长春花中的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。基因tms的编码产物能促进生长素的合成，科研人员利用...

长春花中的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。基因tms的编码产物能促进生长素的合成，科研人员利用基因tms 构建重组Ti粒，对愈伤组织进行遗传改造，解决了长春碱供不应求的问题，操作流程如下图所示。下列叙述错误的是（　　 ）

A.该过程为植物组织培养过程，体现了植物细胞的全能性

B.过程①为脱分化，需要营养物质、激素和光照条件

C.过程②大多采用农杆菌转化法，定向改造生物的遗传性状

D.重组愈伤组织在过程③中既存在细胞增殖又存在细胞分化

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长春花中的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。科研人员利用TMS基因构建重组Ti质粒，对愈伤组织进行遗传改造，从其细胞分泌物中提取长春碱，解决长春碱供不应求的问题，操作流程如下图。下列说法错误的是（　　 ）

A.①过程用到的培养基中需要加入琼脂

B.Ti质粒是TMS基因的运载工具

C.外植体通过①脱分化过程形成愈伤组织

D.愈伤组织通过③再分化过程产生长春碱

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某生物中发现一种基因的表达产物是具有较强抗菌性和溶血性的多肽P1，科研人员预期在P1的基础上研发抗菌性强但溶血性弱的蛋白质药物，下一步要做的是（ ）

A.合成编码多肽P1的DMA片段

B.构建含目的肽DNA片段的表达载体

C.设计抗菌性强但溶血性弱的蛋白质结构

D.利用抗原抗体杂交的方法对表达产物进行检测

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某生物中发现一种基因的表达产物是具有较强抗菌性和溶血性的多肽P1，科研人员预期在P1的基础上研发抗菌性强但溶血性弱的蛋白质药物，下一步要做的是（　　 ）

A. 构建含目的肽DNA片段的表达载体

B. 合成编码多肽P1的DNA片段

C. 设计抗菌性强但溶血性弱的蛋白质结构

D. 利用DNA分子杂交的方法对表达产物进行检测

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某生物中发现一种基因的表达产物是具有较强抗菌性和溶血性的多肽P1，科研人员预期在P1的基础上研发抗菌性强但溶血性弱的蛋白质药物，下一步要做的是（　 ）

A．合成编码多肽P1的DMA片段

B．构建含目的肽DNA片段的表达载体

C．设计抗菌性强但溶血性弱的蛋白质结构

D．利用抗原抗体杂交的方法对表达产物进行检测

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某生物中发现一种基因的表达产物是具有较强抗菌性和溶血性的多肽P1，科研人员预期在P1的基础上研发抗菌性强但溶血性弱的蛋白质药物，下一步要做的是

A．合成编码多肽P1的DMA片段

B．构建含目的肽ONA片段的表达载体

C．设计抗菌性强但溶血性弱的蛋白质结构

D．利用抗原抗体杂交的方法对表达产物进行检测

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某团队用化学法人工合成了脑啡肽 N端五肽（能与质膜某受体特异性结合）编码区，使其与人干扰素基因连接，在大肠杆菌中成功表达出一种融合蛋白，该蛋白抑制肿瘤细胞 生长的活性显著高于单纯的干扰素。下列叙述错误的是（　　 ）

A.该过程中利用了基因重组技术

B.该过程并没有创造出新的蛋白质

C.要实现蛋白质的拼接，需先进行基因的拼接

D.脑啡肽 N端五肽使干扰素作用更具有靶向性

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人参是一种名贵药材，具有良好的滋补作用。口服α－干扰素在慢性乙肝、丙肝及部分肿瘤的治疗中有一定疗效。下图为科研人员制备能合成干扰素的人参愈伤组织细胞的流程，①～④表示相关的操作，EcoRⅠ、BamHⅠ为限制酶，它们的识别序列及切割位点如下表所示。请回答下列问题：

(1) 步骤①中，利用PCR技术扩增干扰素基因时，设计引物序列的主要依据是______________。科研人员还在两种引物的一端分别加上________和________序列，以便于后续基因的剪切和连接。

