为研究传统中草药的抗菌效果，某研究组用黄 莲等5种中草药对大肠杆菌等5种细菌进行了体外抑 ...

为研究传统中草药的抗菌效果，某研究组用黄 莲等5种中草药对大肠杆菌等5种细菌进行了体外抑 菌实验。将各种中草药经煎煮、过滤浓缩为lg/ml的 煎剂，取200μl加入平板中央的无底小管牛津杯中，待测药物在培养基中扩散使其周围的细菌生长受到抑制而形成抑菌圈。实验结果如下表

五种中药的药敏实验结果（直径mm）

注：抑菌圈直径<10mm为耐药（一），10 —15mm为中度敏感（+ ） ，15mm以上为高度敏感（ + + ）

（1）检测培养基是否被污染，应采用的方法是__________。

（2）本实验所用的接种方法为__________。接种时需要在酒精灯火焰附近，原因是__________。

（3）伤寒是由伤寒沙门菌引起的，它可以导致胃肠炎和败血症，据表可知，能较为有效治疗该病的中药为_________　 ，判断依据是____________________。

（4）若要设计实验探究黄莲对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度，可将lg/ml的中药煎剂进行梯度稀释，并以__________为对照，各取200μl加入细菌中央的牛津杯中，培养一段时间，抑菌圈直径为__________对应的中药煎剂浓度为最低抑菌浓度。

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研究人员发现儿茶素（C）和稀土离子Yb3+均有抗菌作用。儿茶素（C）是茶叶中茶多酚的主要成分，与细菌的细胞质膜的亲和力强，但抗菌作用较弱：稀土离子Yb3+抗菌作用较强。但与细胞质膜的亲和力较弱，难以到达细菌内部的作用靶点。请回答下列问题：

（1）因发酵程度的不同，茶叶可分为轻发酵茶，半发酵茶，全发酵茶和后发酵茶。发酵过程中，茶叶含有微生物生长所需的________、水、无机盐、生长因子。

（2）为研究儿茶素（C）的抑菌效果，研究人员用40g/L浓度的儿茶素（C）对大肠杆菌进行了抑菌实验，结果如下表所示；

分析实验结果可知：pH为__________________时，该浓度下的儿茶素（C）对大肠杆菌的抑制效果最强。

（3）下列对研究人员研究过程中涉及到的操作，叙述正确的有________________（填序号）。

A．利用 NaOH 和HCI调节培养基的pH

B．培养基在62℃下灭菌15～30分钟

C．用无菌玻璃刮铲将大肠杆菌悬浮液均匀涂布在培养基上

D．培养基的配制步骤依次是：计算→称量→溶化→灭菌→调节PH→倒平板

（4）研究人员用稀土离子Yb3+对儿茶素（C）进行化学修饰，形成配合物Yb3+-C， 并探究其抗菌效果。为了确定配合物中Yb3+：C的最佳摩尔比，研究人员用不同摩尔比的Yb3+-C配合物处理滤纸片，将其置于物理状态为_____且布满金黄色葡萄球菌培养基中，一段时间后，不同滤纸片形成的抑菌圈直径如图所示，可推知Yb3+：C的最佳摩尔比对应的编号为__________。

（5）为探究配合物Yb3+-C的抗菌机理，研究人员利用透射电镜观察了各组金黄色葡萄菌细胞内的超微结构，结果显示：

（a）未加抗菌剂；细菌菌体体较小，其细胞质分在均匀；

（b）C处理：细胞壁和细胞质膜等结构不光滑，略显粗糙；

（c）Yb3+处理：细胞质出现较明显的固缩及空泡化现象；

（d）Yb3+-C处理：细胞壁和细胞质膜等结构发生破裂，细胞质出现了出现严重的固缩及空泡化现象。由此可见，儿茶素（C）和Yb3+ 作用的主要位点分别是________、________，推测Yb3+-C具有更强抗菌作用的机理是______________________。

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为了研究抗生素X对四种不同细菌（1、2、3、4）的作用效果，有人做了下图抗菌实验，下列有关分析正确的是（ ）

A.四天后细菌3 的灰雾地带最长，说明抗生素X 对细菌3 的抑制效果最差

B.四天后细菌2 的灰雾地带最短，说明抗生素X 对细菌2 的抑制效果最差

C.用抗生素X 对细菌2 的抑制比对细菌3 的抑制效果好

D.可以用抗生素X 去治疗由细菌1 引起的疾病

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冬虫夏本是名贵中草药，近年来由于过度采挖濒临灭绝，人工饲养方兴未艾。科学研究者发现，肉毒杆菌Hg4-03 菌株是冬虫夏草优势宿主贡嘎蝠蛾幼虫（以下简称幼虫）肠道有益菌，对幼虫的生长发育具有一定的促进作用。给幼虫饲喂肉毒杆菌 Hg4-03菌株可以增加幼虫体重和提高肠道内纤维素酶活性。根据以下提供的实验材料与用具，完成实验思路，预测实验结果并进行分析。

材料与用具：健康状况相似的幼虫若干只，肉毒杆菌Hg4-03，新鲜珠芽蓼根（幼虫食物）。

恒温培养箱等。

（要求与说明：幼虫体重和酶活性28天测一次，酶的活性测定方法及过程不作要求，实验条件适宜）

（1）完成实验思路

①选择健康状况相似的幼虫若干只，随机均分为甲乙两组，____________________。

②甲组饲喂______，乙组饲喂________________，放入相同条件恒温培养箱进行培养。③28天后测量每只幼虫体重和纤维素酶活性，并记录。

④___________________

⑤统计分析实数据。

（2）请设计一张表格用于记录实验结果________。（要求能够记录前3次实验数据）。

（3）分析与讨论

①研究者发现若新鲜珠芽夢根不进行消毒达不到实验的效果，可能原因是___________。

②你认为人工培育冬虫夏草的生态学价值是什么? ____________________。

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某公司在新冠防疫期间推出一款新型免洗洗手凝胶，为衡量该凝胶的清洗效果，研究人员检测了凝胶洗手前后，手部细菌的数量。凝胶洗手前后的检测流程见下图，回答下列问题：

