由牛结核分枝杆菌引起的结核病是一种人畜共患病。西北农科大成功培育出了抗结核病的转基因牛。研究中使用的sp110基因来自于小鼠，该基因的表达产物能够抑制牛结核分枝杆菌的增殖。经设计，sp110基因只在转基因奶牛的巨噬细胞中表达，其牛奶中不含转基因成分。
（1）为防止酶切产物自身环化，构建表达载体时可选用2种限制酶，酶切后，sp110基因形成的两个黏性末端序列______（填“相同”或“不相同”）。
（2）该转基因克隆牛在核移植过程中选取的卵母细胞需要培养到______期。将转基因的细胞注入去核卵母细胞后，需要用______方法激活受体细胞，使其完成细胞分裂和发育进程。克隆出的牛犊与供体奶牛遗传物质相同，但也不是100%的复制，原因可能是______（至少答出两点）。
（3）培育过程中为提高胚胎的利用率，可采用胚胎分割移植技术对囊胚的______进行均等分割，为了使胚胎移植能成功，需要对代孕奶牛进行______处理，使之与供体的生理状况保持相同。
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(12分)【生物——现代生物科技专题】
牛结核病是一种慢性传染病，在世界范围内广泛传播，来自于小鼠的SP110基因能够抑制牛结核分枝杆菌的增殖。下图是培育抗结核病转基因克隆牛的流程图。请据图回答：
(1)培育过程中涉及到的细胞工程技术有_________________、_____________。
(2)重组质粒由目的基因、____________、____________、标记基因等组成，过程I最常用的方法是_____________________。
(3)过程Ⅱ的胚胎培养液中除无机盐、有机盐和营养成分外，还需要添加_________等天然成分。
(4)过程III表示诱导成纤维细胞与处于____________期的去核卵母细胞融合。重组胚胎通过_________技术移入受体母牛子宫内，暂时不移入的可使用__________方法保存。
(5)若要提高重组胚胎的利用率，可对__________期的胚胎进行分割。
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研究表明，小鼠SP110基因能够提高动物对结核杆菌的抗性，我国某研究团队利用基因工程成功孕育出带有小鼠SP110基因的转基因牛。
（1）利用PCR技术对SP110基因进行扩增时，所需的原料为__________；加入的Taq酶与普通的DNA聚合酶相比，其特点是____________。
（2）获得转基因牛的过程中，构建的基因表达载体应包含小鼠的SP110基因及其启动子等调控元件。其中启动子的作用是________，将该载体导入受体细胞常采用的方法是__________。
（3）携带了SP110基因的胚胎干细胞能在体外构建胚胎并发育成个体，这体现胚胎干细胞具有_____。经检测，用同种限制酶切割并构建的基因表达载体中，有部分基因表达载体中的SP110基因不能正确表达，最可能的原因是_____________。
（4）研究者通过体外受精的方式让转基因牛产下试管牛。在试管牛的培育过程中，需对精子进行____处理，需将卵母细胞培养至__________时，二者才都具备受精能力。
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研究发现，人的防御素对结核杆菌有一定的抑制作用。研究人员将人的防御素基因（HBD3）导入牛细胞，培育出对结核杆菌有一定的抗性的转HBD3基因的转基因牛，培育过程如下图所示，请分析回答。
（1）人防御素基因HBD3导入牛乳腺上皮细胞前还需在基因前加上牛乳蛋白启动子序列，目的是_______。
（2）该奶牛培育过程中涉及的技术有________________________。
（3）通常选用____________（填时期）卵母细胞作受体细胞，这个时期的卵母细胞可以从____________中直接获取。
（4）①过程常使用电脉冲等方法激活重组细胞使其完成____________。
（5）②过程中培养液成分除无机盐、有机盐、维生素、激素等营养物质外，还需特别添加____________等物质。③过程的早期胚胎一般要发育到____________阶段才进行移植。
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结核病是由结核分枝杆菌引起的传染病。结核分枝杆菌的细胞壁厚脂质含量高，能抵御不利自然环境，在干痰中可存活6-8个月，若黏附于尘埃上可保持传染性8-10天。人体被感染后结核分枝杆菌可侵犯全身各组织器官，但以肺部感染最多。
（1）结核病的传播途径主要是__________。
A．空气传播 B．接触传播 C．媒介物传播 D．病媒传播
（2）根据病原菌在体内的感染部位，推测结核分枝杆菌的代谢方式是__________。
A．异养厌氧型 B．自养厌氧型 C．自养好氧型 D．异养好氧型
为探究不同抗生素对结核分枝杆菌的抑菌效果，研究者从患者体内提取的病原菌进行分离培养。培养结核分枝杆菌的培养基主要含有天门冬氨酸、甘油、鸡蛋黄、KH2PO4、MgSO4等。
（3）此培养基成分中既能作为氮源同时提供生长因子的是_______________。
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结核分枝杆菌俗称结核杆菌，属胞内寄生菌，是引起结核病的病原菌，下列有关结核杆菌所引起的免疫调节的说法中不正确的是 （ ）
A.结核杆菌能够引发机体产生体液免疫和细胞免疫
B.T细胞可增殖分化形成效应T细胞直接清除结核杆菌
C.吞噬细胞可对结核杆菌的抗原进行非特异性识别和处理
D.过量使用免疫抑制剂会使结核病的发病率出现上升趋势
