生物炭是指利用炭化技术使生物质在缺氧条件下不完全燃烧所产生的富碳产物。科研人员以玉米秸秆（...

生物炭是指利用炭化技术使生物质在缺氧条件下不完全燃烧所产生的富碳产物。科研人员以玉米秸秆（生物炭原材料）、北方粳稻为材料进行实验。结果如下表：

（1）选择___________的北方粳稻，移栽至各组土壤中进行实验。其中,Ⅰ组为对照组，处理方式为___________。

（2）与Ⅰ组相比，___________期，生物炭对根鲜重的促进作用最大，该时期___________组实验的处理方式对根鲜重的促进作用最明显。

（3）生物炭本身质轻、多孔, 施入土壤后可提高土壤肥力和肥料利用效率，它还富含一些作物生长所需的营养元素, 故此研究成果对在实践中遵循生态工程的___________原理具有指导意义。

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[生物——选修1：生物技术实践]

秋收季节，北方的玉米田里“狼烟滚滚”，这是没有被深埋的玉米秸秆被粮农焚烧的结果。秸秆焚烧不仅浪费了能源，还污染了环境。研究人员发现某种细菌在无氧条件下可利用秸秆发酵生产甲烷，实现了能量更多的流向人类的目标。回答下列问题：

（1）在实验室中纯化产甲烷的菌株时，为了得到单个菌落，可采用的培养基是___________（填“固体”或“液体”）培养基。将菌液接种于新的培养基上，该操作应在酒精灯火焰旁进行的原因是___________。

（2）在生产过程中将秸秆粉碎后制成产甲烷细菌的培养液，一般无需灭菌但需要__________处理以减少培养液中的氧气。因不同种类的产甲烷细菌中__________不同，需将装置置于不同温度条件下。

（3）研究发现产甲烷细菌广泛分布在土壤中，推测其应分布在土壤的__________（填“深层”或“表层”）。硫基乙烷磺酸是产甲烷细菌特有的一种辅酶，利用该酶的特性制定的筛选产甲烷细菌的培养基称为__________。

（4）科学家在北方冻土中发现了一种食甲烷的细菌，随着温度升高，冻土融化，冻土中的食甲烷细菌也活跃起来，这样可以避免因冻土中甲烷、二氧化碳释放引起更明显的__________现象。

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为了研究生物细胞中过氧化氢酶的活性，科研人员利用猪肝和马铃薯块茎为材料，制备得到猪肝粗酶液和马铃薯块茎粗酶液，设置酸碱度（pH）为6.0，6.5，7.O，7.5，8.0，8.5的6个梯度，其他条件相同且适宜，测定各组实验的氧气生成速率（mL/min），结果如下表所示：

回答下列问题:

回答下列问题：

（1）该实验的自变量是____________________。

（2）据表分析，相同pH条件下，__________细胞中过氧化氢酶活性高。如要测得马铃薯块茎细胞中过氧化氢酶的最适pH，实验设计思路是______________________________。

（3）生物体内，酶的基本组成单位是________________，酶起催化作用的机理是_________________。

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[生物——选修3，现代生物科技专题]利用基因工程可以治疗有基因缺陷的疾病。基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗，其技术流程如下图：

(1)该项工程中目的基因的获取可以利用PCR技术，依据_________设计引物，利用_______为原料在PCR仪中进行扩增。

(2)该项基因工程的关键环节是需要构建含有Rag2基因的_______________.

(3)图中步骤①中所选的卵母细胞应处于___________期。而ES细胞一般从发育到________时期的

重组胚胎中分离获取。

(4)转化成功的ES细胞具有的结构特点是_______________。为检测Rag2基因的表达情况，可提取治疗后小鼠骨髓细胞的蛋白质，用抗Rag2蛋白的抗体进行________________。

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[生物一一选修3：现代生物技术专题]

Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如下图：

(1)在培养上皮细胞时应将其置于含______________的混合气体的培养箱中进行培养。

(2)步骤②中应将上皮细胞与___________细胞通过核移植技术构建出重组细胞。

(3)图中的ES细胞来源于______________。

(4)该治疗需要利用PCR技术扩增出大量的Rag2基因，假设Rag2基因的两条链的引物分别称为引物A和引物B，那么1个Rag2基因通过PCR技术扩增四轮之后，产物中含有引物A的DNA片段所占的比例理论上为_____。某同学设计的一组引物的部分碱基序列为：引物A为...CAGGCT...，引物B为...AGCCTG...，请问这组引物的不合理之处是____________。