（1）在进行实验前需要配置培养基，各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源、___________。如果培养乳酸杆菌，还需要在培养基中添加____________。

（2）为统计洗手前后手部细菌的数量，应选择的接种方法是____________。若在M稀释倍数下统计出平板上的菌落数为N，涂布平板时所用的液体体积为V（ml），那么每克样品中的菌数为___________，而实际菌数要比计算值___________。

（3）根据上图所示的步骤得出的实验结果的可信度较低，为了提高实验结果的可信度，请给出两点建议：______________________、_________________________________。

（4）培养一段时间后可根据______________________（至少填两项）等菌落特征初步判断培养基上菌种的类型。

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结核病是由结核分枝杆菌引起的传染病。请回答下列问题：

（1）研究者从患者体内提取病原菌进行分离培养。培养结核分枝杆菌的培养基主要含有天门冬氨酸、甘油、鸡蛋黄、KH2PO4、MgSO4等。此培养基成分中既能作为氮源又能提供特殊的营养物质的是______________________。

（2）为探究不同抗生素对结核分枝杆菌的抑菌效果，取细菌培养液2滴涂布于固体培养基上，然后将浸有相同浓度不同种类的抗生素圆纸片置于培养基表面，37 ℃培养4周，实验结果如甲图，其中圆纸片A、B分别浸过抗生素A和抗生素B，圆纸片C浸过抗生素A、B的混合物。乙图是该菌结构示意图，图中箭头表示不同抗生素的作用位置。

①欲得到甲图实验结果，接种过程用到的实验器材有______________________ (至少写出两个)。

②实验中圆纸片D用作实验对照，对圆纸片D的处理方法是______________________。

③实验结果说明，圆纸片周围清晰区______________________ (“越大”或“越小”)，抗菌效果越好。结合图乙分析，圆纸片C周围清晰区大于圆纸片A和B的原因是____________________________ 。

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美国研究人员通过对大肠杆菌进行基因改造,可以使它将植物纤维逐渐转化为生物燃料。这种细菌不仅能以传统生物能源技术中使用的蔗糖为原料,还能将广泛存在于植物纤维中的半纤维素分解合成为燃料物质。若要将这种大肠杆菌分离出来,应将它们接种在

A. 不含氮源的培养基上

B. 有蛋白胨的固体培养基上

C. 只含半纤维素而无其他碳源的选择培养基上

D. 不含营养要素的培养基上

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炭疽热是由炭疽芽孢杆菌引起的，该细菌可引起动物组织水肿、粘膜出血，幷可造成动物死亡。法国科学家巴斯德在研究牲畜炭疽病时进行了如下实验：给实验绵羊注射毒性已削弱的炭疽芽孢杆菌制剂，这些绵羊感染后没有发病。四天后，给实验绵羊注射毒性极强的炭疽芽孢杆菌制剂，经过一段时间后，实验绵羊全部正常生活。根据以上资料，回答以下问题。

（1）实验绵羊在第二次注射炭疽芽孢杆菌制剂后没有发病，其原理是体内产生＿＿＿＿，该物质的化学本质是＿＿＿＿，它是由＿＿＿＿细胞产生分泌的。与之合成和分泌相关的细胞器有＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿，这种免疫属于＿＿＿＿免疫。

（2）如果不能确定第二次注射的炭疽芽孢杆菌对实验绵羊的毒性是否极强，需要改进实验设计，请在上述实验的基础上补充相应的实验设计原则、步骤。

①实验设计原则：＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿

②操作步骤：＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿

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科学家发现家蝇体内存在一种抗肿瘤蛋白（且具有抗菌能力），受到研究者重视。临床使用发现此蛋白质对肿瘤确实有良好的疗效，可以通过基因工程技术导入大肠杆菌内进行大量生产。其过程大体如图所示：

（1）在基因工程中，获取目的基因的方法有___________________（至少写出两种）。

（2）图中a过程叫_______________，它是基因操作的核心步骤，该过程中切质粒和目的基因的限制酶可以不同，但是产生的粘性末端要满足____________条件。

（3）将抗肿瘤基因导入大肠杆菌，并在大肠杆菌细胞内成功表达产生了抗肿瘤蛋白，由于大肠杆菌具有__________________特点，因此在短时间内就能获得大量的抗肿瘤蛋白。

（4）细胞工程可以作为辅助手段，通过获得特定的单克隆抗体并与抗肿瘤蛋白结合制成“生物导弹”，以实现“靶向杀癌”。下面是单克隆抗体制备过程示意图，请据图回答：

① 图中A过程从小鼠的脾脏中取得的“小鼠细胞”是___________细胞，要获得能产生抗肿瘤蛋白抗体的杂交瘤细胞至少要经过__________次筛选。从小鼠体内提取分离该细胞之前，给小鼠注射的特定的物质是____________________。

② 为检测杂交瘤细胞是否成功的合成了单克隆抗体，可以采用____________的方法。

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研究人员分别对光合细菌和蛔虫进行各种分析、观察等实验，获得的结果如下表。你认为该研究人员的实验记录正确的是          .

A．光合细菌     B．蛔虫       C．都正确       D．都不正确.

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