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在重组DNA技术中，将外源基因送入受体细胞的载体可以是（ ）
A.大肠杆菌的质粒 B.切割DNA分子的酶
C.DNA片段的黏性末端 D.用来识别特定基因的DNA探针
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基因工程重要环节是构建基因表达载体。图1为限制酶EcoRⅠ的识别序列和切割位点，图2表示DNA片段，图3表示目的基因及限制酶切点，图4表示质粒。请回答下列问题：
（1）若图2就是图1中的最左边显示的三个碱基对，则④⑤⑥⑦⑧⑨对应的碱基依次是________。限制酶EcoRⅠ切割外源DNA，切开的位置是图2中编号为______位置的________键。
（2）已知DNA复制子链的延伸方向是5′→3′，图3中的A、B、C、D在不同情况下可以作为引物，在PCR技术中，扩增此目的基因，应该选用________两个作为引物。
（3）用图中质粒和目的基因构建重组质粒，应选用____________________两种限制酶切割，酶切后的载体和目的基因片段，通过______________酶作用后获得重组质粒。为了扩增重组质粒，需将其转入经____________处理过的_____________态的大肠杆菌中。
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阅读以下资料，回答有关基因工程的问题：
资料甲：1973年，博耶（H．Boyer）和科恩（S． Cohen）选用仅含单一EcoR I酶切位点的载体质粒pSC101，使之与非洲爪檐核糖体蛋白基因的DNA片段重组。重组的DNA转入大肠杆菌DNA中，转录出相应的mRNA。至此，基因工程正式问世。
资料乙：1980年， 科学家首次培育出世界上第一个转基因小鼠；1983年科学家又培育出了第一例转基固烟草。
（1）资料甲中实验不仅证明了重组DNA可以进入受体细胞，还能证明外源基因可以在原核细胞中成功_______，并实现物种之间的_______。
（2）资料乙培育转基因烟草用农杆菌感染时，应优先选用烟草_______ （填“受伤的”或“完好的”）叶片与含重组质粒的农杆菌共同培养，选用这种叶片的理由是_________________________。
（3）基因工程中目的基因主要从基因文库中获取，如果基因__________________，还可以通过人工合成方法得到，再利用PCR技术扩增。若一个目的基因经过PCR扩增4次，则需要_______个引物。
（4）蛋白质工程也被称为第二代基因工程，其基本途径是：从______出发→设计预期的蛋白质结构→_____→找到相对应的脱氧核苷酸序列（基因）。
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下列有关基因工程的叙述不正确的是（ ）
A.用同种限制性核酸内切酶切割载体与含目的基因的DNA片段，可获相同黏性末端
B.质粒上的抗生素抗性基因有利于鉴别和筛选含目的基因的受体细胞
C.将重组Ti质粒转入农杆菌之前，常用Ca2+处理农杆菌使其成为感受态细胞
D.用DNA分子杂交法检测目的基因已插入染色体DNA上，则说明转基因植物生产成功
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如图为大肠杆菌及质粒载体的结构模式图，据图回答下列问题：
（1）a所在的区域叫做__________。质粒 DNA分子上有__________ 个限制酶切割位点，供外源 DNA 片段（基因）插入其中。
（2）携带外源 DNA 片段的质粒进入细胞后，停留在细胞中进行__________或整合到染色体DNA上，随染色体DNA进行________。
（3）质粒DNA分子上有特殊的标记基因，其作用是__________。
（4）在基因工程中使用的载体除质粒外，还有__________。（写出2个即可）
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科学家利用基因工程培育出了耐盐的转基因棉花新品系，下列相关叙述错误的是（ ）
A.可以用不同的限制酶切割目的基因与载体以避免目的基因与载体的自身环化和随意连接
B.可通过农杆菌转化法将重组质粒导入受体细胞
C.含耐盐基因的棉花细胞可经植物组织培养获得完整植株
D.通常通过检测目的基因产物来检测重组DNA是否已导入受体细胞
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下图是利用基因工程技术生产可食用疫苗的部分过程,其中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ为四种限制性核酸内切酶。下列有关说法正确的是
A. 构建基因表达载体需要用到EcoRⅠ、PstⅠ两种限制酶
B. 若用图中四种限制酶同时切割质粒，可以产生四个DNA片段
C. 表达载体中除图示标注的结构外还应有启动子和终止子等调控因子
D. 筛选含重组质粒的受体细胞时应在培养基中加入卡那霉素抗性基因
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下列有关基因工程的叙述，错误的是
A. 基因载体上有一个或多个限制酶的切割位点，供外源 DNA 插入
B. 在同一 DNA 分子中，限制酶的识别序列越长，酶切点出现的概率越大
C. 以大肠杆菌为受体细胞时，先要用 Ca2+处理细胞以使其处于感受态
D. 基因工程可以克服不同物种之间的生殖隔离，实现生物的定向变异
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下列有关基因工程的相关叙述，错误的是（ ）
A.获取目的基因是基因工程的核心
B.基因工程可以克服不同物种之间的生殖隔离
C.基因载体上有一个或多个限制酶的切割位点，供外源DNA插入
D.以大肠杆菌为受体细胞时，先要用Ca2＋处理细胞以使其处于感受态
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屠呦呦因发现青蒿素治疗疟疾的新疗法而获得诺贝尔奖。寄生于人体细胞内的疟原虫是疟疾的病原体。科学家通过紫外线处理大量青蒿幼苗后，偶然发现一株高产高效植株，进行基因测序发现该植株控制青蒿素合成相关的一种关键酶的基因发生了突变。
（1）如果用高产青蒿关键酶基因的mRNA反转录产生的cDNA片段与载体连接后储存在一个受体菌群中，这个受体菌群叫做青蒿的__________；获得的cDNA与青蒿细胞中该基因碱基序列__________（填“相同”或“不同”）。
（2）将获得的突变基因导入普通青蒿之前，先构建基因表达载体，图1、2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答：
用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒时不能使用SmaⅠ切割，原因是__________。构建重组质粒时在其目的基因前需要添加特定的启动子和终止子，启动子的作用是______________________。终止子的化学本质是一段有特殊结构的___________。
（3）基因表达载体导入组织细胞后，要通过__________技术培育出转基因青蒿幼苗，鉴定该基因工程是否成功还要进行____________实验，但是不能直接在培养基上培养疟原虫观察，其原因是______________。
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