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结核分枝杆菌俗称结核杆菌，是引起结核病的病原体（寄生在宿主细胞内），可侵犯全身各器官，但以肺结核为最多见。下列有关叙述中，错误的是
A、切除胸腺的人比正常人患肺结核病的风险高
B、结核杆菌第二次侵入人体后机体产生抗体的速度更快
C、人体通过细胞免疫不能将侵入人体内的结核杆菌彻底清除
D、人体主要依赖免疫调节维持内环境稳态并与外界环境相适应
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结核分枝杆菌（M.tuberculosis），是引起结核病的病原菌。建国前结核病死亡率达200-300人/10万，建国后开展了群防群治，儿童普遍接种卡介苗，其发病率和死亡率大为降低。临床用药前，有时需要做细菌相关耐药实验。请回答下列相关问题：
（1）适于结核杆菌生长的培养基中的营养成分一般含有___________________以及水和无机盐，除了提供以上几种主要营养物质外，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及___________的要求。
（2）若对结核杆菌进行分离计数，需要将含有结核杆菌的菌液采用____________法接种于经过_________灭菌后冷却的固体培养基表面，这种接种方法的好处是___________。所有操作都应在___________附近进行。
（3）将分别含等剂量不同抗生素的相同大小的小滤纸圆片均匀置于该平板上的不同位置，在适宜条件下培养一段时间，结果滤纸片周围均出现透明圈，这说明结核杆菌对实验所用抗生素表现为_____________（填“敏感”或“不敏感”）。
（4）接种卡介苗，可以降低结核病的发病率和死亡率，所用的卡介苗属于_________（填“抗原”、“抗体”）。
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科学家运用基因工程技术将结核杆菌 MPT64 基因（能控制合成 MPT64 蛋白）成功导入胡萝卜细胞，最终表达出肺结核疫苗。请回答下列问题：
(1)为获取 MPT64 基因，可从结核杆菌的细胞中提取对应 mRNA，在_____的 作用下合成双链 cDNA 片段，获得的 cDNA 片段与结核杆菌中该基因碱基序列____(填 “相同”或“不同”)。
(2)通常采用_____技术扩增 MPT64 基因，前提是要有一段已知 MPT64 基因的核苷 酸序列，以便根据这一序列合成引物，在操作步骤中需要加热至 90-95℃的目的是_____。
(3)根据农杆菌的特点，如果将 MPT64 基因插入到_____上，通过农杆菌的转化作用，就可以使目的基因进入胡萝卜细胞，并将其插入到植物细胞中上。要确认 MPT64 基因是否在胡萝卜植株中表达，应检测胡萝卜植株中是否含有______。
(4)研究发现，如果将 MPT64 蛋白 20 位和 24 位的氨基酸改变为半胱氨酸，其保存时间将 大大延长，科学家可以生产上述耐储存的 MPT64 蛋白的现代生物工程技术是_。
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科学家运用基因工程技术将结核杆菌MPT64基因(能控制合成MPT64蛋白)成功导入胡萝卜细胞,最终表达出肺结核疫苗。请回答下列问题:
(1)为获取MPT64基因,可从结核杆菌的细胞中提取对应的mRNA,在____的作用下合成双链cDNA片段,获得的cDNA片段与结核杆菌中该基因碱基序列____(填“相同”或“不同”)。
(2)通常采用PCR技术扩增MPT64基因,前提是要有一段已知MPT64基因的核苷酸序列,以便根据这一序列合成____。在操作步骤中需要加热至90~95 ℃,目的是_______________。
(3)根据农杆菌的特点,如果将MPT64基因插入________上,通过农杆菌的转化作用,就可以使目的基因进入胡萝卜细胞,并将其插入植物细胞中的____上。要确认MPT64基因是否在胡萝卜植株中表达,应检测胡萝卜植株中是否含有__________。
(4)研究发现,如果将MPT64蛋白的第20位和24位的氨基酸改变为半胱氨酸,其保存时间将大大延长。可以生产上述耐储存的MPT64蛋白的现代生物工程技术是___________。
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科学家运用基因工程技术将结核杆菌MPT64基因（能控制合成MPT64蛋白）成功导入胡萝卜细胞，最终表达出肺结核疫苗。回答下列问题：
（1）为获取MPT64基因，可从结核杆菌的细胞中提取对应mRNA，在_______的作用下合成双链cDNA片段，该cDNA片段__________(填“可以”、“部分可以”或“不可以”）实现物种间的基因交流。
（2）通常采用PCR技术扩增MPT64基因，前提是要有一段已知MPT64基因的核苷酸序列，原因是____，在操作步骤中需要加热至90～95℃的目的是__________。
（3）根据农杆菌的特点，如果将MPT64基因插入_______上，通过农杆菌的转化作用，就可以使目的基因进入胡萝卜细胞，并将其插入植物细胞中的_____上。要确认MPT64基因是否在胡萝卜植株中表达，应检测胡萝卜植株中是否含有__________。
（4）科学家探知，若能把MPT64蛋白第20位和第24位的氨基酸都改变为半胱氨酸，可以更好保证所生产的肺结核疫苗分子的稳定性。根据蛋白质工程的原理，可对_______进行修饰或改造，以达到生产目的。
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