(5)步骤④的培养基中应加入____________以诱导ES细胞的分化。

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【生物一选修3:现代生物科技专题】Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗，其技术流程如图（图中数字序号表示的是相关过程）。请回答下列有关问题：

(1)过程②利用的技术是_______________,过程③中涉及到了基因工程技术，其中作为受体

细胞的是_______________。

(2)过程③中获取的目的基因是_______________，可以根据该基因的____________.设计引物，利用PCR技术扩增目的基因片段。按此方法和图示技术流程，完成　 Rag2基因缺失小鼠的基因治疗涉及的酶有_______和耐高温的DNA聚合酶(Taq酶)等。

(3)图中造血干细胞中的遗传物质至少有 __________来源。为检测　 Rag2基因的表达情况，可提取治疗后小鼠骨髓细胞的蛋白质,用_________________进行杂交实验。图中所述克隆技术属于_______克隆。

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【生物一选修3:现代生物科技专题】Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗，其技术流程如图（图中数字序号表示的是相关过程）。请回答下列有关问题：

(1)过程②利用的技术是_______________,过程③中涉及到了基因工程技术，其中作为受体

细胞的是_______________。

(2)过程③中获取的目的基因是_______________，可以根据该基因的____________.设计引物，利用PCR技术扩增目的基因片段。按此方法和图示技术流程，完成　 Rag2基因缺失小鼠的基因治疗涉及的酶有_______和耐高温的DNA聚合酶(Taq酶)等。

(3)图中造血干细胞中的遗传物质至少有 __________来源。为检测　 Rag2基因的表达情况，可提取治疗后小鼠骨髓细胞的蛋白质,用_________________进行杂交实验。图中所述克隆技术属于_______克隆。

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(12分)【生物——现代生物科技专题】

Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图：

(1)步骤①中，在核移植前应去除卵母细胞的_________，此技术属于_________工程范畴。

(2)步骤②中，重组胚胎培养到囊胚期时，可从其__________中分离出ES细胞。培养ES细胞时，为满足细胞代谢的需要，可在培养基中加入的天然成分是_______________。

(3)步骤③中，需要构建含有Rag2基因的表达载体。可以根据Rag2基因的______设计引物，利用__________技术扩增Rag2基因片段。用HindIII和PstI限制酶分别在片段两侧进行酶切获得Rag2基因片段。为将该片段直接连接到表达载体，所选择的表达载体上应具有______________酶的酶切位点。

(4)为检测Rag2基因的表达情况，可提取治疗后的小鼠骨髓细胞的______________，用抗Rag2 蛋白的抗体进行杂交实验。

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【生物—选修3：现代生物科技专题】Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如下图：

（1）步骤①中所选的卵母细胞应处于　　　　　　　　　　 期。

（2）步骤②中，重组胚胎培养到囊胚期时，可从其　　　　　　　　　　 分离出ES细胞，ES细胞在形态上表现为　　　　　　　　　　 的特点。

（3）步骤③中，需要构建含有Rag2基因的　　　　　　 　　　　 。可以根据Rag2基因的核苷酸序列设计合成　　　　　　　　 ，利用　　　　　　　　　　 技术扩增Rag2基因片段。用HindⅢ和PstⅠ限制酶分别在目的基因所在DNA片段两侧进行酶切获得Rag2基因片段。为将该片段直接连接到表达载体，所选择的表达载体上应具有　　　　　　　　　　　 酶的酶切位点。

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【生物——现代生物科技专题】Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图：

（1）步骤①中，在核移植前应去除卵母细胞的_________，此技术属于________工程范畴。

（2）步骤②中，重组胚胎培养到　　　　 期时，可从其__________中分离出ES细胞。培养ES细胞时，为满足细胞代谢的需要，可在培养基中加入的天然成分是_______________。

（3）步骤③中，在构建含有Rag2基因的表达载体时，可以根据Rag2基因的　　　　　 设计引物，利用__________技术扩增Rag2基因片段。并且同时用HindIII和PstI限制酶分别在片段两侧进行酶切获得Rag2基因片段，这样做的目的是：　　　　　　　　 。为将该片段直接连接到表达载体，所选择的表达载体上应具有_________酶的酶切位点。

（4）为检测Rag2基因的表达情况，可提取治疗后的小鼠骨髓细胞的蛋白质，用　　　　 进行杂交实验。

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