结合构成融合基因,其目的是有利于检测 .
(6)基因工程操作时可将外源基因整合到叶绿体基因组中,不仅能有效改良植物的品质.还由于叶绿体转基因不会随 (“花粉”或“卵细胞”)传给后代,从而在一定程度上避免转基因作物中的外源基因能扩散到其他同类作物.
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内皮素(ET)是一种含21个氨基酸的多肽,它有强烈的血管收缩和促进平滑肌细胞增殖等作用。研究发现内皮素功能异常与高血压、糖尿病、癌症等有着密切联系。内皮素主要通过与靶细胞膜上的内皮素受体结合而发挥生物学效应。ETA是内皮素的主要受体,科研人员试图通过构建表达载体,实现ETA基因在细胞中高效表达,为后期ETA的体外研究以及拮抗剂的筛选、活性评价等奠定基础。其过程如下(图中SNAP基因是一种荧光蛋白基因,限制酶ApaⅠ的识别序列为C↓CCGGG,限制酶XhoⅠ的识别序列为C↓TCGAG)。请分析回答:
(1)完成过程①需要的酶是 ;与过程②相比,过程①特有的碱基配对方式是______________。
(2)过程③中,限制酶XhoⅠ切割DNA,使_______键断开,形成目的基因的黏性末端是________。用两种限制酶切割,获得不同的黏性末端,其主要目的是_____________。
(3)过程⑥中,要用________预先处理大肠杆菌,使其处于容易吸收外界DNA的感受态。
(4)利用SNAP基因与ETA基因结合构成融合基因,目的是_________。
(5)人皮肤黑色素细胞上有内皮素的特异受体,内皮素与黑色素细胞膜上的受体结合后,会刺激黑色素细胞的分化、增殖并激活酪氨酸酶的活性,从而使黑色素急剧增加。美容时可以利用注射ETA达到美白祛斑效果,这是因为ETA能与内皮素结合,减少了内皮素与 的结合,抑制了内皮素对黑色素细胞的增殖和黑色素的形成。
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内皮素(ET)是一种含21个氨基酸的多肽,它有强烈的血管收缩和促进平滑肌细胞增殖等作用。研究发现内皮素功能异常与高血压、糖尿病、癌症等有着密切联系。内皮素主要通过与靶细胞膜上的内皮素受体结合而发挥生物学效应。ETA是内皮素的主要受体,科研人员试图通过构建表达载体,实验ETA基因在细胞中高效表达,为后期ETA的体外研究以及拮抗剂的筛选、活性评价等尊定基础。其过程如下(图中SNAP基因是一种荧光蛋白基因,限制酶ApaⅠ的识别序列为C↓CCGGG,限制酶XhoⅠ的识别序列为C↓TCGAG)。请分析回答:
(1)完成过程①需要的酶是 ;与过程②相比,过程①特有的碱基配对方式是 。
(2)过程③中,限制酶XhoⅠ切割DNA;使 键断开,形成的黏性末端是 。用两种限制酶切割,获得不同的黏性末端,其主要目的是 。
(3)过程⑥中,要用 预先处理大肠杆菌,使其处于容易吸收外界DNA的感受态。
(4)利用SNAP基因与ETA基因结合构成融合基因,目的是 。
(5)人皮肤黑色素细胞上有内皮素的特异受体,内皮素与黑色素细胞膜上的受体结合后,会刺激黑色素细胞的分化、增殖并激活酪氨酸酶的活性,从而使黑色素急剧增加。美容时可以利用注射ETA达到美白祛斑效果,试解释: 。
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干扰素(INF)通过与细胞表面相应受体结合,诱导细胞产生抗病毒蛋白而实现其抗病毒作用。科研人员将人的INF受体基因导入小鼠细胞内,在小鼠细胞中高效表达INF受体,从而提高了小鼠对INF的敏感程度,增强了其抗病毒能力。请回答下列问题:
(1)获取INF受体基因时,需要提取人体细胞中的mRNA,再加入______酶合成cDNA。提取人体细胞的mRNA时需要加入RNA酶抑制剂,以避免________。与基因组文库相比,cDNA文库中的____________(填“部分基因”或“全部基因”)可以在不同物种间交流。
(2)利用PCR扩增目的基因时,在DNA双链解开后,要适当降低体系温度,目的是___________。
(3)将含有INF受体基因的重组载体导入小鼠细胞的方法为___________,其受体细胞一般是___________。若要判断INF受体基因是否成功被导入受体细胞,需要利用基因探针进行检测,基因探针指的是____________。
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科研人员采用转基因体细胞克隆技术获得转基因绵羊,以便通过乳腺生物反应器生产人 凝血因子IX医用蛋白,其技术路线如图。
(1)要想目的基因只在乳腺组织中表达,在构建基因表达载体A 时,需要将_________基因和__________等调控组件重组在一起。
(2)将A导入绵羊胎儿成纤维细胞中常用的方法是__________。将 A 导入受精卵能否获得转基因绵羊? ______ ,判断依据是________________.
(3)核移植的受体应选用__________期卵母细胞?。
(4)移植应选择胚胎发育到________阶段时进行;转基因绵羊的性状基本上与代孕母羊无关的原因是__________.
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