(2) 过程②所构建的基因表达载体中未标注出的必需元件还有________，过程③中需先用______处理根瘤农杆菌以便将基因表达载体导入细胞。

(3) 过程④中，科研人员提取愈伤组织细胞的RNA后，先通过________过程获得DNA，再进行PCR扩增，若最终未能检测出干扰素基因，其可能原因是____。

(4) 科研人员认为，将转干扰素基因的人参愈伤组织加工成的药物比单纯干扰素的疗效要好，其依据是______________________。

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据新华社呼和浩特2010年4月20日电，内蒙古大学生命科学学院实验动物研究中心的科研人员成功培育出了国际上规模最大的一批转基因克隆绒山羊。研究过程中，科研人员首先成功构建了对绒毛生长有促进作用的转胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF－Ⅰ)基因载体，利用该载体成功转载了绒山羊胎儿成纤维细胞，建立起转基因细胞系。再利用转基因细胞进行体细胞克隆，从而获得了转基因绒山羊。请回答下列问题：

(1)科研人员构建转胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF－Ⅰ)基因载体的过程中必需用到的工具酶有______________________________________________________________________。

(2)用绒山羊胎儿成纤维细胞建立转基因细胞系必须用动物细胞培养技术，动物细胞培养中除含葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素外，还必须加入的成分是________________。在动物细胞培养过程中要不停地使用的一种工具酶是________________，目的是使细胞分散开。

(3)转基因绒山羊的培育过程大致为：将转基因细胞的________________注入普通绒山羊的________卵细胞中，经过某种刺激和培养后，可形成胚胎，将该胚胎移入代孕母绒山羊的________中，通过培育可达到目的。

(4)胚胎移植是胚胎工程及其他工程的最后一道工序，可以充分发挥_________________。供体的主要职能是________________________，而受体则承担妊娠和育仔的任务。在实施该技术时，要用激素对供、受体进行处理，使它们________。为了提高胚胎利用率，可采用胚胎分割技术，用于分割的胚胎应是________________________阶段的胚胎。

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hNaDC3（人钠/二羧酸协同转运蛋白-3）主要分布于肾脏等重要器官，它具有促进人肾小管上皮细胞能量代谢和转运等功能。科研人员利用基因工程技术构建绿色荧光蛋白与hNaDC3融合基因，并在肾小管上皮细胞中表达，以动态观察hNaDC3在肾小管上皮细胞中的定位情况，为进一步研究hNaDC3的生理功能奠定基础。研究主要过程如图（实验中使用的限制酶SacⅠ的识别序列是GAGCT↓C，限制酶SacⅡ识别序列是CCGC↓GG）。请分析回答：

（1）与PCR相比，过程①需要的特有的酶是______，应从人体______（器官）的组织细胞中获得模板RNA。

（2）DNA分子被SacⅠ切割后，形成的黏性末端是______。过程②选用SacⅠ、SacⅡ分别切割hNaDC3基因和质粒载体，可实现目的基因定向插入并正常表达的原因是______。

（3）过程③可获得多种重组DNA，可依据不同DNA分子的大小，运用______（技术）分离、筛选重组表达载体。

（4）显微观察导入“绿色荧光蛋白-hNaDC3融合基因”的猪肾小管上皮细胞后发现：转染后第1天绿色荧光混合分布于细胞质和细胞膜，核中未见绿色荧光；到第5天绿色荧光清晰聚集于细胞膜，细胞质和细胞核中未见绿色荧光。根据这一观察结果还不能得出“hNaDC3是在细胞质中生成后，在细胞膜上发挥作用”的结论，需要设置对照实验以排除绿色荧光蛋白本身的定位，对照实验的设计思路是______。

（5）研究人员以较高浓度的葡萄糖溶液培养导入融合基因的猪肾小管上皮细胞，一段时间后发现，转染细胞的细胞膜上绿色荧光明显增强。这一实验结果可以说明______。

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